湿润暴露性烧伤药膏（MEBO）通过调节炎症因子和自噬作用，促进大鼠慢性糖尿病伤口的愈合

《Pathology - Research and Practice》：Moist exposed burn ointment (MEBO) promotes healing of chronic diabetic wounds in rats by regulating inflammatory factors and autophagy

MEBO通过调节炎症反应、自噬和血管生成促进糖尿病大鼠伤口愈合。

　　

杨艳|杨伟玲|黄金梅|黄永军|龚元勋

广西民族医科大学基础医学院，中国百色市城厢路98号，533000

摘要

慢性糖尿病伤口由于其持续存在且难以愈合的特性，成为全球主要的健康挑战，给患者带来了巨大的负担。湿润暴露烧伤药膏（MEBO）是一种中药制剂，在治疗糖尿病伤口方面显示出治疗潜力；然而，其作用机制尚未完全阐明。在本研究中，将MEBO和重组牛基纤维母细胞生长因子（rb-bFGF）（作为阳性对照）应用于糖尿病大鼠伤口模型。随后评估了伤口病理、超微结构和蛋白质表达谱。结果表明，MEBO降低了炎症因子iNOS和IL-6的表达，从而减轻了炎症细胞的浸润，同时增加了IL-10和Arg1的表达。此外，MEBO增强了ADAM-10和p-AKT的表达，促进了细胞再生并增加了胶原蛋白的沉积。它还提高了Beclin1的表达，同时降低了GRP78和CTSK的水平，表明通过调节自噬相关途径改善了亚细胞结构的完整性。值得注意的是，MEBO通过调节CD31的表达促进了血管生成，从而加速了伤口愈合过程。总之，MEBO通过调节炎症反应、增强细胞再生、调节自噬、促进胶原蛋白沉积和促进血管生成，显著促进了糖尿病大鼠的伤口愈合。

引言

糖尿病伤口的特点是严重性和高风险，对糖尿病患者的身体和心理健康产生了显著影响，并给个人生活和社会整体带来了沉重负担。因此，开发有效的糖尿病伤口治疗方法是一项关键且具有挑战性的任务[1]，这突显了研究这些伤口的发病机制和治疗方法的重要性。

由于多种因素的影响，糖尿病伤口的愈合过程是慢性且具有挑战性的，包括过度炎症和内质网应激异常。炎症作为异物反应的一部分，对伤口闭合至关重要。然而，长期或过度的炎症反应会阻碍愈合过程[2]，最终可能导致伤口修复延迟[3]。自噬是一种高度保守的细胞降解和回收过程，在应激条件下可促进细胞存活[4]。除了这一基本作用外，越来越多的证据表明，自噬在伤口部位炎症反应、应激和细胞代谢的交汇处起着复杂的作用[5]。因此，自噬在伤口愈合中起着复杂且依赖于具体情境的作用，其失调可能会影响愈合过程。

目前可用的伤口治疗方法，包括小分子化合物、生长因子和伤口敷料，存在一些限制，这些限制限制了它们的临床应用。这些限制包括稳定性差、合成过程复杂、组织修复过度、治疗效果有限以及成本高昂[6]、[7]。湿润暴露烧伤药膏（MEBO）是一种中药制剂，由于其有效性、稳定性和可负担性，在许多亚洲国家被广泛用于慢性伤口的管理[8]、[9]。MEBO是一种基于油的天然制剂，含有小檗碱油和β-谷甾醇（一种植物来源的类固醇），具有多靶点的治疗潜力[10]。先前的研究表明，MEBO可以通过多种机制促进慢性伤口愈合，包括促进再上皮化[11]、增加血管内皮生长因子（VEGF）和基纤维母细胞生长因子（bFGF）的表达[9]，以及上调神经生长因子和P物质[12]。此外，据报道MEBO通过激活SDF-1/CXCR4轴和调节mTOR相关的自噬信号通路来促进血管生成[8]。然而，MEBO对糖尿病伤口的治疗效果尚未从炎症、自噬和血管生成的综合性角度进行充分研究。因此，我们假设MEBO通过激活自噬、减少炎症反应和促进伤口部位的血管生成来促进糖尿病伤口愈合。为了验证这一假设，我们在链脲佐菌素诱导的糖尿病大鼠中建立了全层皮肤缺损模型，然后使用MEBO进行治疗。

章节片段

大鼠皮肤伤口愈合模型

从长沙天勤生物科技有限公司购买了体重280–290克的雄性Wistar大鼠（大约8周大）。通过腹腔注射链脲佐菌素（STZ；Solarbio，中国，S8050）以35 mg/kg的剂量连续两天诱导糖尿病。通过血糖水平超过16.7 mmol/L确认糖尿病成功诱导，并持续到组织收集。在两侧进行直径为3厘米的全层皮肤切除

MEBO促进糖尿病大鼠伤口愈合

首先评估了MEBO对糖尿病大鼠伤口的治疗效果。伤口的表面图像显示了不同时间点四组之间的不同状况（图1A）。最初，形成了几乎圆形且粉红色的全层皮肤伤口。值得注意的是，在第3天、第7天和第14天，模型组大鼠的伤口显示出更厚的黄色渗出物

讨论

糖尿病伤口在治疗方面面临重大挑战，并给患者带来了巨大负担。MEBO是一种传统的中药疗法，已被广泛用于各种慢性伤口的管理。尽管文献中有关于使用MEBO治疗糖尿病足溃疡的报告，但其综合作用机制仍不清楚[8]、[11]、[13]。本研究旨在探讨MEBO的治疗效果和机制

潜在的限制和未来研究

虽然我们的发现表明MEBO对糖尿病伤口愈合具有令人鼓舞的治疗效果，但在解释这些结果时应考虑几个限制。首先，本研究中缺乏反向信号分析，这限制了我们对观察到的效果是否仅通过正向信号传递或涉及双向通信的理解，这可能会影响这里提出的机制框架。此外，我们的研究并未完全阐明

结论

先前的证据[5]表明，MEBO含有基于油的成分，这些成分在伤口表面形成保护屏障，将其与外部环境隔离开来，同时保持湿润的愈合环境，并将药理活性成分输送到伤口部位。本研究强调，MEBO通过调节炎症细胞因子、增强胶原蛋白沉积和调节相关分子通路来促进糖尿病伤口愈合。这些效应共同作用

作者贡献声明

杨伟玲：撰写——原始草稿，方法学。黄金梅：方法学，研究。杨艳：撰写——原始草稿，研究，概念化。黄永军：方法学，研究。龚元勋：撰写——审稿与编辑，方法学，资金获取。

伦理批准和参与同意

本研究的伦理批准和参与同意是在广西民族医科大学的声明下进行的，并得到了该校伦理委员会的批准（伦理批准编号2022052701）

知情同意

不适用

资助

本工作得到了广西自然科学基金[2020GXNSFBA297052]、百色市区域多疾病联合专项项目[Bai Ke][20224147]、广西民族医科大学校级项目[RZ200002223]和[Y2021001]的支持。

利益冲突声明

我，江艳，声明与提交给Pathology - Research and Practice的论文“湿润暴露烧伤药膏（MEBO）通过调节炎症因子和自噬促进大鼠慢性糖尿病伤口的愈合”无关利益冲突。我确认论文中报告的结果和解释是原创的，未抄袭。

致谢

我们感谢广西民族医科大学肿瘤免疫病理学实验室提供的实验场所和人员的协助。