从中国新疆骆驼奶中分离出的假单胞菌属菌株的多样性、酶活性及生物膜形成

《International Journal of Dairy Technology》：Diversity, enzymatic activity and biofilm formation of Pseudomonas species isolated from camel milk in Xinjiang, China

骆驼奶中嗜冷菌多样性及酶活性研究揭示：新疆骆驼奶中分离出214株嗜冷菌，假单胞菌属占比11.2%，其蛋白酶活性最高（16.26 U/mL），121℃热处理后仍保留33.33%活性；红色链球菌产生的脂酶热稳定性最佳（43%活性保留）。31%菌株具有生物膜形成能力，OD595值0.365-2.012。该研究为骆驼奶防腐工艺优化提供理论依据。

　　

摘要

背景

骆驼奶因其独特的营养价值和健康益处而备受重视，但在冷藏过程中容易受到嗜冷细菌（如Pseudomonas）的污染，导致变质。这些细菌会产生耐热酶，能够在巴氏杀菌后存活并引发变质现象。了解中国骆驼奶中Pseudomonas的多样性和酶活性对于保持产品质量和安全性至关重要。

目的

本研究旨在探讨新疆骆驼奶中Pseudomonas的多样性、蛋白水解活性、脂肪水解活性以及生物膜形成能力。

方法

从新疆的骆驼养殖场采集骆驼奶样本，在6.5°C条件下培养以分离嗜冷细菌，然后通过16S rRNA基因测序进行鉴定。首先使用琼脂扩散试验筛选产生蛋白酶和脂肪酶的菌株，随后通过偶氮酪蛋白（azocasein）和对硝基苯基棕榈酸（p-NPP）检测法量化其酶活性。通过高温处理来检测这些酶的热稳定性。利用96孔微孔板方法评估各菌株的生物膜形成能力。

结果

共分离出214株嗜冷细菌，其中Acinetobacter（53.7%）和Pseudomonas（11.2%）占主导地位。超过三分之一的菌株能够产生导致变质的酶。Pseudomonas属菌株的蛋白酶活性最高。Pseudomonas bubulae的蛋白酶活性最强（16.26 U/mL），且在121°C下处理10分钟后仍有33.33%的活性保留。由Chryseobacterium yeoncheonense产生的脂肪酶具有最高的耐热性，在相同的高温处理下仍保留了43.00%的活性。此外，31.0%的嗜冷菌株表现出中等的生物膜形成能力，其OD₅₉₅值介于0.365至2.012之间。

结论

本研究揭示了骆驼奶中嗜冷细菌的多样性及其产生的耐热变质酶，其中Pseudomonas的生物膜形成和耐热蛋白酶是导致变质的关键因素，为改进行业控制方法提供了依据。

利益冲突

作者声明本研究是在没有任何可能构成利益冲突的商业或财务关系的情况下进行的。

数据可用性声明

所有支持本论文结论的数据将在合理请求下由作者提供。