摘要A019：利用具有多重作用机制的抗体-酶融合蛋白靶向胶质母细胞瘤 免费

《Cancer Research》：Abstract A019: Targeting glioblastoma using an antibody-enzyme fusion protein with a multi-pronged mechanism of action Free

抗体-酶融合蛋白通过靶向结合、超氧化物生成和免疫原性细胞死亡三重机制治疗胶质母细胞瘤，体外和体内实验均显示显著疗效。

　　

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摘要

我们开发了一种抗体-酶融合蛋白，旨在通过独特的三重作用机制克服由于肿瘤微环境（TME）的免疫抑制作用而导致的癌症治疗限制。我们的方法是将一个靶向肿瘤的纳米体与经过改造的黄嘌呤氧化酶（XO）酶结构域结合，以最大化超氧阴离子的产生活性。其作用机制包括：1）靶向肿瘤的纳米体结构域与表达目标分子的细胞结合，选择性地抑制细胞生长；2）XO酶结构域产生细胞外超氧阴离子，触发目标细胞及其周围细胞的死亡；3）死亡细胞发生免疫原性细胞死亡（ICD），将损伤相关分子模式（DAMPs）释放到肿瘤微环境中，从而招募免疫细胞。这种即插即用的方法能够将治疗性酶直接输送到肿瘤微环境中，绕过传统治疗的局限性，为肿瘤学治疗提供了一个新的平台。在本研究中，我们使用一种针对EGFR的融合蛋白，在胶质母细胞瘤（GBM）模型中验证了该方法的可行性。GBM的一个关键分子特征是EGFR的扩增和突变，然而目前的EGFR靶向疗法（如西妥昔单抗或激酶抑制剂）由于肿瘤异质性和适应性耐药性而效果有限。由于肿瘤微环境的免疫抑制作用，GBM肿瘤通常对免疫疗法（如检查点阻断和CAR-T疗法）具有抗性。旨在诱导炎症反应的方法在GBM中显示出潜力，例如能够触发ICD的溶瘤病毒。为了验证我们的主要分子VISK-103的目标结合能力和酶活性，我们进行了酶活性测定、ELISA结合测定和流式细胞术分析。为了证明概念的可行性，我们通过细胞活力测定和小鼠GBM异种移植模型在体外和体内测量了其疗效。此外，我们还使用了几种体外技术，证明了ICD标志物（如eATP、HMGB1）的产生，并通过共培养实验测量了免疫激活情况。我们的结果表明，VISK-103能够以纳摩尔级别的亲和力与EGFR阳性的GBM细胞结合。VISK-103在体外对EGFR阳性细胞具有亚微摩尔级别的IC50值，能够诱导细胞死亡。在GBM异种移植模型中，VISK-103治疗使肿瘤负荷减少了约50%，并延长了动物的生存期。此外，在共培养模型中，VISK-103治疗导致DAMPs的释放，并激活了树突状细胞，使用VISK-103处理的细胞与化疗对照组相比，IL-1b的释放量增加了3倍以上。综上所述，我们正在开发一种首创的即插即用平台，该平台利用抗体-酶支架将细胞选择性杀伤与免疫系统激活相结合，为GBM治疗提供多重策略。