高容量培养方法提高了从痰液中检测曲霉菌属物种的诊断效率

《MYCOSES》：High-Volume Culture Improves Diagnostic Yield of Aspergillus Species From Sputum

高容量37°C培养法显著提升痰液真菌检测率，尤其对曲霉属和氟康唑耐药性隐球菌检出率提升25.5%，两方法联合检测总阳性率达54.0%。

　　

摘要

研究目的

由于痰液的非侵入性特征和诊断价值，它通常是用于检测疑似呼吸道真菌感染的常用样本。然而，传统的29°C培养（CC29）方法往往无法检测到丝状霉菌。为了提高检测效率，我们采用了37°C的高容量培养（HVC37）方法，并将其诊断效果与CC29进行了比较，特别关注了曲霉菌属菌株和耐唑类药物的菌株。

研究方法

2022年10月至2025年6月期间，共收集了793名患者的1546份痰液样本，其中219份来自67名慢性肺曲霉菌病（CPA）患者。这些样本同时使用HVC37（接种量0.5–1 mL）和CC29（接种量1–10 μL）在Sabouraud琼脂上培养7天。霉菌和曲霉菌属菌株的阳性率计算均附带95%的置信区间。抗真菌敏感性测试遵循EUCAST标准进行。

研究结果

37°C高容量培养（HVC37）在检测霉菌和曲霉菌属菌株方面明显优于CC29。在所有痰液样本中，HVC37的霉菌阳性率为41.6%（95%置信区间39.2%–44.1%），而CC29为27.7%（95%置信区间25.5%–30.0%）。在曲霉菌的检测方面，HVC37的阳性率显著提高，分别为37.0%（95%置信区间34.7%–39.5%），而CC29为11.5%（95%置信区间10.0%–13.2%），绝对提高了25.5%。两种方法结合使用时，霉菌（54.0%）和曲霉菌属菌株（42.1%）的总体检出率最高。在CPA患者中，HVC37在53.0%的样本中检测到霉菌，在45.2%的样本中检测到曲霉菌属菌株，而CC29分别为30.6%和15.5%。值得注意的是，在46株耐唑类药物的烟曲霉菌分离株中，HVC37检测出了42株（91.3%），而CC29仅检测出20株（43.5%）。CC29主要检测到环境中的霉菌（如青霉菌属菌株），而这些菌株未被HVC37检出。

结论

37°C高容量培养显著提高了痰液中丝状霉菌的检测率，尤其是曲霉菌属菌株和临床相关的耐唑类药物烟曲霉菌。将HVC37纳入常规真菌学检测流程可以显著提升真菌诊断的准确性和抗真菌药物耐药性的监测能力。

利益冲突

P.E.V.获得了Gilead Sciences、Pfizer和Mundipharma的研究资助。R.J.B.获得了ElionTx、F2G、Gilead Sciences、Mundipharma和Pfizer的资助，以及来自Basilea和Astellas的专家咨询费用。所有费用均支付给了相关机构，与本研究工作无关。

数据可用性声明

支持本研究结果的数据可向通讯作者索取。