离体评估Limosilactobacillus和Enterococcus分离株对猪繁殖与呼吸综合征病毒的抑制活性

《Archives of Microbiology》：In vitro evaluation of Limosilactobacillus and Enterococcus isolates for inhibitory activity against porcine reproductive and respiratory syndrome virus

本研究利用MARC-145细胞模型筛选出3株乳酸菌（HH09、HH32-1、HH69）对PRRSV具有显著抗病毒作用，其机制涉及调控细胞因子（IL-6、IL-8、TNF-α等）及ISG15、OAS1等抗病毒基因表达。

　　

摘要

新兴的病毒病原体，如猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV），仍然对养猪业构成重大威胁，由于现有疫苗的保护作用有限，导致严重的经济损失。在本研究中，使用MARC-145细胞系作为体外感染模型，筛选具有抗PRRSV潜力的乳酸菌（LAB）菌株。从哺乳期仔猪的粪便样本中获得了45株LAB菌株，去除具有细胞毒性的菌株后，评估了剩余25株菌株的抗病毒特性。在测试的菌株中，HH69的细胞内成分表现出最强的预防效果，而HH09则表现出最高的直接抑制效果。HH09和HH32-1均显示出显著的治疗效果。在预防实验中，HH69显著抑制了PRRSV-M的转录，并降低了促炎细胞因子（包括白细胞介素（IL）-8和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）以及抗炎细胞因子（包括IL-10和转化生长因子-β1（TGF-β1））的表达，同时增强了MARC-145细胞中干扰素刺激基因15（ISG15）的表达。在直接抑制实验中，HH09显著降低了PRRSV-M的活性，并减少了IL-6、IL-8、TGF-β1和TNF-α的水平。在治疗实验中，HH09同样显著降低了PRRSV-M的活性，并减少了IL-6、IL-8、IL-10和TGF-β1的水平；而HH32-1则降低了PRRSV-M的活性、IL-8和TGF-β1的水平，同时提高了抗病毒酶2’-5’-寡腺苷酸合成酶1（OAS1）的活性。通过显微镜观察、生化特性和系统发育分析，确定HH09属于Limosilactobacillus reuteri，HH32-1属于Enterococcus faecium，HH69属于Enterococcus faecalis。这些发现表明，HH09、HH32-1和HH69可能通过调节细胞因子和干扰素刺激基因（ISG）反应来发挥抗PRRSV的作用。