实验设计指导下的膜捕获技术有助于将连续病毒灭活过程与下游强化处理流程相结合，其中使用Phi6病毒作为替代病毒进行灭活操作

《Biotechnology Progress》：Design of experiments-guided membrane capture facilitates integration of continuous virus inactivation using Phi6 as a surrogate virus in an intensified downstream process

过程强化下游工艺平台研究显示，通过实验设计方法优化Protein A膜色谱柱和开发连续病毒灭活系统，可使抗体生产效率提升20倍，缓冲液消耗减少70%，同时保持病毒灭活效果达5个对数且不影响产品质量。

摘要

随着对高效且灵活的生物制造需求的增长，人们对流程强化的下游生产平台的兴趣也在增加。本研究评估了一种强化型单克隆抗体（mAb）纯化流程，其中两个传统上以批次模式进行的单元操作——Protein A捕获和低pH值病毒灭活（VI）——被重新设计，以提高生产效率并减少资源消耗。通过实验设计方法优化了快速循环Protein A膜色谱技术，以解决膜相关的挑战，如缓冲液消耗问题。系统地减少了洗涤步骤的体积，同时不影响宿主细胞蛋白或宿主细胞DNA的清除效率，从而将总洗涤缓冲液消耗量减少了70%。在工业化生产规模下，膜吸附剂达到了与基准树脂相当的关键质量指标，同时将生产效率提高了约20倍，并降低了捕获步骤的成本。Protein A洗脱液在一种新型的连续病毒灭活（cVI）系统中进行处理，该系统使用噬菌体Phi6作为有包膜病毒的替代品。在停留时间为35分钟和70分钟的情况下，cVI系统实现了≥5-log的病毒灭活效果，与传统批次工艺相当，且不影响mAb的质量。研究表明，基于膜的Protein A捕获技术和连续病毒灭活技术可以无缝集成到强化型生产流程中。这种方法在显著减少缓冲液使用量和成本的同时，有效保持了产品质量，从而支持了临床规模mAb制造的模块化强化策略。

利益冲突声明

M. Grünberg、L. Lipski、K. Meyer-Heinrichs、D. Mocsy、T.-J. Filz、B. Quaas和A. Stützer在研究期间是德国哥廷根Sartorius公司的员工。G. Fisicaro和T. Duvignau在研究期间是法国Ales的LFB Biomanufacturing公司的员工。

同行评审

为了保证透明度，与本文相关的同行评审文件可在此链接查看：https://doi.org/10.1002/btpr.88504。

第二轮评审
编辑决定函	2026/02/20
第一位审稿人的建议	2026/02/20
第一位审稿人的报告	2026/02/20
作者的回复附件1	2026/01/19
第一轮评审
编辑决定函	2025/11/20
第一位审稿人的报告	2025/11/15
第一位审稿人的报告附件1	2025/11/15
第二位审稿人的报告	2025/11/12
第二位审稿人的报告附件1	2025/11/12

数据可用性声明

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