人参皂苷Rh1能够增强胃癌细胞对铜死亡（cuproptosis）的敏感性，并抑制其免疫逃逸机制

《Free Radical Biology and Medicine》：Ginsenoside Rh1 sensitizes gastric cancer to cuproptosis and represses immune evasion

人参皂苷Rh1通过诱导铜依赖性细胞死亡（cupoptosis）和抑制PD-L1表达及炎症因子释放，协同作用阻断胃癌细胞免疫逃逸并抑制增殖迁移，机制涉及ATP7A调控铜稳态。

　　

作者：Dan Zhao、Qiaojia Yuan、Honglei Wang、Hao Yang、Lin Yang

单位：四川省医学科学院与四川省人民医院肿瘤科，中国成都610072

摘要：

铜死亡（Cuproptosis）是一种由铜离子积累引发的新型细胞死亡方式，其作用机制受到越来越多的关注。越来越多的证据表明，铜死亡与肿瘤免疫密切相关。本研究的目的是探讨人参皂苷Rh1（Rh1）通过铜死亡和肿瘤免疫逃逸机制对人类胃癌（GC）的抗肿瘤效果及其潜在机制。在体外实验中，Rh1以浓度依赖性方式抑制了胃癌细胞的增殖和迁移。在铜死亡方面，Rh1促进了ellesclomol-Cu（ES-Cu）或双硫仑-Cu诱导的增殖抑制作用。此外，Rh1破坏了胃癌细胞的亚细胞结构并增加了活性氧水平，这一结果也得到了铜死亡抑制剂四硫钼酸盐（TTM）的验证。在肿瘤免疫逃逸方面，Rh1降低了PD-L1的表达并加速了细胞因子（IFN-γ、TNF-α）的产生，从而抑制了胃癌细胞的免疫逃逸。进一步研究表明，Rh1能够增强ES-Cu对胃癌细胞免疫逃逸的抑制作用，而TTM则逆转了这一效果。从机制上讲，ATP7A被证实是Rh1的作用靶点，Rh1通过与ATP7A的相互作用来改变铜依赖性的免疫逃逸过程。在体内实验中，Rh1被证实能够抑制肿瘤生长并增强浸润的CD8淋巴细胞的数量。总之，人参皂苷Rh1通过促进铜死亡和抑制肿瘤免疫逃逸发挥了抗肿瘤作用。

引言

胃癌（GC）是一种全球范围内发病率高且预后不良的恶性肿瘤[1]、[2]。大多数患者在晚期才被诊断出来，这大大增加了治疗的难度。近年来，胃癌的治疗手段发生了快速变化，免疫疗法、基于分子分型的精准治疗策略以及新药的研发成为核心进展[3]。例如，PD-1/PD-L1抑制剂与化疗联合使用，在局部晚期胃癌的围手术期治疗中显示出显著的生存获益[4]。分子分型对于预测对免疫疗法的反应也至关重要。此外，针对特定靶点（如HER2）以及抗体药物偶联物也展现出巨大的潜力，为胃癌的治疗提供了新的方向。

铜死亡是一种新发现的细胞死亡方式，当铜浓度超过毒性阈值时会发生。铜是生物体必需的微量元素，参与代谢和细胞生长过程。当铜直接与三羧酸循环结合时，会导致铁硫簇的丢失、蛋白质毒性应激，最终引发细胞死亡[6]。铜稳态的紊乱与多种肿瘤（如结直肠癌和妇科肿瘤）有关。临床上，肿瘤组织中铜水平的升高通常与肿瘤的分期相关。

人参皂苷Rh1是从人参中提取的主要生物活性化合物，近年来因其潜在的抗肿瘤特性而受到越来越多的关注[7]。越来越多的证据表明，Rh1通过多种机制抑制肿瘤生长，包括诱导细胞凋亡、抑制侵袭和转移以及调节免疫反应[8]。在动物模型（如宫颈癌U14）中，Rh1也表现出显著的抑制效果[9]、[10]。目前的研究正在将这些基础发现逐步转化为临床应用[11]。然而，仍需进一步研究以阐明其作用机制并推进临床应用。

本研究发现，人参皂苷Rh1通过降低ATP7A的表达来加速铜死亡，从而抑制铜依赖性的肿瘤免疫逃逸，这可能为胃癌的治疗提供一个新的治疗靶点。

试剂信息

试剂

人参皂苷Rh1（AmBeed，C₃₆H₆₂O₉，CAS：63223-86-9，分子量638.9 g/mol，纯度≥98%，产品编号A176502）；Elesclomol（产品编号HY-12040，MedChemExpress）；四硫钼酸盐（TTM，产品编号HY-128530）；CuCl2（产品编号C433487，Aladdin）；FDX1（产品编号12592-1-AP，ProteinTech，稀释比1:1000）；LIAS（产品编号11577-1-AP，ProteinTech，稀释比1:1000）。

细胞培养与处理

胃癌细胞（AGS，CVCL_0139；HGC27，RRID：CVCL_1279）和正常胃细胞（GES-1，人胃上皮细胞）由ATCC提供，并在RPMI-1640培养基中培养。

人参皂苷Rh1在体外抑制胃癌细胞的迁移和增殖

人参皂苷Rh1主要来源于人参，其在蒸制红参中的含量显著增加。这种富集过程是由于红参制备过程中的加热导致主要人参皂苷（如前体人参皂苷Rg1）的热降解。随着人参皂苷Rh1浓度的升高，胃癌细胞的存活率呈浓度依赖性下降（图1B、1C）。在细胞迁移实验中，

讨论

当前胃癌治疗的理论主要集中在精准靶向和免疫疗法组合上，包括免疫联合疗法（如CTLA-4和LAG-3抑制剂）[13]、[14]，以及新型细胞疗法（如TIL疗法和CAR-M疗法）[15]、[16]。这些疗法旨在重塑肿瘤微环境、开发针对新靶点的药物，并调整肠道微生物群[15]、[16]。 肿瘤免疫逃逸是胃癌进展和治疗抵抗的关键因素。

作者贡献声明

Hao Yang：数据验证、资金获取、数据分析、数据管理。 Lin Yang：数据验证、实验设计、资源协调、资金获取、数据分析、数据管理。 Qiaojia Yuan：数据验证、实验设计、软件应用、方法学研究、资金获取、数据分析、数据管理。 Honglei Wang：论文撰写与修订、初稿撰写、数据可视化、结果验证、实验监督、项目管理、方法学研究、数据管理。

伦理审批与参与同意

本研究已获得四川省人民医院伦理委员会的批准。

出版同意

不适用。

数据共享

本研究生成和/或分析的数据集可应要求向通讯作者索取。

利益冲突

所有作者声明无利益冲突。

资助信息

不适用。

利益冲突声明

我们声明不存在利益冲突。

致谢

不适用。