单宁酸通过抑制MMP-2介导的上皮-间充质转化来延缓肺腺癌的进展

《Biochemical Genetics》：Tannic Acid Inhibits Lung Adenocarcinoma Progression by Suppressing MMP-2-Mediated Epithelial-Mesenchymal Transition

研究探讨鞣酸对肺腺癌A549细胞恶性表型的影响，证实其通过抑制MMP-2表达及活性，下调Twist/Snail和N-cadherin/vimentin，上调E-cadherin，干扰EMT过程，抑制细胞活力、迁移和侵袭，并在体内实验中验证其抗肿瘤效果。

　　

摘要

本研究探讨了从橡果中提取的天然多酚单宁酸（TA）对肺腺癌（LUAD）的抗癌作用，重点关注其对上皮-间质转化（EMT）和基质金属蛋白酶-2（MMP-2）的影响。我们使用CCK-8、伤口愈合实验和Transwell实验来评估TA对A549 LUAD细胞恶性行为的影响。通过Western blot（WB）和免疫荧光技术检测与EMT相关的蛋白质表达。分子对接技术用于分析TA与MMP-2的结合机制。RT-qPCR、WB和MMP-2活性测定方法用于评估MMP-2的表达和酶活性。建立了过表达MMP-2的细胞模型，以明确其在TA介导的抗癌作用中的角色。此外，还采用了A549皮下异种移植模型来验证TA的体内抗癌效果及其对MMP-2的影响。结果发现，TA显著抑制了LUAD细胞的存活能力、迁移能力和侵袭性，下调了与EMT相关的转录因子Twist和Snail的表达，降低了N-钙黏蛋白和血管纤连蛋白的水平，同时上调了E-钙黏蛋白的表达。分子对接显示TA通过多个氢键与MMP-2稳定结合。TA在mRNA和蛋白质水平上均下调了MMP-2的表达，并抑制了其酶活性。MMP-2的过表达部分逆转了TA对细胞存活能力、迁移能力和侵袭性的抑制作用。在体内实验中，TA显著抑制了肿瘤生长，降低了MMP-2的表达，并抑制了EMT过程；而MMP-2的过表达则减弱了这些抗癌效果。综上所述，TA通过抑制MMP-2的表达和活性来抑制LUAD的进展，从而干扰EMT过程。MMP-2是TA的关键靶点，这表明TA具有作为治疗剂的潜力。

图形摘要

单宁酸（TA）显著抑制了肺腺癌A549细胞的存活能力、迁移能力、侵袭能力和肿瘤生长。其机制在于TA通过靶向并下调MMP-2的表达来抑制上皮-间质转化（EMT）。这一效应表现为上皮标志物E-钙黏蛋白的表达上调，同时伴随着间质标志物N-钙黏蛋白和血管纤连蛋白以及EMT相关转录因子Twist和Snail的表达下调。