普通烟草叶片和茎发育过程中基因表达的遗传调控格局

《Journal of Genetics and Genomics》:Genetic regulatory landscape of gene expression during leaf and stem development in common tobacco

【字体: 时间:2026年03月25日 来源:Journal of Genetics and Genomics 7.1

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  本研究基于220份烟草多样性样本的全基因组测序和转录组测序,解析了种群结构及基因表达调控机制。通过鉴定3.24百万SNP和231,700 InDels,揭示烟草存在两个遗传亚群,其分化与2S、2T和12S染色体特定区域的高变异数据相关。整合eQTL映射和GWAS/TWAS分析,构建了叶茎发育的基因调控网络,发现亚基因组表达偏倚对性状变异起关键作用,为多倍体作物遗传育种提供新资源。

牟寅|张志萌|侯月轩|万月英|罗巧玲|王春雄|张晓伟|孙浩伟|龙杰|蔡洁云|陈丹|徐世斌|肖英娇|李英月|唐琪琪|张晨曦|赵梦迪|杨新婷|陈佳梅|刘德鑫|童志军
中国云南省烟草农业科学院国家烟草遗传工程研究中心烟草生物技术育种重点实验室,昆明,云南650021

摘要

普通烟草(Nicotiana tabacum L.)是一种重要的异源四倍体作物,但其发育过程中基因表达的遗传调控机制仍知之甚少。本研究对220份不同的烟草样本进行了全基因组测序和转录组测序,以解析决定性状变异的遗传结构和调控机制。我们鉴定出324万个SNP和231,700个InDels,从而描述了群体结构和基因组特征。分析结果显示,在烤烟品种中存在两个遗传上不同的亚群,这两个亚群在第2S、2T和12S染色体上的五个大基因组片段存在差异,这些片段表现出较高的SNP密度、核苷酸多样性和固定指数。通过四个发育阶段的表达数量性状位点(eQTL)映射构建的基因表达调控图谱显示,亚基因组之间的基因表达调控存在不对称性。针对八个叶和茎结构性状的全基因组关联研究(GWAS)和转录组关联研究(TWAS)共鉴定出43个数量性状位点(QTL)和153个候选基因。此外,我们结合TWAS和eQTL的结果构建了叶和茎性状相关的基因调控网络,揭示了发育过程中基因调控方式的显著变化。本研究生成的基因组和转录组数据为普通烟草重要性状的遗传结构提供了宝贵的资源和见解。

引言

基因组多倍化重塑了转录调控,并通常增加了表型多样性。通过结合其祖先的遗传多样性,异源多倍体物种可以快速积累调控变异,从而增加跨亚基因组的调控相互作用的可能性(Comai, 2005; Van de Peer et al., 2017)。影响基因表达的调控变异在适应性进化和复杂性状的变异中起着关键作用(Pai et al., 2015),这在其他异源多倍体植物中也有体现。例如,在六倍体小麦中,影响同源基因表达的基因组变异有助于农艺性状的变异(He et al., 2022)。在异源四倍体棉花中,通过解析纤维发育过程中的基因调控动态,阐明了亚基因组协调在性状中的作用(You et al., 2023)。然而,遗传变异如何塑造时空基因表达,进而驱动普通烟草的表型多样性,目前仍不清楚。 Nicotiana tabacum L.(普通烟草)是一种异源四倍体物种(2n = 4x = 48),由N. sylvestris L.(S基因组)和N. tomentosiformis L.(T基因组)杂交产生(Leitch et al., 2008; Sierro et al., 2013; Sierro et al., 2014),是世界上最具有经济价值的非粮食作物之一。它也是研究多倍体进化、跨亚基因组的调控、同源基因表达偏倚、次生代谢和发育生物学的模型系统(Bally et al., 2018)。然而,由于N. tabacum庞大的(约4.3 Gb)且复杂的基因组,历史上对该物种的群体基因组和转录组研究受到了限制。因此,尽管其具有重要的经济和科学价值,但其群体基因组特征以及关键农艺性状的基因表达调控机制仍不清楚。近年来,测序成本的显著降低使得在群体水平上描述普通烟草的基因组和转录组特征成为可能。 普通烟草反映了异源多倍体物种形成的历史,并通过人类驯化进一步发展成为一种具有多种用途的经济重要作物。商业烟草主要属于N. tabacum L.物种(Sierro et al., 2014)。在农业生产中,它通常被分为烤烟(用于香烟生产)、晒烟(用于烟斗烟草)、Burley烟草(用于烟斗烟草混合物)、雪茄烟草(用于雪茄)或东方烟草(用于混合物)(Johnson, 2002)。最近的一项研究报道了涵盖这五种烟草类型的较大样本组的遗传变异和群体结构(Zan et al., 2025)。然而,该研究中的基因分型依赖于基因型测序(GBS),仅检测到95,308个SNP。尽管这项工作为普通烟草的群体遗传学提供了一些见解,但GBS数据无法捕捉全基因组的变异情况。这种低密度标记限制了遗传多样性的准确估计和群体结构的识别,也无法解析亚基因组特异性的多样性和精细的基因组结构。此外,由于不同的育种目标,这些烟草类型在植物结构、叶片形态和代谢特征上表现出明显差异。多项研究已经鉴定出与叶片性状和植株高度相关的数量性状位点(QTLs)(Liu et al., 2022; Song et al., 2025; Zan et al., 2025)。然而,这些性状背后的关键发育阶段的转录组调控景观尚未得到系统研究。
为了解析群体水平的基因组和转录组特征以及叶和茎发育过程中的基因表达调控结构,我们生成了一个高分辨率的遗传变异图谱,涵盖了220份烟草样本和四个关键发育阶段的群体转录组谱型。我们系统地描述了五种烟草类型的遗传多样性和群体结构,并分析了它们在四个阶段的动态基因表达模式。将基因表达视为数量性状,我们鉴定出了表达数量性状位点(eQTLs)和基因(eQTGs)。通过研究eQTGs的亚基因组来源并划分表达性状的亚基因组遗传力(Yang et al., 2011b),我们进一步揭示了亚基因组遗传多样性对基因表达变异的贡献。通过整合全基因组关联研究(GWAS)和转录组关联研究(TWAS),我们检测到与茎和叶性状相关的QTLs和候选基因,并评估了同源基因表达偏倚在塑造性状变异中的作用。最后,通过结合TWAS和eQTG映射结果,我们构建了叶和茎发育的基因调控网络。我们的结果共同阐明了烟草发育过程中表达调控和性状变异的遗传基础,为异源多倍体作物的遗传研究和分子育种提供了资源。
全基因组测序、转录组测序以及对多种普通烟草种质的表型分析
为了研究普通烟草(N. tabacum L.,SSTT,2n = 4x = 48)的遗传多样性和群体结构,我们收集了1979年至2024年间来自多个国家的220份不同烟草样本,包括97份烤烟(FT)、30份Burley烟草(BT)、30份雪茄烟草(CT)、30份东方烟草(OT)和29份晒烟(ST),并以4份N. rustica L.样本作为外群(表S1)。全基因组测序在BGI平台上完成。
讨论
我们构建了一个涵盖多种品种和多个发育阶段的普通烟草综合遗传和转录组图谱。通过综合分析,我们提供了关于这种重要经济作物的群体结构、基因表达动态调控、亚基因组表达偏倚以及农艺性状遗传基础的见解。这些发现揭示了烟草生物学的基本方面,对多倍体研究具有更广泛的意义。
田间表型分析
2024年,我们在云南省烟草农业科学院的实验基地种植了215个烟草品种。田间试验采用了随机区组设计,每个小区种植30株植物。栽培管理遵循当地的高质量烟草生产规范。成熟时,从每个小区随机选取8株植物测量自然pH值和NLN,同时随机抽取5株植物测定IL、SC和MLL。
未引用参考文献
Chen et al., 2014; Johnson, 1999.
数据可用性
本文中提到的220份烟草样本的全基因组重测序数据、860个样本的RNA-Seq数据以及VCF文件已存放在中国国家生物信息中心(CNCB-NGDC)/北京基因组研究所的基因组序列档案库(PRJCA050167; PRJCA050170; GVM001315),并可在以下网址公开获取:https://ngdc.cncb.ac.cn/gsahttps://ngdc.cncb.ac.cn/gvm
CRediT作者贡献声明
牟寅:数据管理、方法学、数据分析、可视化、初稿撰写、审稿与编辑。张志萌侯月轩:数据管理、数据分析、可视化、撰写、审稿与编辑。万月英:概念构思、资金获取、数据分析、撰写、审稿与编辑。万月英童志军张凯刘德鑫罗巧玲王春雄张晓伟孙浩伟龙杰蔡洁云陈丹徐世斌肖英娇李英月
利益冲突
作者声明没有利益冲突。
致谢
本研究得到了国家自然科学基金(32460511)、云南大观实验室(YNDG202302QT14)和YNTC(2023530000241027)的资助。

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