药用蘑菇灵芝（Ganoderma lucidum）和伞菌（Polyporus umbellatus）在MDCK和CRFK细胞中的抗纤维化作用

《Veterinary Research Communications》：Antifibrotic action of medicinal mushrooms Ganoderma lucidum and Polyporus umbellatus in MDCK and CRFK cells

慢性肾病（CKD）导致肾纤维化的关键机制是TGF-β1介导的上皮间质转化（EMT）。本研究通过MTT和NRU实验评估灵芝（GL）和蜜环菌（PU）提取物对犬（MDCK）和猫（CRFK）肾细胞的毒性及抗纤维化效果，发现两者均安全且抑制TGF-β1诱导的EMT相关基因（α-SMA、TIMP1、Col1a、FN1），联合使用效果更优。

　　

摘要

慢性肾病（CKD）是犬猫发病和死亡的重要原因，其特征是进行性的肾功能障碍和间质纤维化。肾纤维化主要由上皮-间充质转化（EMT）驱动，这一过程由转化生长因子-β1（TGF-β1）介导。由于抗纤维化疗法有限，人们越来越关注天然生物活性化合物，包括灵芝（Ganoderma lucidum，GL）和伞菌（Polyporus umbellatus，PU）等药用蘑菇。然而，这些化合物在伴侣动物中的肾脏保护作用仍不明确。在本研究中，我们使用MTT和NRU检测方法，分析了GL和PU提取物对犬（MDCK）和猫（CRFK）肾细胞存活率及EMT相关基因表达的影响，并通过α-SMA、TIMP1、Col1a和FN1的mRNA表达来评估EMT情况，实验在基础条件和TGF-β1诱导条件下进行。提取物的化学成分通过超高分辨率质谱技术进行了分析。两种提取物在浓度高达5 mg/mL时均无细胞毒性，并且能够提高MDCK和CRFK细胞的存活率（p < 0.05）。在基础条件下，GL可适度降低EMT相关基因的表达，而PU的效果有限。在TGF-β1刺激下，两种提取物均显著抑制了EMT相关基因的表达；然而，GL + PU联合处理对α-SMA、TIMP1、Col1a和FN1的表达抑制作用更强（p < 0.01），表明具有叠加的抗纤维化效果。总之，GL和PU提取物能有效抑制TGF-β1诱导的EMT过程，且无细胞毒性，联合使用比单独使用任何一种提取物更有效。这些体外研究结果表明，药用蘑菇提取物是具有潜力的肾脏保护和抗纤维化候选物质，需要在伴侣动物体内进一步验证。