《Nature Communications》：A mouse-adapted Yezo virus model for antiviral testing in immunocompetent mice
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本文针对新兴蜱传内罗病毒（orthonairovirus）缺乏模拟人类疾病的免疫健全动物模型的难题，研究团队成功构建了小鼠适应型Yezo病毒株（MA-YEZV），该毒株能在C57BL/6J小鼠中引起致死性感染，并重现血小板减少、白细胞减少及严重肝损伤等关键临床特征。通过利巴韦林治疗验证了模型的抗病毒评价价值。该模型为研究YEZV发病机制和开发抗病毒药物提供了关键工具。
在全球气候变化和生态环境演变的背景下，新发传染病（emerging infectious diseases）不断涌现，对公共卫生构成严峻挑战。其中，由蜱虫（tick）传播的病毒尤为引人关注，它们常常引发严重的发热性疾病，诊断困难且缺乏有效的特异性疗法。Yezo病毒（YEZV）是近年来在日本和东亚地区发现的、经蜱传内罗病毒科（Orthonairovirus）的新成员，已报告的人类感染者表现出血小板减少、白细胞减少和肝功能损伤等症状。然而，深入理解其致病机理、并筛选有效抗病毒药物的一个核心瓶颈在于：缺乏能够完全模拟人类疾病特征的动物模型。现有研究多依赖于免疫缺陷小鼠，这限制了我们对病毒与宿主免疫系统相互作用的理解。因此，开发一种能在免疫系统健全的动物中引发类似人类疾病的YEZV模型，成为了该研究领域亟待解决的关键问题。
为了应对这一挑战，研究人员展开了一项旨在构建和验证小鼠适应型Yezo病毒（mouse-adapted Yezo virus, MA-YEZV）模型的研究。他们的核心目标是获得一个能够在标准实验小鼠（C57BL/6J）中稳定引起严重疾病乃至死亡的病毒株，并用此模型评估现有抗病毒药物的疗效，最终为未来机理研究和药物开发铺平道路。这项研究最终在《Nature Communications》杂志上发表。
在研究过程中，作者主要运用了以下几个关键技术方法：首先，通过在小鼠体内连续传代（serial passaging）对野生型YEZV进行适应性进化，以获得高致病性的MA-YEZV毒株。其次，利用深度测序技术对传代过程中的病毒基因组进行监测，以识别与致病性增强相关的关键突变。再者，通过体内实验系统评估病毒感染后的各项指标，包括生存率分析、病毒载量测定（通过定量逆转录聚合酶链反应，qRT-PCR）、血液学参数（血小板、白细胞计数）检测以及组织病理学分析。此外，还通过流式细胞术和酶联免疫吸附试验（ELISA）等方法分析了感染后宿主的免疫与炎症反应。本研究所用病毒及动物模型均基于实验室标准流程建立。
研究结果
MA-YEZV在免疫健全小鼠中引起致死性疾病
研究人员将野生型YEZV在C57BL/6J小鼠体内连续传代，最终获得了致病性显著增强的MA-YEZV毒株。与原始毒株相比，MA-YEZV感染可导致小鼠100%死亡，并成功再现了人类感染者的关键临床特征，包括显著的血小板减少症（thrombocytopenia）、白细胞减少症（leukopenia）以及以转氨酶升高为标志的严重肝损伤。
病毒适应性进化伴随多位点突变
通过对传代病毒进行全基因组测序，研究发现MA-YEZV基因组中积累了31个非同义突变，这些突变分布在病毒的各个基因片段。这些遗传变化被认为是病毒增强其在小鼠体内复制能力和致病性的分子基础，为理解内罗病毒的宿主适应和毒力机制提供了线索。
MA-YEZV具有广泛的组织嗜性并引发强烈炎症反应
进一步的病毒分布检测显示，MA-YEZV在感染小鼠体内表现出广泛的组织嗜性（tissue tropism），其中肝脏的病毒载量最高，这与观察到的严重肝损伤相一致。同时，感染引发了剧烈的全身性炎症反应，表现为多种促炎细胞因子（如IFN-γ, TNF-α, IL-6）水平的显著升高以及炎症小体（inflammasome）的激活。
利巴韦林可有效治疗MA-YEZV感染
利用建立的致死性感染模型，研究人员评估了两种广谱抗病毒药物——利巴韦林（Ribavirin）和瑞德西韦（Remdesivir）的疗效。结果显示，利巴韦林治疗能有效抑制病毒复制，完全防止感染小鼠死亡，并显著减轻组织病理损伤。相比之下，瑞德西韦在该模型中未显示出任何保护效果。这一发现为应对潜在的YEZV感染提供了具体的药物治疗方向。
研究结论与意义
本研究成功构建并鉴定了一个基于免疫健全C57BL/6J小鼠的YEZV致死性感染模型。该模型不仅准确模拟了人类疾病的临床和病理特征，还揭示出病毒通过获得一系列基因突变实现宿主适应和毒力增强的进化路径。更重要的是，该模型被证明是评估抗病毒药物的有效平台，并明确指出了利巴韦林（而非瑞德西韦）是针对YEZV有潜力的治疗选择。
这项研究的成果具有双重重要意义。在应用层面，MA-YEZV小鼠模型填补了该研究领域的关键技术空白，为未来深入解析YEZV的致病机制、筛选和评价新型抗病毒药物及抗体疗法提供了一个可靠且易于操作的体内研究系统。在科学认知层面，研究鉴定出的与小鼠适应性相关的病毒突变，为理解内罗病毒科成员如何跨越物种屏障、调整组织嗜性以及增强毒力的分子基础提供了宝贵信息。总之，这项工作不仅为应对特定的新发病毒（YEZV）威胁提供了直接的工具和候选对策，其研究思路和模型平台也为更广泛的新发蜱传病毒的研究与防控提供了可借鉴的范式。
