《Journal of Experimental Pharmacology》：Livogrit Ameliorates Thioacetamide-Induced Liver Fibrosis and Dyslipidemia in Rat Model by Regulating Oxidative Stress and Hepatic Collagen Levels, in a Non-Mutagenic Manner
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为应对慢性肝病导致的肝纤维化与血脂异常等临床难题，本研究评估了由Boerhavia diffusa、Phyllanthus niruri和Solanum nigrum组成的复方制剂Livogrit的疗效。结果表明，Livogrit可有效降低TAA诱导的肝损伤指标（AST、ALT、ALP）和血脂指标（TG、TC、LDL）升高，改善抗氧化酶（SOD、catalase）活性，减轻肝纤维化与胶原沉积，且Ames试验证实其无致突变性。这为肝纤维化和相关代谢紊乱提供了有前景的非致突变性植物疗法新选择。
肝脏，这个人体内最大的“化工厂”和“解毒中心”，一旦长期受损，便会启动自我修复的疤痕形成过程，即肝纤维化。如果放任不管，这些“疤痕”会逐渐连接、增厚，最终导致肝硬化甚至肝衰竭，严重威胁生命健康。目前，全球每年有近200万人死于慢性肝病，肝纤维化是其核心病理环节。尽管科学家们一直在探索各种治疗策略，但现有的药物，如干扰素、秋水仙碱等，效果不尽如人意，且常伴随副作用。更为棘手的是，许多肝病患者常常合并有血脂代谢异常（即血脂异常），这反过来又会“火上浇油”，加剧肝脏的损伤和纤维化进程。因此，寻找一种能够同时改善肝纤维化和血脂异常，且安全有效的新型疗法，成为当前医学研究的重要方向。
传统草药凭借其多成分、多靶点的特性，在肝病治疗领域展现出独特潜力。阿育吠陀医学中用于治疗肝病的复方制剂Livogrit，由三种传统草药——Boerhavia diffusa、Phyllanthus niruri和Solanum nigrum——组成。此前的研究已提示其具有保肝作用，但其在更贴近临床的肝纤维化合并血脂异常模型中的具体疗效和安全性，特别是遗传毒性风险，尚需系统评估。为此，研究人员在《Journal of Experimental Pharmacology》上发表了一项研究，系统探讨了Livogrit对硫代乙酰胺（TAA）诱导的大鼠肝纤维化及血脂异常模型的治疗作用及其潜在致突变风险。
本研究采用了几项关键技术方法：首先，利用超高效液相色谱-二极管阵列检测器（UHPLC-DAD）对Livogrit中的植物化学成分（如没食子酸、鞣花酸、芦丁等）进行了定量分析。其次，建立了成熟的TAA诱导Sprague-Dawley雄性大鼠肝纤维化模型，该模型能模拟人类肝纤维化的关键特征，包括肝损伤、胶原沉积和血脂异常。通过此模型，研究人员系统评估了Livogrit对动物体重、相对肝重、血清肝酶（ALT、AST、ALP）、血脂谱（TG、TC、HDL、LDL）、抗氧化酶（SOD、catalase）、硝基应激标志物（亚硝酸盐）以及肝内胶原标志物（羟脯氨酸和总胶原）的影响。再者，运用组织病理学技术，对肝组织切片进行苏木精-伊红（H&E）和马松三色（MT）染色，以半定量评分的方式直观评估肝纤维化程度。最后，遵循经济合作与发展组织（OECD）指南，采用经典的细菌回复突变试验（Ames试验），在有无代谢活化（±S9）的条件下，使用五种测试菌株（包括鼠伤寒沙门菌TA98、TA100、TA1535、TA1537和大肠杆菌WP2 uvrA）评估了Livogrit的潜在致突变性。研究中以水飞蓟素（Silymarin）作为疗效的阳性对照药。
代谢物分析：UHPLC-DAD分析显示，Livogrit中含有丰富的生物活性代谢物，包括没食子酸、甲基没食子酸、儿茶素、柯里拉京、鞣花酸、芦丁、咖啡酸、肉桂酸、槲皮素和波尔avinone B等。这些成分是Livogrit发挥药理作用的物质基础。
Livogrit改善TAA给药大鼠的体重增加并降低相对肝重：TAA诱导导致大鼠体重增长显著减缓，相对肝重（肝重占体重的百分比）显著增加。Livogrit治疗（特别是207 mg/kg剂量）能显著改善体重增长，并降低异常升高的相对肝重，表明其减轻了TAA引起的全身性毒性及肝脏病理性肿大。
Livogrit减轻TAA诱发肝损伤标志物的升高：TAA导致血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）和碱性磷酸酶（ALP）活性显著持续升高。Livogrit在两个测试剂量下均能显著降低这些肝损伤标志物的水平，其效果与水飞蓟素相当，表明Livogrit具有明确的肝保护作用。
Livogrit调节TAA诱导的血脂异常：TAA诱导的大鼠出现典型血脂异常：甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）显著升高，而高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）显著降低，LDL/HDL和TC/HDL比值也异常升高。Livogrit治疗能有效逆转这些变化，显著降低TG、TC、LDL-C水平，提升HDL-C水平，并改善有害的血脂比值，显示出良好的调脂作用。
Livogrit提高TAA诱导大鼠血清中的SOD和过氧化氢酶活性，降低肝脏中亚硝酸盐、羟脯氨酸水平和胶原含量：TAA导致肝脏抗氧化防御系统受损，表现为超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（catalase）活性下降，同时肝脏亚硝酸盐（反映硝基应激）、羟脯氨酸（胶原特征氨基酸）和总胶原含量显著升高。Livogrit（特别是207 mg/kg剂量）治疗能显著恢复SOD和过氧化氢酶活性，降低亚硝酸盐、羟脯氨酸和胶原水平。这表明Livogrit通过增强抗氧化防御、减轻氧化/硝基应激，从而抑制了肝内胶原的过度沉积。
Livogrit减轻TAA诱导的肝纤维化：组织病理学检查提供了直观证据。H&E和MT染色显示，TAA组肝脏出现中度多灶性纤维化，胶原纤维在中央静脉周围大量沉积。Livogrit治疗（尤其是207 mg/kg）能显著减轻纤维化病变，降低纤维化评分和总病变评分，使肝组织学结构得到明显改善。
细菌致突变性试验表明Livogrit无基因毒性作用：Ames试验结果显示，在测试的最高浓度（5.0 mg/平板）下，无论是否存在代谢活化（S9），Livogrit在所有五种测试菌株中均未引起回复突变菌落数的显著增加（致突变性比值均小于2）。这证实了Livogrit在实验条件下无致突变性，为其安全性提供了重要数据支持。
本研究的结论与讨论部分强调，肝纤维化是一个涉及肝损伤、氧化应激、炎症和细胞外基质过度沉积的复杂过程。当前许多抗纤维化药物因靶点单一或副作用大而在临床应用受限。Livogrit作为一种多草药复方制剂，其优势可能在于通过多种活性成分协同作用，同时针对肝纤维化的多个环节：减轻肝细胞损伤、改善血脂代谢、增强抗氧化能力、减少胶原生成。本研究表明，Livogrit在TAA诱导的大鼠肝纤维化模型中，不仅能有效改善肝功能和血脂指标，还能从组织病理学上减轻纤维化程度，且关键的遗传毒性测试结果为阴性。这为其作为治疗肝纤维化和相关血脂异常的潜在植物药提供了坚实的临床前证据。研究所鉴定的多种酚酸和黄酮类成分（如没食子酸、鞣花酸、芦丁、槲皮素等）已知具有抗氧化、抗炎和保肝活性，可能是Livogrit发挥疗效的化学基础。综上，这项研究不仅验证了Livogrit的抗纤维化和调脂功效，还初步评估了其遗传毒性安全性，为未来进一步的临床前安全评价和针对肝纤维化患者的临床试验奠定了基础，为慢性肝病的治疗提供了一种有前景的、源自传统医学的多靶点、非致突变性候选疗法。
