摘要A011：全基因组CRISPR筛选发现了调控巨噬细胞吞噬胶质母细胞瘤的新因子 免费

《Cancer Research》：Abstract A011: Genome-wide CRISPR screening identifies novel regulators of macrophage phagocytosis against glioblastoma Free

胶质母细胞瘤（GBM）中肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）通过抑制糖胺聚糖（GAGs）合成尤其是硫酸软骨素（CS）生物合成来减弱对肿瘤细胞的吞噬作用。通过CRISPR敲除筛选发现，CS合成通路相关基因的敲除显著增强巨噬细胞对荧光标记的GBM细胞的吞噬能力，并通过患者肿瘤样本验证CS合成在GBM中上调且主要由髓系细胞产生。本研究揭示了GAG代谢途径作为调节巨噬细胞吞噬功能的新型抑制通路，为GBM免疫治疗提供了潜在靶点。

　　

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摘要

胶质母细胞瘤（GBM）是一种具有高度侵袭性的脑癌，其特征是免疫抑制作用显著，这种抑制主要由肿瘤相关巨噬细胞（TAMs）驱动，这些巨噬细胞占肿瘤体积的30-40%。在正常组织中，巨噬细胞能够通过吞噬作用检测、吞噬并清除受损或癌变的细胞。然而，TAMs的吞噬能力明显受损，反而会促进肿瘤生长。我们试图识别调控巨噬细胞吞噬GBM细胞的分子途径，以期将TAMs重新编程为抗肿瘤效应细胞。我们在BV2巨噬细胞中进行了全基因组范围的CRISPR敲除筛选。将突变后的巨噬细胞与表达荧光报告基因ZsGreen的小鼠胶质瘤细胞共培养。当巨噬细胞吞噬ZsGreen时，会发出荧光，从而可以通过流式细胞术分离出吞噬细胞和非吞噬细胞。我们回收并测序了合成引导RNA（sgRNAs），以确定能够增强吞噬作用的基因敲除突变。对ZsGreen+巨噬细胞中sgRNAs富集情况的分析显示，参与糖胺聚糖生物合成的基因敲除突变显著增多，尤其是软骨素硫酸盐途径相关基因。在后续的CRISPR敲除巨噬细胞系中，针对软骨素硫酸盐生物合成基因的干扰显著增强了体外对GBM细胞的吞噬作用，这证实了软骨素硫酸盐合成缺失确实能促进肿瘤细胞的吞噬。为了将这些发现与GBM的实际情况联系起来，我们分析了患者肿瘤中的O-糖链合成情况。研究发现，与正常脑组织相比，GBM中的软骨素硫酸盐合成基因表达上调，且髓系细胞是GBM微环境中软骨素硫酸盐的主要产生者。这些数据表明，软骨素硫酸盐合成可能是抑制巨噬细胞吞噬功能的新途径。本研究强调了糖胺聚糖代谢作为治疗性重新编程TAMs、从而增强GBM患者先天免疫力和免疫治疗效果的潜在靶点。

引用格式：

Shan Grewal, Vaseem Shaikh, Adrian Granda Farias, Kevin R. Brown, Lucas Asselstine, Mohamed Taleb, Chitra Venugopal, Patricia Mero, Jason Moffat, Sheila K. Singh. 全基因组CRISPR筛选发现调控巨噬细胞吞噬胶质母细胞瘤的新机制 [摘要]。载于：美国癌症研究协会（AACR）脑癌专题会议论文集；2026年3月23-25日；宾夕法尼亚州费城。费城（PA）：AACR；Cancer Res 2026;86(6_Suppl):Abstract nr A011。