HIF-1α和YBX1在前列腺癌细胞中上调NonO/p54nrb的表达

前列腺癌缺氧微环境中NonO/p54nrb与YBX1的调控机制研究，通过构建5’端缺失质粒检测其启动子活性，发现HIF-1α在PC-3细胞中显著上调NonO/p54nrb转录水平，同时YBX1在缺氧条件下进一步增强其表达。

　　

摘要

本研究探讨了缺氧（前列腺癌发生的关键因素）对NonO/p54nrb和YBX1蛋白细胞功能的影响。NonO/p54nrb属于paraspeckle蛋白家族，该蛋白家族的核结构域由人类NONO基因编码，已被证实能与雄激素受体、SFPQ和SPI1相互作用。在细胞核中，NonO/p54nrb参与多种生理过程，如转录起始、RNA加工、转录延伸和终止；而YBX1则能同时结合DNA和RNA。在前列腺癌组织中观察到YBX1和HIF-1α的水平升高。通过sqRT-PCR技术分析了HUVEC细胞以及来自不同组织（前列腺、乳腺、结肠、肝脏、胰腺和骨骼）的9种癌细胞系中NonO/p54nrb的表达情况，其中PC3前列腺癌细胞系的NonO/p54nrb表达水平最高。利用模拟剂CoCl₂成功诱导了缺氧微环境，并通过实时PCR检测确认了HIF-1α mRNA水平的升高。为评估NonO/p54nrb启动子的活性，将一系列5’缺失突变体（-730/+529、-516/+529、-336/+529和-159/+529）克隆到pMetLuc荧光素酶载体中。结果显示，在缺氧条件下（48小时后），这些突变体的基础转录活性增强，且这种上调现象在mRNA和蛋白质水平上都得到了验证。研究还分析了外源性YBX1转录因子对NonO/p54nrb mRNA和蛋白质表达的影响，发现所有YBX1过表达的启动子片段均表现出上调趋势。研究结果表明，在PC-3细胞系中，NonO/p54nrb的表达受HIF-1的调控而上调；此外，YBX1转录因子在常氧和缺氧条件下均能增强NonO/p54nrb的表达，尤其是在缺氧条件下这种增强作用更为显著。

图形摘要