《Parasitology Research》:A preliminary survey of feline filarial parasites in Kerala State, India
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本研究针对猫科动物丝虫感染长期缺乏关注的问题,在印度喀拉拉邦对家猫进行了丝虫病调查。研究人员采用显微镜检查和分子技术,检测了300只家猫的外周血微丝蚴,发现4例(1.33%)阳性。PCR结合测序证实,检出的有鞘微丝蚴为布鲁格丝虫(Brugia malayi),无鞘微丝蚴为匍匐恶丝虫(Dirofilaria repens)。结果表明,猫可作为这些人兽共患丝虫的自然宿主,这强调了在流行区加强对猫科宿主监测的重要性,并对完善丝虫病流行病学认知和制定控制策略具有参考价值。
当我们谈论丝虫病,脑海中浮现的往往是影响人类健康的淋巴丝虫病,或是宠物犬常见的心丝虫病。然而,在丝虫复杂的生活史和传播网络中,猫科动物——这种与我们关系密切的宠物——究竟扮演着什么样的角色?是沉默的“无辜者”,还是潜在的“蓄水池”?在印度这样一个丝虫病流行地区,犬和人的丝虫感染已得到广泛研究,但家猫的情况却如同一片被遗忘的拼图,其感染状况、病原种类及潜在的公共卫生意义长期处于模糊地带。这正是发表在《Parasitology Research》上题为“A preliminary survey of feline filarial parasites in Kerala State, India”的研究试图探索的问题。这项研究不仅旨在填补印度猫丝虫感染数据的空白,更希望评估猫作为人兽共患丝虫潜在宿主的可能性,为更全面的疾病防控策略提供科学依据。
为了回答上述问题,研究团队在2023年9月至2024年2月间,在印度喀拉拉邦芒努提的大学兽医医院,对300只因各种原因前来就诊的宠物猫进行了调查。他们采用了循序渐进的检测策略。首先,利用湿血片镜检作为初步筛查手段,在显微镜下直接寻找外周血中活动的微丝蚴。对于镜检阳性的样本,研究人员进一步制备厚血涂片,通过染色在显微镜下根据微丝蚴的形态(如有无鞘膜)进行初步的虫种判断。随后,他们采用分子生物学技术进行精确鉴定。从阳性猫的静脉血中提取基因组DNA,使用可区分多种丝虫的“广谱”引物(DIDR-F1/R1)对5.8S–ITS2–28S核糖体DNA区域进行PCR扩增,通过扩增产物的特定大小来鉴别虫种,如Brugia malayi(615 bp)和Dirofilaria repens(484 bp)。最后,对PCR产物进行测序,并将获得的基因序列与NCBI数据库中的已知序列进行比对,通过系统发育(进化树)分析,明确本地分离株与来自印度、泰国等其他地区的丝虫分离株之间的遗传关系。
结果
家猫微丝蚴的流行率与鉴定
在筛查的300只家猫中,共有4只(1.33%)外周血湿片镜检呈阳性。其中3只(0.99%)携带形态上属于布鲁格属的有鞘微丝蚴,1只(0.33%)携带形态上属于恶丝虫属的无鞘微丝蚴。所有4只感染猫均为雄性,且均未表现出与丝虫病相关的临床症状。PCR分析证实,有鞘微丝蚴为布鲁格丝虫,无鞘微丝蚴为匍匐恶丝虫。在本次研究中未检测到两种虫的混合感染。
序列分析与系统发育关系
对获得的基因序列进行比对和系统发育分析显示,本研究中获得的布鲁格丝虫分离株与之前从泰国猫体内报告的分离株在遗传上关系密切,提示可能存在区域性的遗传关联。而匍匐恶丝虫分离株则与印度喀拉拉邦其他地区的分离株具有高度的序列相似性,表明当地菌株存在遗传连续性。系统发育树清晰地将布鲁格丝虫、派亨丝虫和匍匐恶丝虫、犬恶丝虫等不同虫种置于不同的分支,支持了基于PCR产物大小和序列进行物种鉴定的可靠性。
结论与讨论
这项研究首次在印度通过分子手段确认了家猫感染布鲁格丝虫和匍匐恶丝虫,尽管总体感染率较低(1.33%)。这一发现具有多重意义。首先,它填补了印度猫丝虫感染数据的空白,证实了在犬和人丝虫病流行的喀拉拉邦,家猫也同样是这些人兽共患丝虫的自然宿主。其次,研究强调了猫作为丝虫宿主的特殊性。猫被认为是丝虫的“不完美宿主”,常常表现为隐性感染(寄生虫存在但血中查不到微丝蚴)、微丝蚴血症水平低或呈一过性,这给基于显微镜的传统诊断带来了巨大挑战,可能导致感染被低估。本研究结合镜检和分子技术的方法,为准确诊断猫丝虫病提供了范例。
尽管感染猫在本次研究中没有表现出临床症状,但检测到的人兽共患虫种(布鲁格丝虫和匍匐恶丝虫)引发了对其潜在流行病学意义的思考。猫在丝虫传播循环中究竟扮演“终点宿主”还是“蓄水池宿主”的角色,目前尚不确定。然而,在其他地区(如马来西亚)的研究曾发现,猫、人和媒介蚊子体内分离的派亨丝虫具有完全相同的基因序列,强烈提示猫可能成为人兽共患丝虫病的源头。因此,在流行区完全忽视猫的潜在贡献可能是不明智的。
本研究的局限性包括样本来源于单一兽医医院,可能存在选择偏差;使用湿血片镜检作为初筛方法灵敏度有限,可能低估了真实感染率;并且未对传播媒介进行调查。尽管如此,它的核心价值在于敲响了警钟:在制定丝虫病,特别是人兽共患丝虫病的监测与控制策略时,我们的视野需要从传统关注的人和犬,适度扩展到包括猫在内的其他伴生动物。未来的研究需要基于社区的更大规模抽样、采用更灵敏的分子筛查工具,并整合媒介生态学调查,才能更清晰地描绘出丝虫在“人-犬-猫-蚊”这个复杂生态系统中的完整传播图谱,从而为实现更有效的“一体化健康”防控目标奠定基础。