《Diagnostic Microbiology and Infectious Disease》:A combined rapid phenotypic strategy for the identification of
Candida albicans: performance evaluation against PCR
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准确鉴定白色念珠菌(Candida albicans)对临床意义重大,因其与近缘种Candida dubliniensis易混淆且影响治疗决策。本研究通过180例临床分离株,评估Bichro-latex albicans与Bichro-Dubli联合检测的准确性,以PCR为参考标准。结果显示联合检测的灵敏度与特异性均超过90%,总体准确性达94%以上,但存在假阴性(PCR确认的C. albicans)和假阳性(非白念珠菌种)现象,揭示抗原检测法的局限性。该方法为常规实验室提供了快速、可靠且经济的C. albicans鉴定方案。
Brahim Jabri|Slimane Faouzi|Abdellah Bouzit|Hassan Chtibi|Sihame Assimi|Maryem Iken
研究实验室:护理与健康技术高等学院,拉巴特,摩洛哥(专注于护理、健康与环境领域的研究)
摘要
准确识别白色念珠菌(Candida albicans)在临床真菌学中至关重要,因为该菌在人类感染中极为常见,并且其表型与都柏林念珠菌(Candida dubliniensis)极为相似。这两种菌的误鉴可能导致不恰当的治疗和不准确的流行病学数据。快速表型检测方法在常规实验室中被广泛使用,但其诊断性能需要仔细评估。本研究评估了结合使用Bichro-latex albicans和Bichro-Dubli测试的快速表型方法在识别白色念珠菌方面的诊断准确性。共分析了180株从口腔样本中分离出的白色念珠菌菌株,其中包括白色念珠菌和非白色念珠菌菌株。所有菌株均在标准条件下培养,并按照制造商的说明进行了Bichro-latex albicans和Bichro-Dubli检测。聚合酶链反应(PCR)分子鉴定作为参考方法。根据制造商的诊断算法,如果Bichro-latex albicans检测结果为阳性而Bichro-Dubli检测结果为阴性,则将该菌株鉴定为白色念珠菌。这种综合判断方法显示出较高的诊断性能,灵敏度和特异性均超过90%,总体准确率超过94%。观察到的不一致结果较少,包括PCR确认为白色念珠菌的菌株出现假阴性反应,以及非白色念珠菌菌株偶尔出现假阳性反应,这反映了基于抗原的表型检测方法的局限性。结果表明,结合使用Bichro-latex albicans和Bichro-Dubli方法为常规临床真菌学实验室提供了一种快速、可靠且经济高效的白色念珠菌鉴定方法。
引言
念珠菌属(Candida)的菌种是共生酵母,定植于人体皮肤和黏膜表面,包括口腔、胃肠道和泌尿生殖道。在生理条件下,这些微生物与宿主无害共存;然而,宿主免疫力的改变、微生物群平衡的破坏或环境条件的变化可能促使它们从共生微生物转变为机会性病原体[1,2]。近几十年来,念珠菌感染已成为一个主要的临床问题,尤其是在免疫功能低下患者、重症患者以及长期接受抗生素或抗真菌治疗的患者中[3,4]。
在属于念珠菌属的200多种菌种中,只有少数几种与人类疾病密切相关。白色念珠菌(Candida albicans)仍然是浅表性和侵袭性念珠菌病中最常分离出的菌种,其次是光滑念珠菌(Candida glabrata)、热带念珠菌(Candida tropicalis)、副念珠菌(Candida parapsilosis)和克鲁斯念珠菌(Candida krusei)[5,6]。尽管非白色念珠菌菌种的发病率不断增加,但由于白色念珠菌具有显著的毒力特性(如形态转变能力、生物膜形成以及黏附素和水解酶的表达[7,8],它仍然在临床感染中占据主导地位。
在物种水平上准确快速地识别白色念珠菌对于优化患者管理、流行病学监测和合理使用抗真菌药物至关重要。这一要求尤为重要,因为白色念珠菌与都柏林念珠菌(C. dubliniensis)在表型和基因上非常相似。这两种菌具有多种形态和生化特征上的共性,包括芽管形成和相似的菌落形态,这经常导致常规实验室中的诊断混淆[9,10]。这两种菌的误鉴可能导致不适当的治疗决策和不准确的流行病学数据,尤其是在缺乏先进诊断工具的场合[11]。
基于形态学、碳水化合物吸收或酶活性的传统鉴定方法在临床真菌学实验室中仍被广泛使用。然而,这些方法通常耗时较长,且对于亲缘关系密切的菌种可能缺乏足够的区分能力。在侵袭性或系统性念珠菌感染的背景下,基于培养的方法也可能存在灵敏度有限的问题,因此需要开发补充性的诊断方法,包括抗原检测和分子技术[12]。聚合酶链反应(PCR)和测序等分子方法具有高灵敏度和特异性,但需要专门的设备、技术专长和较高的成本,这可能限制了其在资源有限环境中的常规应用[4]。
先进的技术(如基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱法)显著提高了微生物鉴定的速度和准确性,缩短了常规诊断的周转时间;然而,由于高昂的成本、组织限制以及诊断性能对分析前阶段质量的强烈依赖性,这些技术的广泛应用仍受到限制,特别是在低收入和中等收入国家[13,14]。
在这种情况下,如Bichro-latex albicans和Bichro-Dubli这样的快速免疫学检测方法为菌种鉴定提供了实用的一线选择,能够快速简便地区分白色念珠菌和都柏林念珠菌,尽管它们的单独使用可能受到抗原变异性和交叉反应的影响[[15], [16], [17], [18], [19]]。
因此,本研究评估了结合使用Bichro-latex albicans和Bichro-Dubli方法在识别白色念珠菌方面的诊断性能,以PCR作为参考方法,旨在评估诊断准确性并分析常规临床真菌学实验室中的不一致结果。
研究设计
本研究是一项观察性、基于实验室的诊断准确性研究,旨在评估结合使用聚合酶链反应(PCR)作为参考方法的快速表型鉴定策略在识别白色念珠菌方面的性能。
研究使用了保存在摩洛哥拉巴特穆罕默德五世大学牙医学院口腔生物学与生物技术研究实验室的临床分离株。
念珠菌菌株鉴定测试结果
本研究共纳入了180株临床念珠菌菌株。作为参考方法的聚合酶链反应(PCR)正确识别了所有用作质量控制的参考菌株。在这些菌株中,只有白色念珠菌ATCC 90028表现出制造商推荐的诊断特征:Bichro-latex albicans检测结果为阳性,而Bichro-Dubli检测结果为阴性。
讨论
准确识别白色念珠菌在临床真菌学中仍是一个重大挑战,这主要是由于它与都柏林念珠菌在表型和基因上的高度相似性。这两种菌的误鉴可能导致不适当的抗真菌治疗、临床决策延迟以及有偏的流行病学数据,尤其是在缺乏分子诊断工具的常规实验室环境中。
结论
准确识别白色念珠菌在临床真菌学中仍然是一个关键问题,尤其是因为它与都柏林念珠菌在表型上的密切关系以及常规诊断实验室的实际限制。在本研究中,我们评估了结合使用Bichro-latex albicans和Bichro-Dubli测试的快速表型策略的诊断性能,以PCR作为参考方法。
我们的研究结果表明,这种综合判断方法
资金支持
作者声明本研究未获得任何公共、商业或非营利机构的特定资助。
作者贡献
概念提出: Brahim Jabri和Faouzi Slimane
方法学: Brahim Jabri, Abdellah Bouzit和Hassan Chtibi
验证: Assimi Sihame和Iken Maryem
数据分析: Abdellah Bouzit和Hassan Chtibi
调查: Brahim Jabri和Faouzi Slimane
资源获取: Faouzi Slimane和Assimi Sihame
数据整理: Iken Maryem
初稿撰写: Brahim Jabri
审稿与编辑: 所有作者
指导: Brahim Jabri和Iken Maryem
所有作者均已阅读并批准了最终版本
数据获取
本研究生成和/或分析的数据集可应要求向相应作者索取。伦理标准遵守情况
本研究使用了在常规诊断过程中获得的匿名临床念珠菌分离株。未收集任何可识别患者身份的临床或人口统计数据。根据仅基于匿名微生物样本的研究的国家法规和机构政策,无需伦理委员会批准和知情同意。生成式AI的使用
作者声明在撰写本手稿过程中未使用任何生成式人工智能或AI辅助工具。CRediT作者贡献声明
Brahim Jabri: 写作——审稿与编辑、初稿撰写、指导、方法学设计、调查。
Slimane Faouzi: 写作——审稿与编辑、资源获取、调查。
Abdellah Bouzit: 写作——审稿与编辑、方法学设计、数据分析。
Hassan Chtibi: 写作——初稿撰写、方法学设计、数据分析。
Sihame Assimi: 写作——审稿与编辑、验证、资源获取。
Maryem Iken: 写作——审稿与编辑、验证、指导、数据整理。