《Microorganisms》：Seroprevalence of Leishmania spp. Infection in Cats in Portugal
André Pereira,
Joana Mour?o,
José Manuel Cristóv?o,
?ngela Xufre and
Carla Maia
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本研究通过直接凝集试验（DAT）调查了葡萄牙全国1080只猫的利什曼原虫（Leishmania spp.）抗体血清阳性率，揭示了8.9%的总体流行率，并发现地区是血清阳性的唯一独立预测因子，阿尔加维地区的猫感染风险更高。这首次提供了亚速尔群岛猫暴露的血清学证据，强调了在“一体健康”框架下将猫纳入多宿主监测的重要性。
摘要
婴儿利什曼原虫（Leishmania infantum）是一种由白蛉传播的原生动物寄生虫，是葡萄牙的地方性病原体，主要在家犬中流行，人类内脏利什曼病仍是公共卫生关切。越来越多的证据表明，猫同样易感，并可能参与本地传播。本研究旨在估算葡萄牙猫的利什曼原虫血清阳性率，并识别潜在风险因素。研究分析了2024年12月至2025年3月期间收集的，覆盖葡萄牙大陆所有行政区和亚速尔群岛的1080份猫血清样本。通过直接凝集试验检测抗利什曼原虫抗体。结果显示，总体血清阳性率为8.9%（96/1080；95%CI 7.3–10.7）。在特塞拉岛（亚速尔群岛）检测到一例血清阳性猫（1/10）。在多变量逻辑回归分析中，地区是血清阳性的唯一独立预测因子，来自阿尔加维地区的猫感染几率高于其他地区。这些发现表明猫的广泛暴露与已知的犬类和人类流行热点区一致，在亚速尔群岛的检出提示可能存在本地传播，支持了在“一体健康”框架下将猫纳入多宿主监测。
1. 引言
婴儿利什曼原虫是一种重要的媒介传播人畜共患病病原体。在葡萄牙，该感染是地方性的。犬是主要的储存宿主。近年来，有证据显示猫不仅对婴儿利什曼原虫易感，还能将病原体传播给媒介，参与循环。葡萄牙的区域性研究报道的猫利什曼原虫血清阳性率在0.0%到3.7%之间，但全国性数据有限。因此，本研究旨在采用与近期一项全国性犬类血清学调查相似的方法学路径，估算葡萄牙猫的利什曼原虫感染血清阳性率，并探究与猫暴露相关的潜在风险因素。
2. 材料与方法
2.1. 研究设计与采样
这是一项全国性横断面血清流行病学研究，样本来源于一家兽医诊断实验室提供的、于2024年12月至2025年3月期间在兽医诊所采集的猫血清样本。采用分层随机抽样策略以确保全国代表性。样本目标量基于先前葡萄牙大陆犬类血清学调查的预期流行率，并针对猫的较低流行率进行调整。样本的可用元数据包括来源地区、品种、年龄和性别。
2.2. 抗利什曼原虫抗体检测
使用直接凝集试验检测抗利什曼原虫抗体。猫血清在含β-巯基乙醇的盐水中进行倍比稀释，加入DAT抗原后孵育，肉眼判读凝集结果。以1:400的血清稀释度作为阳性判定阈值。每次检测均包含阳性和阴性对照以确保可靠性和可重复性。
2.3. 统计分析
采用IBM?SPSS?Statistics v 25.0进行统计分析。血清阳性率定义为总样本中DAT阳性动物的比例。通过皮尔逊卡方检验或费希尔精确检验评估血清阳性率在解释变量各分类间的差异。对单变量分析中p ≤ 0.20的变量，通过逻辑回归模型评估与血清阳性率的关联，结果以调整后的比值比表示。利用QGIS软件绘制了地区水平的血清阳性率专题地图。
3. 结果
本研究共筛查了1080只猫，样本来自葡萄牙大陆所有行政区以及亚速尔群岛的圣米格尔岛和特塞拉岛。样本中猫的中位年龄为9岁，54.5%为雄性，绝大多数动物（91.5%）被归类为欧洲短毛猫。
总体血清阳性率为8.9%，抗体滴度范围从1:400到1:102,400。在阳性猫中，5.2%的滴度为1:400–1:800，41.7%为1:1600–1:6400，53.1%滴度大于1:6400。血清阳性率在不同地区之间存在显著差异。在葡萄牙大陆，阿尔加维地区的阳性比例最高（14.5%），其次是北部地区（9.9%），而中部和南部阿连特茹地区的比例较低。在行政区层面，血清阳性率范围从0.0%到16.7%，在塞图巴尔、波塔莱格雷和法鲁记录的阳性比例最高。
在亚速尔群岛，在特塞拉岛的一只猫中鉴定出一例血清阳性。在血清阳性率与性别、年龄组或品种之间未发现显著关联。此外，年龄与抗体滴度之间未观察到显著相关性。在多变量逻辑回归分析中，地区是唯一与利什曼原虫血清阳性显著相关的变量。与所有其他地区的猫相比，来自阿尔加维的猫血清阳性的几率更高。
4. 讨论
本次全国性调查提供了葡萄牙迄今为止对家猫利什曼原虫暴露最全面、地理覆盖最广的评估。8.9%的总体血清阳性率落在地中海国家报告的家猫血清阳性率范围内，证实了生活在流行地区的猫经常暴露于受感染的白蛉。在葡萄牙背景下，本研究估计的流行率高于迄今进行的大多数猫血清学调查。与近期一项全国性犬类血清学调查（12.5%）相比，本研究中观察到的血清阳性猫的比例约为犬类的三分之二，这与猫的暴露通常构成犬类感染压力的一个重要但始终较低的部分这一模式相符。这些发现支持了猫虽然比犬更少受影响，但仍经常暴露于寄生虫并可能参与本地传播动力学的观点。
地理差异显著，最高值出现在历史上以传播强度高和白蛉条件适宜而闻名的阿尔加维地区。在行政区层面，在塞图巴尔、波塔莱格雷和法鲁识别出的较高血清阳性率，与已知的犬类和人类热点区高度吻合，表明猫是在维持利什曼原虫在其他宿主中传播的相同生态和昆虫学景观中暴露的。波尔图区的血清阳性率也值得注意，这与近期犬类和人类数据显示沿海北部地区暴露增加的模式一致。
本研究最相关的发现之一是在特塞拉岛的一只猫中检测到抗利什曼原虫抗体，这首次提供了亚速尔群岛猫暴露的血清学证据。结合近期在亚速尔群岛描述的一例犬类病例，这些发现表明当地传播的可能性值得进一步调查。未观察到血清阳性与性别、年龄组或品种之间的关联，这一发现与先前研究一致。多变量分析中观察到的强烈地区效应强化了这样一个观点：环境和行为因素，而非宿主内在特征，是暴露的主要决定因素。
研究存在一些方法学考量。并非所有地区都达到了行政区水平的抽样目标，限制了将局部估计值外推到地区人口的能力。所有样本均在典型的媒介非活动季节收集，这最大程度减少了近期感染的混杂效应。选用的1:400的DAT阈值是为了确保与全国犬类调查的方法学可比性，但该检测在猫中检测抗利什曼原虫抗体的分析性能尚未得到充分表征。在血清阳性猫中，抗体滴度范围很广，但滴度大小应谨慎解释，因为血清学水平本身不能可靠区分活动性感染和既往暴露。此外，由于缺乏临床信息，无法评估血清阳性与临床表现之间的关系。猫免疫缺陷病毒和猫白血病病毒等逆转录病毒共感染的信息也未知，这可能影响血清阳性率在本研究群体中的流行病学和临床意义解释。尽管如此，本次调查观察到的流行率表明猫对利什曼原虫的暴露不容忽视。在包括葡萄牙在内的流行地区工作的兽医在评估出现相容临床表现的猫时，应意识到这种感染。
5. 结论
本研究提供了葡萄牙家猫利什曼原虫血清阳性率最全面的全国性估计，揭示了8.9%的总体流行率，其显著的地理变异反映了已知的犬类和人类热点区。从临床角度看，这些发现强调了提高流行地区兽医认识的重要性，需认识到猫的血清阳性主要反映的是暴露，应在流行病学和临床背景下进行解读。首次获得的亚速尔群岛猫暴露血清学证据也提出了传播可能正在该群岛内发生的可能性。这些发现强调了猫的流行病学相关性，并支持将其纳入协调的监测工作。此外，在特定地区检测到的较高暴露率强化了在已知犬类和人类利什曼病的地区，监测和管理流浪猫和自由活动猫群的重要性，以此作为综合控制策略的一部分。推进“一体健康”方法将需要在动物、人类和媒介种群之间进行综合监测，加强诊断能力，并进行有针对性的昆虫学调查，以更好地描绘传播途径并指导循证的临床和媒介控制干预措施。
