欧橄榄（Olea europaea）叶提取物在预防异丙肾上腺素诱导的心肌损伤方面的治疗潜力：综合生化分析、液相色谱-质谱（LC-MS）谱型分析及分子对接研究

《Journal of Ethnopharmacology》：Therapeutic potential of Olea europaea leaf extract in preventing isoproterenol-induced myocardial injury: integrated biochemical, LC-MS profiling, and molecular docking analyses

橄榄叶乙醇提取物对异丙肾上腺素诱导心肌梗死模型的 cardioprotective effects及其机制研究。通过生化检测、氧化应激指标、凋亡和纤维化标志物分析，结合LC-MS鉴定出15种活性成分（如naringenin、luteolin），分子对接显示其与PDI、ACE蛋白高亲和力，证实OELE通过抗氧化、调节脂质代谢、抑制心肌纤维化及炎症反应，显著降低心肌梗死面积（TTC染色验证），为天然产物心肌保护提供新思路。

　　

梅里姆·贝纳穆尔（Meriem Benameur）| 梅里姆·贝拉尔比（Meriem Belarbi）| 阿努阿尔·费里亚尼（Anouar Feriani）| 阿卜杜勒哈菲德·纳尼（Abdelhafid Nani）| 法蒂玛·扎赫拉·加尼米（Fatima Zahra Ghanemi）| 哈姆迪·宾迪夫（Hamdi Bendif）| 苏莱曼·A·阿尔萨拉马（Sulaiman A. Alsalamah）| 埃尔迪·詹·艾塔尔（Erdi Can Aytar）| 瓦利德·埃尔法莱（Walid Elfalleh）| 尼扎尔·特利利（Nizar Tlili）| 尤尼斯·穆萨维（Younes Moussaoui）

阿尔及利亚特莱姆森大学（University of Tlemcen），自然科学与生命科学学院，地球科学与宇宙系，生物学系，天然产物实验室

摘要

民族药理学意义

在地中海传统医学中，Olea europaea的叶子被广泛用于治疗高血压，而高血压是心血管疾病（CVDs）的重要风险因素，这些疾病仍是全球主要的死亡原因之一。然而，支持其对心肌损伤作用的科学数据仍然有限，需要进一步研究。

研究目的

本研究评估了O. europaea叶子乙醇提取物（OELE）在异丙肾上腺素（ISO）诱导的心肌梗死（MI）大鼠模型中的心脏保护作用。

材料与方法

Wistar大鼠分别口服给予OELE（5和10毫克/千克体重）或阿司匹林（10毫克/千克体重），持续30天，然后在第29天和第30天注射ISO（85毫克/千克体重）以诱发MI。

通过使用凋亡、纤维化和氧化应激标志物，以及生化测试、组织学分析和梗死评估来检测心脏损伤。此外，还利用液相色谱-质谱（LC-MS）技术对酚类化合物进行了分析，并通过分子对接技术预测和研究了它们与生物靶点的潜在相互作用。

结果

LC-MS/MS分析鉴定出OELE中的15种生物活性化合物，包括柚皮素和木犀草素。OELE预处理显著降低了心脏损伤的关键生物标志物（天冬氨酸氨基转移酶（AST）、肌酸激酶-心肌带（CK-MB）和乳酸脱氢酶（LDH）、纤维蛋白原和肌钙蛋白-I）。它还改善了血浆电解质平衡（Na⁺、K⁺和Ca²⁺），并通过降低总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）来调节脂质谱型，同时提高了高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）。抗氧化防御能力得到增强，脂质过氧化减少，超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）的活性增加。组织病理学分析显示心肌结构得到保护，炎症浸润减少。2,3,5-三苯基四氮唑氯（TTC）染色证实梗死面积显著减小。分子对接模拟显示OELE生物活性化合物与蛋白质二硫键异构酶（PDI）和血管紧张素转换酶（ACE）之间存在强烈的结合亲和力，这表明它们可能对OELE的抗血栓、抗凝和心脏保护作用有所贡献。

结论

这些发现表明OELE是一种有前景的天然物质，可用于预防氧化性心脏损伤，具有开发营养补充剂和药物的潜力。

引言

心血管疾病，包括中风和心肌梗死（MI），仍然是全球主要的死亡原因（Benjamin等人，2017年；Yao等人，2023年）。心肌梗死发生时，心脏肌肉的血流受阻，导致氧气和营养供应减少，从而引发心肌损伤（Lu等人，2015年；Zeng & Jiang，2024年）。常见原因包括动脉粥样硬化斑块、血栓形成或冠状动脉痉挛，而较少见的原因包括低血压、贫血以及由瓣膜病变或心内血栓引起的冠状动脉栓塞（Thygesen等人，2018年；Chaosuwannakit & Makarawate，2021年；Jung & Kang，2022年）。

越来越多的证据表明氧化应激在心肌梗死发病机制中起着重要作用。事实上，活性氧（ROS）的过量产生会导致脂质过氧化、凋亡信号的激活和不可逆的膜损伤（Feriani等人，2022年；Aktay等人，2024年）。合成药物如他汀类药物可以通过调节炎症和改善内皮功能来减轻心肌损伤，这在实验和临床研究中都有体现（Heusch和Rassaf，2016年；Soner & ?ahin，2014年）。然而，长期使用他汀类药物与内源性抗氧化剂水平下降有关，这可能会降低身体对氧化损伤的抵抗力（Chaudhary等人，2024年；Shang等人，2023年）。这些局限性促使人们更加关注寻找副作用较少或没有副作用的替代疗法。

来自药用植物的生物分子作为潜在的心脏保护剂受到了关注（Aktay等人，2024年；Sadeghzadeh等人，2017年；Kumar & Nayak，2017年；Wang等人，2016年）。Olea europaea（橄榄树）原产于地中海地区，被用于治疗腹泻、尿路感染、炎症、糖尿病、呼吸系统和肠道疾病、痔疮、哮喘、作为泻药、风湿病以及口腔清洁剂（Hashmi等人，2015年）。在许多国家，如南欧、巴西、阿尔及利亚和突尼斯，叶子传统上被用作血管扩张剂和治疗高血压（Haloui等人，2010年；Ribeiro等人，1986年；Tahraoui等人，2007年；Amel，2013年）。特别是叶子具有多种药理活性，包括抗氧化、抗炎、降压和心脏保护作用（Filardo等人，2024年）。先前的研究表明，橄榄叶提取物在100至1000毫克/千克的剂量下连续服用2-6周，可以显著降低高血压大鼠的心率和血压。连续6周服用60毫克/千克的提取物也被证明可以减轻动脉粥样硬化并改善胰岛素抵抗（Khayyal等人，2002年；Somova等人，2003年）。多项研究表明，Olea europaea叶子中的生物活性分子，尤其是橄榄苦苷和羟基酪醇，具有强大的抗氧化和膜稳定作用。还有报道指出，这些生物分子可以改善脂质谱型，减轻氧化应激引起的心肌损伤，增强内皮功能，并防止缺血-再灌注损伤（Andreadou等人，2006年；Omar，2010年；Lockyer等人，2017年）。这些证据支持了本研究的目的，即评估橄榄叶提取物对异丙肾上腺素诱导的心肌梗死的大鼠的保护作用。分析涵盖了生化检测、氧化应激参数、心肌凋亡和纤维化标志物、组织学分析以及梗死面积测量。通过LC-MS分析和分子对接模拟来探索潜在的生物活性相互作用。

部分摘录

化学品

所使用的化学品均为MS级。乙醇购自阿尔及利亚阿尔及尔的Biochem公司。异丙肾上腺素盐酸盐购自Sigma-Aldrich公司。阿司匹林（500毫克片剂）购自突尼斯加夫萨的一家药店。

提取过程

野生橄榄树叶采集自阿尔及利亚西部特莱姆森的Sebdou地区。阿卜杜勒哈菲德·纳尼（Abdelhafid Nani）教授鉴定出该物种，样本编号为OELE-24。随后将叶子在室温下干燥、粉碎并储存以备后续使用。

Olea europaea叶提取物的植物化学成分

使用LC-MS分析确定了乙醇提取物的植物化学谱型（图S1）。表1中的结果显示有15种属于不同化学家族的化合物。主要化合物是核黄素（82.488%）和芦丁（13.526%）。还检测到了少量的其他成分，如阿魏酸、柚皮素、橄榄苦苷、芥酸和木犀草素（图1）。

分子对接

对核黄素、芦丁、柚皮素、芥酸等化合物的分子对接结果

讨论

本研究的目的是评估乙醇O. europaea叶提取物（OELE）对异丙肾上腺素（ISO）诱导的心肌梗死（MI）后Wistar大鼠心脏损伤的潜在治疗效果。本研究中使用阿司匹林（100毫克/千克，口服）作为阳性对照。与主要通过β-肾上腺素能阻滞作用的普萘洛尔不同，阿司匹林通过调节参与异丙肾上腺素诱导的心肌损伤过程中的炎症和氧化途径来发挥心脏保护作用。

结论

本研究表明，Olea europaea叶提取物（OELE）的预处理对异丙肾上腺素诱导的心肌梗死大鼠具有显著的心脏保护作用。观察到的益处包括改善脂质谱型和纠正离子紊乱及心脏损伤标志物。此外，OELE通过增强内源性酶防御和减少心脏组织中的脂质过氧化表现出抗氧化特性。分子对接模拟进一步

CRediT作者贡献声明

法蒂玛·扎赫拉·加尼米（Fatima Zahra Ghanemi）：数据可视化、方法学。阿努阿尔·费里亚尼（Anouar Feriani）：方法学、正式分析、数据管理。阿卜杜勒哈菲德·纳尼（Abdelhafid Nani）：数据可视化、监督。梅里姆·贝纳穆尔（Meriem Benameur）：初稿撰写、方法学、研究。梅里姆·贝拉尔比（Meriem Belarbi）：数据可视化、监督。尼扎尔·特利利（Nizar Tlili）：撰写-审稿与编辑、资源准备。尤尼斯·穆萨维（Younes Moussaoui）：撰写-审稿与编辑、数据可视化、监督。埃尔迪·詹·艾塔尔（Erdi Can Aytar）：正式分析、数据管理。瓦利德·埃尔法莱（Walid Elfalleh）：撰写-审稿与编辑、资源准备。

未引用参考文献

Br?uninger等人，2023年；Delgado等人，2023年；Dwyer和Coulombe，2021年；Gaudino等人，2023年；Khdhiri等人，2021年；Lindahl和Mills，2023年；Neto等人，2022年；Peyrel等人，2023年；Rangaraj等人，2021年；Rudic等人，2025年；Saito等人，2023年；Sun等人，2021年。

利益冲突

不存在利益冲突。

资助

本项工作得到了伊玛目穆罕默德·伊本·沙特伊斯兰大学（IMSIU）科学研究部的支持和资助（资助编号IMSIU-DDRSP2601）。

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的可能会影响本文所述工作的财务利益或个人关系。