《PLOS Pathogens》：A novel method for establishing a mouse model of hepatic echinococcosis: Ultrasound-guided percutaneous liver puncture modeling
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为探索创伤更小、成模更稳的肝包虫病动物模型构建方法，研究人员比较了超声引导经皮肝穿刺接种与传统开腹手术的效果。结果显示，超声引导法可将小鼠存活率提升至100%，并发症率降至6.7%，建模成功率高达100%，且病灶生长更均一，病理特征更典型，为肝包虫病研究提供了更优的动物实验平台。
肝包虫病(Echinococcosis)是一种由棘球绦虫幼虫寄生引起的人畜共患寄生虫病，严重威胁人类健康。然而，针对该疾病的研究却面临一个基础性的瓶颈：缺乏稳定、可靠的动物模型。传统的建模方法，如口服虫卵或开腹手术肝内注射，存在创伤大、操作复杂、模型一致性差、动物死亡率高等问题，极大地限制了发病机制研究和治疗策略的探索。为了打破这一僵局，石河子大学等机构的研究团队开展了一项创新性研究，旨在开发一种更优的建模技术。他们的研究成果最终发表在《PLOS Pathogens》期刊上。
这项研究究竟是如何解决上述难题的呢？研究人员巧妙地将临床医学中成熟的超声引导经皮穿刺技术，应用到了小鼠肝包虫病模型的构建中。他们系统性地比较了这种新方法（超声引导组）与传统开腹手术方法（手术组）在构建小鼠肝细粒棘球蚴病(CE)和多房棘球蚴病(AE)模型上的效果。研究主要运用了以下关键技术方法：首先，从感染的长爪沙鼠和绵羊肝脏中分别提取高活力的多房棘球绦虫(Alveolar Echinococcus, AE)囊蚴和细粒棘球绦虫(Cystic Echinococcus, CE)原头节。其次，对C57BL/6小鼠分组后，分别采用超声实时引导下经皮肝穿刺注射和传统开腹肝被膜下注射两种方式进行虫体接种。最后，通过术后动态超声监测、终末解剖结合组织病理学（H&E染色、Masson三色染色）以及免疫荧光染色等技术，对模型小鼠的存活、并发症、病灶生长及免疫微环境特征进行了全面评估。
研究结果显示，新方法在多个维度上显著优于传统方法：
建模相关死亡率和并发症发生率在超声组中低于手术组
超声引导组小鼠的总体存活率达到100%（30/30），显著高于手术组的86.7%（26/30）。手术组的死亡均与严重并发症相关，如切口感染引发的败血症、肠梗阻等。超声引导组的术后并发症率仅为6.7%（2例穿刺点感染），低于手术组的20%（6例）。此外，超声引导法手术时间更短，术中失血更少。
超声组的建模效率和成功率显著高于手术组
通过动态超声监测和终末解剖发现，超声引导法在AE和CE模型中都实现了100%的建模成功率（30/30），而手术组的成功率仅为80%（24/30）。这表明超声引导技术能更可靠地建立感染模型。
疾病进展的形态学病程在超声组中快于手术组
在感染后不同时间点（30、60、90、120天）的观察显示，无论是AE还是CE模型，超声引导组小鼠肝脏病灶的生长速度和最终体积/重量均超过手术组。例如，在120天时，超声组的肝脏病灶湿重显著更大，表明疾病进展更为迅速。
H&E染色和Masson三色染色观察显示超声组的病理过程更快
组织病理学分析进一步证实了超声组的进展优势。在AE模型中，超声组更早出现典型的囊泡和纤维包裹，呈现浸润性生长。在CE模型中，超声组的内囊壁形成更早、更完整，对外囊的压迫更明显。Masson染色显示，两组均存在纤维化，但进展模式有差异。
F4/80和TGF-β表达的免疫荧光共定位分析
免疫荧光分析揭示了两种建模方法造成的免疫微环境差异。在AE感染模型中，手术组的巨噬细胞标记物F4/80和转化生长因子-β(TGF-β)表达均显著高于超声组，表明手术创伤引发了更强烈的肉芽肿性免疫反应。然而，在CE感染模型中，情况更为复杂：手术组表现出高F4/80、低TGF-β的炎症期特征；而超声引导接种组则呈现低F4/80、高TGF-β的免疫抑制状态，这可能为寄生虫创造了更有利的生长条件。
结论与讨论部分总结指出，本研究系统评估了超声引导经皮肝穿刺技术构建小鼠肝包虫病模型的效能与安全性。与传统开腹手术相比，新方法具有显著优势：它将小鼠存活率提升至100%，并将并发症率降至6.7%；实现了100%的建模成功率；病灶生长更均一，进展更快；并能诱导出更接近人类疾病自然进程的免疫微环境特征（尤其是在CE模型中观察到的免疫抑制状态）。这些发现凸显了建模技术本身是影响模型质量与稳定性的关键实验变量。
该研究的成功，在于将超声实时可视化、精准介入的优点与动物模型构建需求相结合，不仅操作更微创、高效，还通过精准接种和高剂量虫体定位，可能改变了局部的免疫应答格局，从而“复制”出不同的疾病病理进程。这为未来肝包虫病的机制研究（如免疫逃逸、纤维化）、药物疗效评价乃至针对不同免疫分型患者的个性化临床治疗策略开发，提供了一个更稳定、可靠且干扰更少的动物实验平台。尽管研究存在观察周期短于人类慢性病程、仅使用单一品系雌鼠等局限性，但无疑为寄生虫感染研究提供了关键实验证据，并为该技术的进一步推广与其他动物模型乃至临床应用的探索奠定了基础。
