摘要A011：表征免疫检查点B7-H7的结构，以优化靶向治疗下的免疫激活效果 免费

《Cancer Research》：Abstract A011: Characterizing the structure of the immune checkpoint B7-H7 to optimize immune activation with targeted therapeutics Free

PD-1/PD-L1轴靶向治疗在肾细胞癌中效果有限，本研究发现B7-H7（HHLA2）作为非重叠免疫检查点，其配体TMIGD2和KIR3DL3分别被特异性抗体阻断。通过单细胞RNA测序和结构预测，证实强效抗体6F10结合B7-H7 IgV1域抑制TMIGD2信号，降低炎症表型，为优化NK细胞激活治疗提供新靶点。

　　

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摘要

引言：

针对PD-1/PD-L1轴的疗法在治疗肾细胞癌（RCC）患者方面取得了显著成效，但大多数患者仍需要其他治疗策略。B7-H7（也称为HLA2）作为一种免疫检查点蛋白已被发现，我们的研究团队发现B7-H7在RCC肿瘤细胞上的表达与PD-L1并不重叠。此外，B7-H7同时具有一个刺激性受体TMIGD2和一个抑制性受体KIR3DL3，这两种受体分别表达在NK细胞和T细胞上。这些受体在淋巴细胞中的表达模式各不相同。针对B7-H7/KIR3DL3的单克隆抗体（mAbs）已进入I期临床试验，相关的前期临床数据也显示出良好的效果。然而，由于目前尚不清楚B7-H7的晶体结构，我们对其如何影响淋巴细胞表型以及mAbs具体结合B7-H7的位置知之甚少。我们开发并描述了具有不同TMIGD2和KIR3DL3阻断能力的B7-H7 mAbs。

方法：

在本研究中，我们通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）分析了B7-H7在肿瘤细胞与NK细胞共培养中的表达情况，这些培养条件包括添加或不添加抗B7-H7 mAbs的情况。我们还通过计算模型预测了B7-H7的结构以及mAbs与B7-H7的结合位点。为了评估B7-H7或KIR3DL3靶向mAbs的影响，我们使用抗B7-H7、抗KIR3DL3或同型对照mAbs处理了K562^B7-H7-NK细胞共培养体系。

结果：

我们使用了两种抗B7-H7 mAb克隆：2C4和6F10，它们分别对TMIGD2的阻断作用较弱和较强。两种克隆均导致炎症相关基因和细胞毒性相关基因的表达降低，尤其是XCL1+ XCL2+ NK细胞的数量显著减少。与作用较弱的2C4克隆相比，作用较强的6F10克隆使得炎症相关基因的表达进一步降低。这一结果与B7-H7通过TMIGD2提供共刺激信号的机制一致。抗KIR3DL3相对于同型对照mAb几乎没有影响，这表明KIR3DL3在早期NK细胞激活过程中作用有限，因为其表达频率较低。利用CytoSig分析工具，我们发现共培养条件下的XCL1+ XCL2+ NK细胞亚群对IL-2具有高度敏感性。我们使用多种结构预测工具（包括AlphaFold3和Boltz-2）对B7-H7及其相互作用蛋白的结构进行了预测。预测结果显示，apo-B7-H7的IgC区和IgV2区之间存在β链共享结构，这在Ig蛋白结构中较为罕见。与其他研究团队的数据一致，TMIGD2和KIR3DL3在B7-H7上具有不同的结合位点：TMIGD2结合B7-H7的IgV1区，而KIR3DL3结合IgC-IgV2串联结构。预测结果表明6F10和2C4确实能够结合B7-H7的IgV1区，这与观察到的TMIGD2阻断效果相符。

结论：

本研究中基于单细胞RNA测序的分析表明，针对B7-H7的策略可能通过IL-2为基础的治疗手段增强抗肿瘤效果，并强调了保留TMIGD2-B7-H7相互作用以诱导高度活性的NK细胞的重要性。