膜E-钙黏蛋白在不同亚型垂体神经内分泌肿瘤中的表达及其与侵袭性的关联

《International Journal of Molecular Sciences》：Membranous E-Cadherin Expression in Different Subtypes of Pituitary Neuroendocrine Tumors and Its Association with Invasiveness Anna Krzentowska, Beata Biesaga, Anna Merklinger-Grucha?a and Filip Go?kowski

本研究探讨了膜E-钙黏蛋白（mE-cad）在垂体神经内分泌肿瘤（PitNETs）不同亚型及转录因子（TF）谱系中的表达差异，并评估了其与肿瘤侵袭性（尤其是海绵窦侵犯）的关联。结果表明，mE-cad低表达（IRS 1–2）与更高的侵袭风险独立相关，提示其可能作为预测PitNETs侵袭性的生物标志物，且其表达水平因肿瘤亚型和TF谱系而异。

　　

引言

垂体神经内分泌肿瘤（PitNETs）是最常见的颅内肿瘤之一，约占所有颅内肿瘤的15%。根据2022年世界卫生组织（WHO）的分类，它们基于起源的转录因子（TF）谱系（如Pit-1、SF-1、TPIT）进行分类。E-钙黏蛋白（E-cad）是钙粘蛋白家族的一种跨膜粘附蛋白，由CDH1基因编码，其膜表达（mE-cad）对于维持细胞间粘附至关重要。mE-cad表达的减少或错位可能与肿瘤侵袭性相关，但既往研究结果存在不一致。本研究旨在评估mE-cad在不同PitNETs亚型和TF谱系中的表达差异，并探讨其与肿瘤侵袭性的关联。

结果

1. 1.
   研究队列特征
   研究共纳入69例患者。mE-cad表达的中位百分比为1.25%，免疫反应评分（IRS）的中位值为1.0，数据呈右偏分布。
2. 2.
   mE-cad表达与肿瘤亚型及TF谱系的关联分析
   mE-cad表达在不同肿瘤亚型中存在差异。平均表达最低的是促肾上腺皮质激素细胞肿瘤（平均3.2%）和促乳素细胞肿瘤（平均0.5%），促性腺激素细胞肿瘤的平均表达为5.2%，而多激素性PITNETs的表达最高（平均17.5%）。按TF谱系分析，表达≥2种转录因子的肿瘤mE-cad水平最高（平均8.9%），TPIT谱系肿瘤的表达最低（平均3.2%）。
3. 3.
   mE-cad表达分组分析
   根据数据分布，将mE-cad表达分为三组：缺失（0%）、弱（1–10%）和中度（>10%）。mE-cad表达弱或缺失的肿瘤体积显著大于表达水平较高的肿瘤（p = 0.03）。根据IRS分类（0，1–2，3–6）分析，临床特征或肿瘤特性未见显著差异，但较低IRS分类的肿瘤有体积更大的趋势（p = 0.06）。
4. 4.
   mE-cad表达与海绵窦侵袭（Knosp分级）的关联分析
   根据Knosp分级将肿瘤分为非侵袭性（0-2级）和侵袭性（3-4级）。分析发现，侵袭性肿瘤更常呈现较低的IRS值（IRS 1–2）（经Holm–Bonferroni校正后p = 0.04）。mE-cad表达百分比也呈现类似趋势，侵袭性肿瘤更常见低表达（1–10%）（p = 0.064）。多变量逻辑回归模型显示，在调整肿瘤体积后，低mE-cad表达（IRS 1–2）的肿瘤发生海绵窦侵袭的几率显著高于高表达（IRS 3–6）的肿瘤（调整后OR = 6.0，95% CI 1.08–33.4，p = 0.04）。肿瘤体积本身也是侵袭的独立预测因子（调整后OR = 4.0，95% CI 1.50–10.7，p = 0.01）。
5. 5.
   促性腺激素细胞PitNETs亚组分析
   在最大的亚组——促性腺激素细胞肿瘤（n=40）中分析，结果与整体队列一致。调整多重检验后，IRS分类和mE-cad阳性细胞百分比均与Knosp分级的肿瘤侵袭性显著相关（IRS：调整后p = 0.012；mE-cad %：调整后p = 0.014）。逻辑回归分析也显示，IRS 1–2的肿瘤比IRS 3–6的肿瘤有更高的侵袭几率。

讨论

mE-cad是维持细胞间粘附的关键蛋白。本研究在69例病例中观察到mE-cad完全缺失表达的比例为49.2%，与既往研究相似。分析发现mE-cad表达缺失或低表达（<10%）的肿瘤体积更大。

本研究最重要的发现是mE-cad表达与肿瘤侵袭性相关。侵袭性肿瘤更频繁地表现出低IRS（1-2），并且低但可检测到的mE-cad表达（IRS 1-2）的肿瘤具有最高的海绵窦侵袭几率，这可能反映了细胞粘附和侵袭性调控机制的生物学异质性。在促性腺激素细胞肿瘤亚组中进行的敏感性分析证实了与整体队列相同的关联方向。

不同PitNETs亚型的mE-cad表达存在差异，本研究观察到促肾上腺皮质激素细胞、促乳素细胞和促性腺激素细胞肿瘤的表达较低。文献中对不同亚型的研究结果不一，例如在促乳素细胞肿瘤中，E-cad/catenin复合物的表达减少可能影响肿瘤行为；在促生长激素细胞肿瘤中，E-cad被认为是预测生长抑素受体配体（SRLs）反应的最佳分子预测因子之一。

按TF状态分析，mE-cad表达最低的是零细胞腺瘤，其次是TPIT谱系肿瘤，表达≥2种TFs的肿瘤表达最高。这种变异提示E-cad水平可能反映了肿瘤的分化程度和转录程序的复杂性。

既往文献关于E-cad表达与垂体肿瘤侵袭性的关联结果不一致，可能归因于评估方法（如膜表达与核表达）、所用抗体、评分系统以及研究的垂体腺瘤类型（如GH-、PRL-或NF-PitNETs）的异质性。

本研究结果表明，mE-cad在区分肿瘤侵袭性方面仅具有中等能力，但它可作为评估促性腺激素细胞肿瘤侵袭性的补充工具，并结合其他分子和临床参数提供额外信息。

本研究的局限性包括队列的异质性以及某些肿瘤亚型样本量小。尽管如此，它有助于理解E-cad在PitNETs中的作用。

材料与方法

本研究对69例患者的PitNETs进行了回顾性免疫组织化学和放射学分析。肿瘤根据2022年WHO分类，基于垂体激素和谱系特异性TF（Pit-1、SF-1、TPIT）的免疫组织化学（IHC）染色进行分类。侵袭性通过术前垂体磁共振成像（MRI）使用Knosp分级进行评估。mE-cad的IHC评估使用特异性抗体，阳性反应仅计为肿瘤细胞的膜染色。染色强度评分（0-3分）与阳性细胞比例评分（0-4分）相乘得到免疫反应评分（IRS，0-12分）。统计分析方法包括Mann-Whitney U检验、Kruskal-Wallis检验、卡方检验、ROC分析以及单变量和多变量逻辑回归分析。

结论

本研究结果表明，mE-cad表达降低与PitNETs的侵袭性相关，并且其表达因肿瘤亚型和TF状态而异。mE-cad可能作为预测PitNETs侵袭性（尤其是在促性腺激素细胞肿瘤中）的潜在生物标志物。