作者回复：在骨骼肌特异性Fgf23敲除小鼠中，磷酸负荷后出现肌酐校正的磷尿现象

磷酸系统在骨骼肌中通过FGF23减少肾小管磷重吸收的机制及其实验验证

　　

我们感谢Yanmei Yin博士和Lixin Zhang博士对我们最近发表在《JASN》上的文章“系统性磷酸盐升高会诱导骨骼肌产生成纤维细胞生长因子23（FGF23），从而减少小鼠的肾磷酸盐重吸收”（参考文献[a]1）所提出的宝贵意见。我们非常感谢他们在磷酸盐生理学背景下对我们研究结果的深入讨论。

图1：

24小时尿液中的磷酸盐含量。我们将FGF23注射到HSA-Cre+（KO）小鼠及其遗传对照组（GC）的腹腔内，并给它们注射生理盐水或Na2HPO4/NaH2PO4溶液（每公斤体重含1克磷酸盐[Pi]），然后将小鼠置于代谢笼中24小时。我们分析了24小时尿液样本中的总磷酸盐水平（n=8–10；*P = 0.05；**P = 0.01；***P = 0.001）。组间比较采用双因素方差分析（two-way ANOVA）。FGF23：成纤维细胞生长因子23；GC：遗传对照组。

我们同意，在这项针对骨骼肌特异性缺失FGF23的小鼠以及遗传对照组小鼠的研究中，尿液中的磷酸盐浓度不一定需要以尿肌酐为基准进行标准化。通常情况下，尿液中各种物质的浓度会以肌酐浓度为基准进行标准化，以消除尿液体积带来的干扰。然而，通过收集24小时尿液样本，就无需进行这一步骤，因为我们的关注点是磷酸盐的排泄速率。此外，肌酐的排泄速率与肌肉质量有关，而肌肉质量与磷酸盐排泄之间没有明显的生理关联。虽然以肌酐排泄为基准可能会模糊FGF23敲除（KO）小鼠与对照组小鼠之间磷酸盐排泄量的差异，但我们仍认为这些差异是明显且显著的。

我们也认为，纳入与肌酐无关的肾磷酸盐排泄测量方法非常重要。我们已经分析了24小时尿液样本中的总磷酸盐含量（见图1）。与生理盐水注射相比，磷酸盐注射使对照组小鼠的尿液磷酸盐含量从约7毫克/24小时增加到15毫克/24小时，而在FGF23 KO小鼠中，这一数值仅增加了约9毫克/24小时。这种FGF23 KO小鼠与对照组小鼠之间总尿液磷酸盐含量的差异具有统计学意义。

我们还要指出，FGF23 KO小鼠本身没有表现出任何肌肉表型异常，且FGF23 KO小鼠与对照组小鼠的肌肉质量也没有差异（详见《JASN》文章中的图6B和图7B）。我们对骨骼肌组织的分子分析表明，FGF23 KO小鼠的蛋白质周转率也没有发生变化（见图6、G–L和图7、G–L）。结合我们发现FGF23 KO小鼠的肌肉功能未受影响（见图6A和图7A），这些实验结果表明，骨骼肌组织在FGF23被删除后并未发生显著变化。因此，我们预计FGF23 KO小鼠与对照组小鼠之间的肌酐排泄量也不会有差异。《JASN》文章中的研究结果以及此处所述的发现共同支持了我们的结论：骨骼肌来源的FGF23确实能够减少小鼠的肾磷酸盐重吸收。