基于网络药理与分子对接探讨香青兰对急性肾损伤的作用及机制研究

　　

摘要: 该研究基于网络药理学、分子对接和动物实验探讨香青兰（Dracocephalum moldavica L.）对急性肾损伤（acute kidney injury, AKI）的作用及机制。通过网络药理学研究获取香青兰治疗AKI的有效成分及靶点,筛选出17个活性成分及60个交集靶点,其中核心靶点12个。通过基因本体论（Gene Ontology, GO）功能和京都基因与基因组百科全书（Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes, KEGG）通路分析,筛选发现其功能主要富集于癌症等相关通路,并对活性成分与核心靶点进行分子对接,结果显示其与基质金属蛋白酶9（matrix metalloprotein 9, MMP9）、糖原合酶激酶-3β（glycogen synthase kinase-3β, GSK-3β）有较强的关联性。实验选取香青兰的提取物作为治疗药物,将ICR小鼠随机分为正常组、模型组、香青兰提取物低、中、高(90、180、360 mg·kg^-1)剂量组、氨磷汀组(200 mg·kg^-1)、尿毒清颗粒组(3 750 mg·kg^-1),提前7天灌胃（intragastric gavage, ig）给药,氨磷汀组第7天腹腔注射（intraperitoneal injection, ip）氨磷汀溶液,第7天给药结束2 h后除正常组外其余组采用ip顺铂（cisplatin, CDDP）溶液构建AKI小鼠模型,造模72 h后进行取材,本实验获新疆药物研究院动物伦理委员会批准（批准编号:XJIMM-20240802）。计算肝、脾、肾的脏器指数;试剂盒测定小鼠血清的血肌酐（serum creatinine, SCr）、尿素氮（blood urea nitrogen, BUN）,小鼠肾脏中的谷胱甘肽过氧化物酶（glutathione peroxidase, GSH-PX）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）,ELISA试剂盒检测小鼠肾脏中的肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）、白介素-6（interleukin-6, IL-6）、白介素-1β（interleukin-1β, IL-1β）;苏木素-伊红（hematoxylin-eosin, HE）染色和过碘酸-雪夫（periodic acid-Schiff, PAS）染色观察肾脏的病理变化; Western blot检测MMP9、GSK-3β、β-连环蛋白（β-catenin）、Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2associated X-protein, Bax）和B细胞淋巴瘤2蛋白（B-cell lymphoma-2, Bcl-2）。实验结果表明,香青兰提取物具有保护AKI小鼠肾功能的作用,可以显著改善AKI小鼠的脾、肝、肾的脏器指数;显著降低血液中SCr和BUN的含量;降低肾脏TNF-α、IL-6、IL-1β的水平;上调肾脏GSH-PX和SOD的水平;改善肾脏的病理损伤;以及调节肾组织中MMP9、GSK-3β、β-catenin、Bax、Bcl-2的表达。结果提示,香青兰提取物可能通过调节GSK-3β/β-catenin信号通路的表达,发挥对CDDP引起的AKI的保护作用。