摘要: 糖尿病主要是由胰岛素分泌不足或胰岛素受作用缺陷所导致,该病患者体内胰岛
β细胞功能存在不同程度的受损。本研究以Rin-m5F胰岛
β细胞为研究对象,探究葛根素改善胰岛
β细胞损伤及其作用机制。采用Cell Counting Kit-8（CCK-8）实验检测细胞存活率,筛选诱导剂葡萄糖浓度和葛根素给药浓度。流式细胞术观察葛根素对胰岛
β细胞损伤模型中凋亡的影响。分子对接技术分析葛根素与B淋巴细胞瘤-2（Bcl-2）蛋白的结合能,并结合Western blot实验检测Bcl-2及其下游相关蛋白的表达量。CCK-8结果显示, 50 mmol·L
-1的葡萄糖对Rin-m5F胰岛
β细胞造成损伤,且葛根素(25～200μmol·L
-1)呈剂量依赖性改善胰岛
β细胞损伤。流式细胞术结果显示,葛根素能够降低细胞凋亡。分子对接结果显示,葛根素与Bcl-2结合能良好。进一步Western blot结果显示,葛根素促进Bcl-2蛋白的表达,抑制凋亡通路Bcl-2相关X蛋白（Bax）、半胱天冬蛋白酶-3（Caspase-3）、聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶1（PARP-1）表达;同时,葛根素可促进微管相关蛋白1轻链3（LC3） II/I的表达。在加入Bcl-2抑制剂Venetoclax后,葛根素无改善胰岛
β细胞损伤和抑制细胞凋亡作用,且无促进Bcl-2蛋白表达能力,表明抑制Bcl-2后葛根素失去了改善胰岛
β细胞损伤作用。综上,葛根素通过激活Bcl-2后发挥改善胰岛
β细胞损伤作用,为含葛根中医方药治疗糖尿病的作用机制深入研究提供参考。
