在103只食蟹猴和20只移植了人源肝细胞的转基因小鼠中，通过测量内源性或氘标记的皮质醇及其6β-羟基化代谢物的浓度，评估了体内细胞色素P450 3A依赖性表型的基线变异情况

《Drug Discovery Today》：Baseline variations in in vivo cytochrome P450 3A-dependent phenotypes evaluated using concentrations of endogenous or deuterium-labeled cortisol and their 6β-hydroxylated metabolites in 103 cynomolgus monkeys and 20 humanized-liver mice transplanted with hepatocytes

个体内源性皮质醇代谢酶活性存在显著差异，通过恒河猴和人类肝细胞移植小鼠的血浆检测，发现6β-羟皮质醇与皮质醇比值的中位数达1.4%，且代谢清除率在四组受试者间差异达2.6倍。研究提示现有药物相互作用预警标准可能需调整，因个体内代谢差异可能超出1.25-2倍阈值范围。

上原翔太郎|樋口雄一郎|福田崇|清水真希子|下井昭人|末水宏|山崎宏

日本神奈川县川崎市川崎区中央实验医学与生命科学研究所，邮编210-0821

摘要

药物暴露情况（以血浆浓度表示）可能受到个体内在药物代谢酶差异的影响，其程度与外源性药物相互作用的影响相当。然而，正常受试者中药物代谢酶活性的基线变异及其可接受范围仍不明确。为阐明这些基线变异，研究人员在103只食蟹猴和20只移植了人类肝细胞的免疫缺陷小鼠体内测定了细胞色素P450（P450）3A依赖性的内源性皮质醇和/或氘标记的皮质醇及其6β-羟基化代谢物的浓度，作为生物标志物。在猴子体内单次静脉注射皮质醇-d4（0.50 mg/kg）后，0.083小时时皮质醇-d4的平均最大血浆浓度为1020 ± 160 ng/mL（n = 3），与同一时间点的平均背景皮质醇水平相似，尽管背景水平在整个一天中基本保持恒定。通过对另外100只猴子的血浆样本进行分析，发现内源性6β-羟基皮质醇与皮质醇浓度的比值存在变异：中位数为1.4%（5%和95%分位数分别为0.82%和2.3%）。使用来自四个不同供体的肝细胞的人源化肝脏小鼠，皮质醇-d4的体内清除率最低值和最高值在四个组之间相差2.6倍。小鼠血浆样本中的内源性皮质醇水平低于检测限（< 1 ng/mL）。目前，当目标药物的清除率或代谢物/母体浓度比值增加1.25至2倍时，会触发药物相互作用警报；然而，评估时应考虑多种因素，而这些因素可能属于内在基线变异的范围内。

意义声明

100只食蟹猴的平均6β-羟基皮质醇血浆浓度为4.4 ng/mL（变异系数为36%）。人源化肝脏小鼠中皮质醇-d4的最低和最高清除率在四个肝细胞来源之间存在2.6倍的差异。这一较大的基线范围可为药物相互作用研究提供参考，而目前的警报阈值是血液浓度增加1.25倍。

部分内容摘录

1. 引言

许多电子药物说明书都包含了关于同时使用其他药物的警告。根据全球药品监管机构达成的药物相互作用指南（ICH M12），^1,2会导致药物相互作用的药物（通过抑制或诱导主要药物代谢酶P450（P450或CYP））会被列在说明书上。因此，建议谨慎对待P450抑制对人类血浆药物浓度的影响。

建议和

从食蟹猴和人源化肝脏小鼠中采集血浆样本

皮质醇-9,11,12,12-d4（cortisol-d4）由CDN Isotopes（加拿大安大略省沃恩）提供。本研究共使用了103只食蟹猴（71只雄性和32只雌性，来自柬埔寨，年龄1.7–2岁；由日本和歌山县的新日本生物医学实验室有限公司提供¹⁹），该研究已获得国际实验动物护理评估与认证协会的全面认可。研究内容已由新日本生物医学实验室的机构动物护理和使用委员会审查批准

猴子血浆中的皮质醇和6β-羟基皮质醇水平

在给三只雄性食蟹猴单次静脉注射0.50 mg/kg皮质醇-d4后，研究了皮质醇-d4及其6β-羟基化代谢物的体内药代动力学（图1）。注射后0.083小时时，皮质醇-d4的平均血浆浓度为1020 ± 160 ng/mL（n = 3），与平均背景皮质醇水平（1080 ± 170 ng/mL，n = 3）相似。随后，这些猴子体内的皮质醇-d4被生物转化为6β-羟基皮质醇-d4。

4. 讨论

此前已有研究提出使用人类尿液样本中的内源性类固醇代谢物浓度来检测P450 3A酶的诱导作用。此外，还密切研究了猴子或人类血浆样本中的内源性P450 3A依赖性生物标志物，如4β-羟基胆固醇^23,24和6β-羟基皮质醇¹²。在我们的初步研究中，测定了几只猴子血浆中的4β-羟基胆固醇和胆固醇浓度；

利益冲突声明

作者们没有需要声明的利益冲突。

数据可用性

作者声明本文包含支持本研究结果的所有数据。

作者贡献声明

上原翔太郎：撰写 – 审稿与编辑、初稿撰写、数据整理、概念构思。樋口雄一郎：实验研究。福田崇：实验研究。清水真希子：实验研究、数据整理。下井昭人：资源获取、资金筹集。末水宏：撰写 – 审稿与编辑、资源获取、项目管理、资金筹集、概念构思。山崎宏：撰写 – 审稿与编辑、初稿撰写、数据整理、

作者贡献声明

上原翔太郎：概念构思、数据整理、实验研究、数据整理、初稿撰写、审稿与编辑。樋口雄一郎：实验研究。福田崇：实验研究。清水真希子：数据整理、实验研究。下井昭人：资金筹集、资源获取。末水宏：概念构思、资金筹集、项目管理、资源获取、审稿与编辑。山崎宏：概念构思、数据整理、资金筹集、项目管理

致谢

我们感谢辻崎秀士博士、米田直博士、足立康一郎博士和村山纪枝博士的帮助。同时，我们也感谢David Smallbones对手稿草稿的校对工作。

财务支持

本研究部分得到了日本医学研究开发机构（AMED）（项目编号26mk0121322h0102）和日本学术振兴会（科研资助项目编号23K06217）的支持。