在失眠小鼠模型中,利用蛋白质沉淀法和HILIC-UPLC–MS/MS技术同时定量十二种内源性HPA轴化合物

《RAPID COMMUNICATIONS IN MASS SPECTROMETRY》:Simultaneous Quantification of Twelve Endogenous HPA Axis Compounds by Protein Precipitation and HILIC-UPLC–MS/MS in a Mouse Model of Insomnia

【字体: 时间:2026年03月17日 来源:RAPID COMMUNICATIONS IN MASS SPECTROMETRY 1.7

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  准确量化HPA轴中的神经递质和激素对解析其在神经退行性疾病中的病理作用至关重要。本研究开发了一种基于固相萃取(SPE)和亲水相互作用液相色谱-串联质谱联用(HILIC-UPLC-MS/MS)的检测方法,可同时测定HPA轴12种内源性化合物。该方法通过FDA标准验证,线性范围0.19-19.53 ng/mL,准确度(相对偏差)和精密度(相对标准偏差)均在±15%以内,基质效应(85.7%-114.3%)和提取效率(89.1%-108.9%)均满足要求,显著优于其他LC-MS技术。

  

摘要

研究背景

准确量化下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴中的神经递质和激素对于阐明它们在神经退行性疾病中的病理作用至关重要。

方法

本研究开发了一种固相萃取(SPE)结合亲水相互作用液相色谱-串联质谱(HILIC-UPLC-MS/MS)的方法,用于同时检测HPA轴中的12种内源性化合物。该方法已根据FDA标准进行了全面验证。

结果

所有分析物在0.19–19.53 ng/mL的浓度范围内均表现出良好的线性,定量下限(LLOQ)介于0.19至19.53 ng/mL之间。准确度(相对偏差)和精密度(相对标准偏差)均在±15%范围内。评估了基质效应(85.7%–114.3%),发现萃取效率令人满意(89.1%–108.9%)。与其他基于LC-MS的技术相比,该方法通过使用SPE柱有效消除了内源性物质的干扰。

结论

所提出的方法在线性、精密度、准确度和稳定性方面表现优异,证明了其在分析复杂生物样本时的实用性和可靠性。

利益冲突

作者声明没有利益冲突。

数据可用性声明

支持本研究结果的数据可应合理要求向通讯作者索取。

同行评审

为了保证透明度,与本文相关的同行评审文件可在此链接查看:https://www.webofscience.com/api/gateway/wos/peer-review/10.1002/rcm.70063

第二轮评审
编辑决定函 2026/02/26
第一轮评审
编辑决定函 2025/12/25
评审员1报告 2025/12/25
评审员2报告 2025/12/22
评审员2报告附件1 2025/12/22

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