《Veterinary Parasitology: Regional Studies and Reports》：Molecular survey of tick-borne pathogens in
Otobius megnini from Central Mexico with special emphasis on
Bartonella detection
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为探究软蜱Otobius megnini在墨西哥中部是否作为蜱媒病原体的潜在媒介，特别是巴尔通体（Bartonella）的携带情况，研究人员收集了来自牛、犬及环境的690只蜱样本。研究发现，在墨西哥州的牛源饱血若虫中首次全球性检测到牛巴尔通体（Bartonella bovis）DNA，而其他目标病原体（如无形体、柯克斯体、埃立克体、立克次体、巴贝斯虫）均未检出。该研究揭示了O. megnini与B. bovis的潜在关联，强调了其在一体健康框架下的兽医与公共卫生意义。
在畜牧业生产中，寄生虫，尤其是蜱，是影响全球家畜健康与生产力的重大挑战。它们不仅是直接吸血的“吸血鬼”，还能传播多种细菌和原虫病原体，导致诸如牛无形体病、巴贝斯虫病等重要经济疾病。然而，在众多蜱种中，软蜱（Argasidae）的研究相对滞后。其中，刺耳蜱（Otobius megnini）是一种可能起源于新北区的软蜱，已通过牛和马等宿主的活动传播至全球。这种蜱的幼虫和若虫阶段嗜血，偏好寄生于包括偶蹄目、食肉目乃至灵长类（包括人类）在内的多种哺乳动物外耳道，可引发耳炎、组织损伤、毒血症、肌病乃至严重贫血和体重下降。尽管其兽医重要性已被认识，但O. megnini作为病原体潜在传播媒介的作用仍鲜为人知。此前研究仅零星报道过其可能与Q热病原体伯氏柯克斯体（Coxiella burnetii）以及无形体（Anaplasma sp.）的维持有关。在墨西哥，虽然历史记录显示O. megnini分布于至少21个州，并与家畜、伴侣动物乃至野生动物相关，但关于其携带重要医学和兽医学病原微生物的信息仍然匮乏。为了填补这一知识空白，评估墨西哥中部地区O. megnini种群是否携带人兽共患蜱媒病原体，并特别关注巴尔通体（Bartonella）的检测，成为了明确的研究重点。
研究人员在2019年1月至2023年7月期间，从墨西哥中部三个州（墨西哥州、瓜纳华托州、伊达尔戈州）的狗（Canis lupus familiaris）、牛（Bos taurus）及其周边环境中采集了O. megnini标本。通过形态学鉴定后，对所有690份标本（包括42只雌虫、13只雄虫、624只若虫和11只幼虫）分别使用两种商业试剂盒或Chelex-100溶液提取基因组DNA。利用针对特定病原体基因设计的引物，通过常规聚合酶链式反应（PCR）对样本进行筛查，目标病原体包括无形体（Anaplasma）、巴尔通体（Bartonella）、柯克斯体（Coxiella）、埃立克体（Ehrlichia）、立克次体（Rickettsia）和巴贝斯虫（Babesia）等。PCR阳性产物经测序验证，并通过BLASTn比对和最大似然法（Maximum Likelihood）构建系统发育树进行确认和进化关系分析。
结果
1. 样本采集与鉴定
共分析了来自12个地点的690份O. megnini标本，其中从牛（39头）和狗（11只）身上分别采集了部分标本，另有大量标本（例如在墨西哥州特斯科科德莫拉和圣费利佩）来自环境。若虫是数量最多的发育阶段，而幼虫仅从狗身上采集到。
2. 病原体检测结果
在所有样本中，仅在10只采集自墨西哥州牛的饱血若虫中检测到了巴尔通体DNA。这10份阳性样本分别来自特斯科科德莫拉（6份）和圣马特奥阿滕科（4份）。对其他所有目标病原体（Anaplasma, Coxiella, Ehrlichia, Rickettsia, Babesia）的检测结果均为阴性。
3. 巴尔通体的鉴定与系统发育分析
通过对巴尔通体柠檬酸合成酶（gltA）基因和RNA聚合酶β亚基（rpoB）基因的扩增与测序，在阳性样本中分别鉴定出5个和3个单倍型。BLASTn比对显示，这些序列与之前从马来西亚、巴西、危地马拉等国的牛中报道的牛巴尔通体（Bartonella bovis）序列具有高度相似性（99%以上）。系统发育分析进一步证实，本研究中获得的序列与来自马来西亚、巴西和危地马拉的B. bovis序列聚集在一起，形成高支持度的单系群。这是全球范围内首次在软蜱属Otobius，特别是O. megnini中记录到巴尔通体属的成员。
4. 流行率
在检测到阳性样本的两个地点，局部流行率分别为24%和28.57%。然而，考虑到所有采样地点，牛巴尔通体在O. megnini中的总体流行率仅为1.45%。
讨论与结论
本研究不仅确认了O. megnini在墨西哥中部三州的持续存在，更新了其地理分布记录，更重要的是取得了突破性发现：在全球首次于软蜱O. megnini中分子检测到牛巴尔通体（Bartonella bovis）。序列和系统发育分析强有力地支持了这一鉴定结果。
O. megnini在墨西哥寄主范围广泛，涉及至少4个目12种哺乳动物，其中牛和狗是最常见的寄主。本次研究中幼虫仅在狗身上发现，提示在畜牧生产单元中，狗与牛的密切共处可能促进了蜱生活史的完成，同时也增加了人类因接触宠物而意外被感染（尤其是外耳道）的风险。因此，O. megnini应被视为在一体健康（One Health）框架下具有重要意义的体外寄生虫，因为它关联了家畜、伴侣动物和人类。
关于在蜱体内检测到B. bovis的意义，研究进行了审慎的讨论。由于所有阳性样本均为饱血若虫，检测到的DNA有可能来源于宿主血液而非蜱体内的稳定感染。牛实验感染研究表明，患畜可维持超过100天的菌血症，而O. megnini若虫阶段吸血时间较长，因此有可能从菌血症宿主获得细菌。然而，历史上及本研究数据显示，蜱体内B. bovis的流行率显著低于家畜中的流行率，这提示蜱不太可能是该巴尔通体的有效生物媒介。蜱在巴尔通体传播中的作用长期存在争议，实验研究对其媒介能力的支持有限，且目前仅在少数硬蜱（如长角血蜱（Rhipicephalus sanguineus s.l.）和蓖子硬蜱（Ixodes ricinus））中证实了有限的经卵传播。因此，尚不能排除检测到的DNA只是残留宿主血液的可能性。尽管如此，也不能完全排除O. megnini作为潜在传播媒介的作用，需要进一步的实验研究来确认其是否具备传播B. bovis的能力。
本研究发现的其他目标病原体均为阴性，这可能与O. megnini单一宿主（monoxenous）的生活史有关，即其发育阶段均在同一个宿主上完成，这减少了暴露于多种病原体来源的机会。
研究强调了公共卫生意义。牛巴尔通体（B. bovis）已在包括墨西哥在内的全球多地牛群中被发现，最近在墨西哥韦拉克鲁斯州甚至报告了全球首例人感染B. bovis病例（与锐器伤相关）。鉴于O. megnini可在农村社区侵染人类，监测这种潜在嗜人性蜱及其携带的病原体成为优先事项。
重要意义
- 1.
首次记录：这是全球范围内首次在软蜱属Otobius（O. megnini）中分子检测到巴尔通体（Bartonella），具体为牛巴尔通体（B. bovis），填补了该蜱种病原体携带谱的知识空白。
- 2.
地理分布更新：研究确认了O. megnini在墨西哥中部三州的持续存在，为理解其生态分布提供了新数据。
- 3.
兽医与公共卫生警示：研究将O. megnini置于一体健康框架下，指出其作为连接家畜、伴侣动物和人类的潜在病原体“桥梁”的可能。尽管媒介作用未定，但其在菌血症宿主上吸血并携带病原体DNA的事实，以及与人类感染的潜在关联（通过狗或直接侵染），提示需要加强监测。
- 4.
研究局限性：研究指出了横断面设计、无法确定媒介能力、可能检测到的是宿主残留血DNA等局限性，为未来研究指明了方向，即需要更广泛的螨学监测、分子流行病学调查以及关键的实验性传播研究。
综上所述，这项发表在《Veterinary Parasitology: Regional Studies and Reports》上的研究，通过系统的分子调查，揭示了墨西哥中部刺耳软蜱O. megnini携带牛巴尔通体的新现象，首次建立了该蜱种与巴尔通体之间的关联。尽管其确切的流行病学角色（是机械性携带者还是生物性媒介）尚需实验证实，但这一发现无疑提升了对O. megnini潜在兽医和公共卫生风险的认识，强调了在蜱媒病监测和一体健康实践中不应忽视此类软蜱的重要性。
