桑树MnDREB6E的克隆及耐盐抗旱性分析

　　

摘要：

目的 解析桑树DREB转录因子家族成员MnDREB6E的生物学功能，阐明其在非生物胁迫响应中的作用机制，为木本植物抗逆分子育种提供基因资源。 方法 基于桑树盐胁迫转录组数据克隆MnDREB6E，通过生物信息学分析其序列特征及系统进化关系；利用酵母单杂交技术分析其顺式作用元件；构建过表达及抑制表达载体，采用农杆菌瞬时转化技术获得转基因植株，测定盐/干旱胁迫下生理生化指标及相关基因表达水平。 结果 MnDREB6E开放阅读框（ORF）全长1 173 bp，编码390个氨基酸，具有典型AP2/ERF结构域，归属DREB A6亚组；MnDREB6E亚细胞定位预测在细胞核，可特异性结合GCC-box/DRE顺式元件；盐/干旱胁迫下，过表达植株的超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、谷胱甘肽S-转移酶（GST）活性显著提高，抗坏血酸（AsA）、还原型谷胱甘肽（GSH）和脯氨酸含量增加，超氧阴离子（O₂^•-）、过氧化氢（H₂O₂）、羟自由基（•OH）水平降低，相对电导率和丙二醛含量下降，相关抗氧化酶基因表达显著上调。 结论 MnDREB6E通过协同调控抗氧化代谢与渗透保护通路，正向增强桑树对盐/干旱胁迫耐受性。