通过与所述水泥基体形成键合，为混凝土制备长期超疏水涂层

《Progress in Organic Coatings》：Long-term superhydrophobic coatings for concrete by producing bonds with cement matrix

NLX-101通过激活5-HT1A受体改善脆性X综合征（FXS）小鼠的多动症、重复行为、焦虑及认知缺陷，剂量依赖性恢复开放场距离、自我梳理、进食抑制等指标至野生型水平。

　　

Ronan Depoortère|Michael R. Tranfaglia|Adrian Newman-Tancredi

Neurolixis SAS，法国卡斯特尔市乔治·沙尔帕克街2号，邮编81100

摘要

脆性X综合征（FXS）是最常见的X连锁显性自闭症谱系障碍，会导致一系列发育问题，其特征是轻度至重度的情绪/认知功能障碍。NLX-101是一种高度选择性且完全有效的5-HT_1A受体后突触激动剂，在FXS转基因小鼠模型中显示出改善感觉过敏和脑电图异常的效果。本研究考察了NLX-101是否能够“正常化”（即恢复到野生型小鼠的水平）成年雄性FMR1 KO2小鼠表现出的多种行为异常。FMR1 KO2小鼠接受NLX-101（0.64或2.5毫克/千克，腹腔注射）治疗后，依次进行了以下测试：1）开放场地测试（评估多动性和刻板行为，如自我梳理）；2）三室分隔测试（评估社交记忆）；3）筑巢行为测试（评估日常生活能力）；4）新物体识别测试（评估工作记忆）；5）食欲减退测试（评估对新事物的抑制反应，即焦虑表现）。每次测试之间都有三天的洗脱期。NLX-101在0.64和2.5毫克/千克的剂量下均能正常化多动性和过度自我梳理行为，而食欲减退以及工作记忆和社交记忆的缺陷在部分（0.64毫克/千克）或完全（2.5毫克/千克）剂量下得到了改善。在2.5毫克/千克剂量下，异常的筑巢行为也得到了部分正常化。总之，NLX-101对FMR1 KO2小鼠表现出的多种行为和情绪/认知缺陷具有有益且剂量依赖性的改善作用。这些结果突显了使用选择性5-HT_1A受体激动剂作为治疗FXS的新策略的潜力，因为目前尚无批准的有效且安全的药物疗法。

引言

脆性X综合征（FXS）是一种由“脆性X信使核糖核蛋白”（FMRP）水平降低引起的常染色体X连锁自闭症谱系障碍（ASD）（Dombrowski等人，2002年；Rousseau等人，1995年）。FXS是一种罕见的发育障碍，在美国男孩中的发病率约为1:7000，在女孩中约为1:11,000（https://www.cdc.gov/fragile-x-syndrome/data/index.html）。该疾病影响男性和女性的大脑，对智力发展和行为产生显著不良影响，是最常见的遗传性智力障碍形式。FMRP的表达受FMR1基因调控，FXS的症状/体征严重程度取决于该基因的突变程度。FMRP是翻译过程的抑制因子，也是突触可塑性的关键调节因子，其缺失会对神经元回路和大脑的正常功能产生深远影响。因此，FXS患者可能出现多种行为和情绪/认知缺陷，如焦虑、多动、冲动、注意力问题、攻击性、智力障碍、重复性行为、社交互动能力差、语言发育迟缓、感觉过敏以及癫痫发作倾向（Greiss Hess等人，2016年；Hagerman和Hagerman，2002年）。由于目前尚无批准用于治疗FXS的药物，因此迫切需要一种新型、创新、有效且安全的疗法。

在临床前研究中，通常使用FMR1敲除（KO）小鼠模型来评估候选药物。这种模型最初由荷兰-比利时脆性X联盟开发（“Fmr1敲除小鼠：用于研究脆性X智力障碍的模型”）。FMR1 KO小鼠是通过将新霉素 cassette插入FMR1基因的外显子5中生成的，导致其FMRP和FMR1 mRNA水平降低。后来通过删除FMR1基因的启动子和第一个外显子，产生了FMR1 KO2小鼠（Mientjes等人，2006年）。FMR1 KO2小鼠缺乏FMRP蛋白和FMR1 mRNA，表现出与人类FXS患者相似的行为异常，包括多动、重复行为以及学习和记忆缺陷（Gaudissard等人，2017年）。FMR1 KO2小鼠已被用于筛选FXS的治疗候选药物（Deacon等人，2015年；Tranfaglia等人，2019年）。

5-羟色胺（5-HT_1A）受体最近被确定为治疗FXS的有希望的目标。在FXS的果蝇模型（homozygous dFMR1^Δ50突变体）中，使用5-HT_1A受体部分激动剂eltoprazine进行治疗可以改善突触传递、纠正线粒体缺陷，并最终改善运动行为（Vannelli等人，2024年）。此外，年轻FMR1 KO小鼠的全脑5-HT_1A受体表达水平低于同龄对照组，这表明幼年时期5-HT_1A受体激活不足可能影响神经元正常发育（Saraf等人，2024年）。

在本研究中，我们测试了NLX-101（又称F15599），这是一种新型的高选择性5-HT_1A受体激动剂，主要作用于突触后受体，尤其是在大脑皮层区域（Newman-Tancredi等人，2022年）。NLX-101在情绪缺陷、攻击性和神经可塑性（神经元生长、BDNF水平升高、神经发生）的模型中表现出快速而显著的效果（Cabanu等人，2022年；Vahid-Ansari等人，2024年；van Hagen等人，2022年），表明它可能是治疗FXS等ASD的潜在候选药物。最近的研究表明，NLX-101可以减少发育中的FMR1 KO小鼠的听觉诱发性癫痫发作（AGS）（Tao等人，2023年）。此外，在相似剂量范围（1.2至2.4毫克/千克，腹腔注射）内，NLX-101显著提高了小鼠的存活率。即使在连续5天内每日给药，NLX-101（1.8毫克/千克）仍能有效减少癫痫发作，表明该化合物没有快速耐受性。值得注意的是，NLX-112（NLX-101的化学类似物，同样对5-HT_1A受体具有高度选择性）也能类似地预防FMR1 KO小鼠的AGS，但这种效果可被选择性5-HT_1A受体抑制剂WAY-100,635逆转（Saraf等人，2024年）。NLX-101还改善了同一品系FMR1 KO小鼠的听觉时间处理能力（Tao等人，2025年）。盐水处理的FMR1 KO小鼠与野生型小鼠相比，表现出N1（声音诱发事件相关电位的第一个负峰）幅度增加和单次试验功率（STP）降低，以及对听觉间隙噪声刺激的相位锁定能力减弱；而急性给予NLX-101（1.8毫克/千克，腹腔注射）后，N1幅度和STP在出生后第30天显著改善，试验间相位聚集也显著增加（Tao等人，2025年）。综上所述，NLX-101可能成为改善FXS患者多种功能障碍的潜在药物选择。在本研究中，我们使用一系列行为测试评估了NLX-101在成年雄性FMR1 KO2小鼠（而非FMR1 KO小鼠）中的效果，这些测试包括多动性、刻板行为、学习和记忆缺陷以及日常生活能力（Richter和Zhao，2021年）。我们使用开放场地测试评估多动性和刻板行为，三室分隔测试评估社交记忆，筑巢行为测试评估日常生活能力，新物体识别测试评估工作记忆，以及食欲减退测试评估焦虑。

材料与方法

实验在智利圣地亚哥大学的生态与生物多样性委员会进行。

NLX-101可正常化FMR1 KO2小鼠的多种异常行为表型

在开放场地测试中，接受安慰剂处理的野生型小鼠平均行进距离为3335厘米（图1左上角的第一组数据）；相比之下，接受NLX-101（0.64或2.5毫克/千克，腹腔注射）处理的FMR1 KO2小鼠表现出多动性，行进距离是安慰剂组的2.5倍（8162厘米，第二组数据）。NLX-101几乎完全逆转了FMR1 KO2小鼠的多动性，其平均行进距离与2.5毫克/千克剂量下的野生型小鼠相当。

同样，FMR1 KO2小鼠自我梳理的时间比安慰剂组长69%

讨论

本研究的主要发现是，选择性5-HT_1A受体激动剂NLX-101在重复/急性给药条件下（每次给药间隔3天洗脱期）几乎完全逆转了成年雄性FMR1 KO2小鼠的异常行为表型。因此，NLX-101完全正常化了：(i) 开放场地测试中的多动性和过度自我梳理行为；(ii) 新事物抑制喂养（NSF）中的食欲减退现象。

作者贡献声明

Ronan Depoortère：撰写、审稿与编辑、初稿撰写、数据分析。Michael R. Tranfaglia：资源获取、项目管理、资金申请。Adrian Newman-Tancredi：撰写、审稿与编辑、初稿撰写、验证、数据分析。

资助

本研究由FRAXA研究基金会资助。

未引用参考文献

Cell，1994

利益冲突声明

A.N.-T.和R.D.是Neurolixis公司的员工和股东。

M.R.T.是FRAXA研究基金会的医学总监。

致谢

我们感谢Pablo Cornejo和Robert Deacon完成了实验工作。