通过Rhodotorula glutinis菌将短轮伐期杨树(Salix schwerinii)产生的半纤维素水解物转化为脂质和类胡萝卜素

《Biomass and Bioenergy》:Valorizing hemicellulosic hydrolysates from short rotation Salix schwerinii by Rhodotorula glutinis to lipids and carotenoids

【字体: 时间:2026年03月20日 来源:Biomass and Bioenergy 5.8

编辑推荐:

  本研究利用柳树(Salix schwerinii)制浆副产物水解液(HH)培养红酵母(Rhodotorula glutinis),探究预处理方法、营养补充、温度及pH对酵母生长及脂质、类胡萝卜素(尤其是torularhodin)产率的影响。摇瓶实验表明,添加1 g/L尿素和10 g/L甘油,30℃及pH 7.0条件下酵母浓度达5.58 g/L,脂质含量7.7%,类胡萝卜素5.54 mg/g DCW。生物反应器实验显示,600 rpm高搅拌速率通过提高传质系数kLa(79%产能提升),使torularhodin产量显著增加。该研究为柳树废料高附加值利用提供了新途径。

  
阿卜杜拉·阿亚兹(Abdullah Ayaz)| 萨里塔·凯斯基-萨里(Sarita Keski-Saari)| 苏维·库伊蒂宁(Suvi Kuittinen)| 阿里·帕皮宁(Ari Pappinen)| 马尔库·凯纳宁(Markku Kein?nen)| 塞尔皮尔·塔卡奇(Serpil Taka?)
安卡拉大学生物技术研究所,06100,安卡拉,土耳其

摘要

木质纤维素生物质生物精炼技术持续需要寻找可持续和创新的利用方法来处理加工过程中的副产品。本研究探讨了利用Rhodotorula glutinis酵母从Salix schwerinii的半纤维素水解物(HH)中同时生产脂质和类胡萝卜素的过程。在摇瓶实验中,研究了预处理方法、补充营养物质、培养温度和初始pH值对细胞生长以及总脂质和类胡萝卜素浓度的影响。在批次生物反应器中,以搅拌速率(150、300和600 rpm)作为氧气传递效率的代表性参数进行了测试。在整个发酵过程中测量了培养基的pH值、酵母细胞生长情况、还原糖的浓度以及HH的成分,并确定了最终的总脂质、类胡萝卜素及其组分的含量。摇瓶实验表明,1 g/L尿素和10 g/L甘油作为HH的补充营养物质,以及30°C和pH=7.0的条件适合用于生物反应器研究。在200°C下水热液化反应器中制备的HH经过脱毒处理后,被发现是最优的底物。产量的最高类胡萝卜素是torularhodin。在600 rpm的搅拌速率下,获得了最高的酵母细胞浓度(5.58 g/L)、总脂质含量(7.7%)和总类胡萝卜素含量(5.54 mg类胡萝卜素/g干重)。体积质量传递系数kLa表明,高搅拌速率提高了质量传递效率,从而使torularhodin的产量增加了约79%。该研究展示了利用快速生长的柳树副产品通过酵母发酵生产稀有类胡萝卜素的可行性。

引言

综合生物精炼厂旨在从原料中制造多种产品,从而为循环经济铺平道路[1]。生物质可转化为高级生物燃料、化学品、聚合物、药品等多种高价值物质[2]。在更高效地利用木质纤维素生物质的过程中,半纤维素和木质素的深度开发也备受关注。例如,在纸浆和造纸生产中,可以从副产品中分离出半纤维素。如果经济可行,木质纤维素的分馏可能有助于提高最终生物材料(如生物炭)的质量[3]。例如,提取半纤维素可以改善生物炭的吸附性能[4]。
柳树(Salix属)具有再生能力,在不同气候条件下通过适当施肥能在短时间内产生大量生物质。作为先锋物种,柳树能够在降雨量高和易发生洪水的地区良好生长[5]。过去20年来,许多具有高生长潜力的柳树杂交品种已被商业化种植用于生物能源应用[6]。目前尚无专门利用柳树生物质生产多种产品的商业生物精炼厂,但柳树作为生物能源作物已被广泛使用[7]。虽然有关柳树生物炭的应用报道较多[8],然而据我们所知,尚无关于在生物反应器中利用柳树半纤维素生产类胡萝卜素的研究。
类胡萝卜素是一类由光合生物以及某些非光合细菌和真菌合成的异戊二烯类色素。它们是高效的抗氧化剂,具有多种健康益处[9],能够降低癌症、心血管疾病、黄斑变性和白内障等退行性疾病的风险[10]。由于这些特性,类胡萝卜素在化工、制药、食品和化妆品行业得到广泛应用[10]。预计到2027年,全球类胡萝卜素市场的规模将从2022年的20亿美元增长到27亿美元,复合年增长率为5.7%[11]。在植物、藻类和细菌合成的数百种类胡萝卜素中,只有少数几种被工业化生产,包括β-胡萝卜素、番茄红素、虾青素、角黄素、叶黄素和玉米黄质[10,12]。
油酵母Rhodotorula glutinis以其产生类胡萝卜素的能力而闻名。Rhodotorula属酵母能够产生超过其干重70%的脂质[13]。由于类胡萝卜素是脂溶性色素,其微生物合成通常与脂质一起进行研究。R. glutinis合成的类胡萝卜素包括β-胡萝卜素、torulene和torularhodin,其比例受培养条件影响[14]。大多数关于R. glutinis类胡萝卜素的研究都显示β-胡萝卜素占主导地位,仅有少数研究指出torularhodin的含量较高[15,16]。Torulene和torularhodin属于酵母和真菌合成的类胡萝卜素,但由于生物合成效率较低,目前尚未实现商业化[9]。然而,多项研究表明torularhodin和torulene的抗氧化效果优于β-胡萝卜素[9,10,17]。因此,开发一种成本低廉且产量高的torularhodin生物生产过程具有广泛的应用前景。R. glutinis可以从多种生物质废弃物(如糖蜜、精馏葡萄汁、枇杷核提取物、甘薯提取物[14]、工业啤酒厂废水[18]、乳清[19,20]、马铃薯提取物[19]、甘蔗糖蜜[22]和橄榄榨汁厂废水[23])中生产类胡萝卜素。最近还提出了新的Rhodotorula类胡萝卜素提取方法[24],[25],[26]。
在许多木质纤维素生物质生物精炼过程中,会生成半纤维素水解物(HH),然后进一步提纯以生产生物化学品或生物产品。也有报道利用级联生物精炼技术处理木质纤维素残渣,例如利用微波辅助催化法分离半纤维素和纤维素以获得木糖和左旋糖酸,随后通过热化学方法将木质素活化制备活性炭[27]。HH富含糖分,但其组成取决于木质纤维素的来源和预处理条件。在柳树等硬木物种的半纤维素水解物中,木糖和葡萄糖是主要单糖。然而,水解物中还含有羟甲基糠醛(HMF)等呋喃化合物,这些化合物可能抑制微生物生长和生物转化[28]。在微生物精炼之前,明确这些水解物的可用性及是否需要脱毒处理非常重要。
关于Rhodotorula属酵母利用不同来源和化学组成的木质纤维素生物质水解物生产类胡萝卜素的研究较少:包括绿豆废弃物面粉与甘薯提取物的水解物[29];经过脱毒和未脱毒处理的枇杷核水解物[30];稻壳水解物[31];酶法水解并经过碱预处理的甘蔗渣与糖蜜混合的水解物[32]、小麦麸皮水解物[26]和小麦秸秆水解物[33]。所有这些研究均表明,酵母中的脂质和类胡萝卜素积累量取决于水解物的类型,但营养补充物和培养条件也起着重要作用。
本研究的首要目标是探讨R. glutinis利用Salix schwerinii的半纤维素水解物生产脂质和类胡萝卜素的情况,并在生物反应器系统中优化条件以提高torularhodin的产量。

实验部分

Salix schwerinii材料及半纤维素水解物的制备

来自芬兰北卡累利阿地区的Salix schwerinii植株(坐标62.5155°N, 29.36148°E)被采集后,去皮并切成薄片运送到实验室。材料首先在40°C下干燥,然后被切成更小的颗粒(<2 mm)。比较了四种不同的预处理方法,这些方法之前已用于同一生物质通过Clostridium acetobutylicum进行丙酮-丁醇-乙醇发酵[28]:HH1(在钢筒中……)

影响Rhodotorula glutinis在摇瓶中生长的因素

生物反应器实验所使用的培养基配方基于HH1的摇瓶实验结果。在添加1 g/L尿素的情况下,细胞生长略快(图1a)。尿素已被证明是R. glutinis生长的适宜氮源[47]。尽管有研究表明油酵母在缺乏氮源的培养基中会积累更多脂质,但后续实验仍在含尿素的环境中进行

结论

评估木质纤维素生物质以生产高价值分子对于实现可持续的生物化学品生产和循环经济至关重要。本研究报道了利用Salix schwerinii半纤维素水解物生产微生物类胡萝卜素的情况。由于水解物中的糖分较低且氮含量不足,发现补充碳和氮对于R. glutinis的生长是必要的。

CRediT作者贡献声明

阿卜杜拉·阿亚兹(Abdullah Ayaz):撰写初稿、方法设计、实验实施、资金获取、数据分析。萨里塔·凯斯基-萨里(Sarita Keski-Saari):撰写与编辑、监督、方法设计、概念构建。苏维·库伊蒂宁(Suvi Kuittinen):撰写与编辑、监督、方法设计、概念构建。阿里·帕皮宁(Ari Pappinen):撰写与编辑、监督、方法设计、资金获取、概念构建。马尔库·凯纳宁(Markku Kein?nen):撰写与编辑、监督、方法设计。塞尔皮尔·塔卡奇(Serpil Taka?):

利益冲突

所有作者声明不存在利益冲突。

致谢

阿卜杜拉·阿亚兹(A. Ayaz)获得了欧盟Erasmus+计划的奖学金,并在东芬兰大学科学与技术学院森林科学系进行本研究。我们衷心感谢芬兰研究委员会对项目“来自森林资源的高价值产品:通往生物炭和生物色素的级联途径(项目编号RCF 373431)的资助。
相关新闻
生物通微信公众号
微信
新浪微博
  • 搜索
  • 国际
  • 国内
  • 人物
  • 产业
  • 热点
  • 科普

热点排行

    今日动态 | 人才市场 | 新技术专栏 | 中国科学人 | 云展台 | BioHot | 云讲堂直播 | 会展中心 | 特价专栏 | 技术快讯 | 免费试用

    版权所有 生物通

    Copyright© eBiotrade.com, All Rights Reserved

    联系信箱:

    粤ICP备09063491号