《Journal of Endocrinology》：TFF3 in renal pathobiology: a novel lipotoxicity regulator in male mice with diabetic kidney disease
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为解决糖尿病肾病（DKD）中肾脂毒性机制不清的问题，研究者利用Tff3-/-小鼠及高脂饮食联合STZ诱导的DKD模型，发现TFF3缺失特异性扰乱肾脏脂质代谢，通过抑制AMPK/ACC磷酸化、激活SCAP/SREBP通路加剧肾脂质沉积与损伤，为DKD治疗提供了新靶点。
糖尿病肾病（Diabetic Kidney Disease, DKD）作为糖尿病最常见且严重的微血管并发症之一，一直是临床与基础研究领域的重大挑战。据统计，约40%的糖尿病患者最终会进展为DKD，并成为终末期肾病（End-Stage Renal Disease, ESRD）的主要原因。在DKD复杂的致病机制中，肾脏脂毒性（Lipotoxicity）正逐渐被认为是驱动疾病进展的核心因素之一。当肾脏细胞内脂质摄取、合成与氧化代谢失衡时，过量的脂质蓄积会诱导炎症反应、氧化应激，甚至导致细胞死亡，从而加速肾损伤。然而，调控这一病理过程的关键分子机制尚未完全阐明。
三叶因子3（Trefoil Factor 3, TFF3）是一种主要由肾脏小管上皮细胞等分泌的小分子多肽，既往研究提示其可能介导了糖尿病状态下的“肠-肾对话”，但其在肾脏脂质代谢中的具体角色一直是未解之谜。近期，发表在《Journal of Endocrinology》上的一项研究利用雄性Tff3基因敲除（Tff3-/-）小鼠，深入揭示了TFF3在DKD肾脂毒性中的全新调控作用，指出TFF3缺失会通过AMPK/ACC和SCAP/SREBP信号通路加速肾脏脂质沉积与病理损伤，为理解DKD的发病机制及寻找新的治疗靶点提供了重要视角。
为了探究TFF3在DKD肾脂毒性中的作用，研究人员开展了以下主要关键技术方法：使用基于C57BL/6J遗传背景的雄性Tff3-/-小鼠及野生型（WT）同窝对照，通过高脂饮食（HFD）联合链脲佐菌素（STZ）注射建立DKD模型，并将小鼠分为WT、WT-Tff3-/-、Mod-WT（DKD模型）和Mod-Tff3-/-四组；通过生化检测试剂盒测定血清及肾脏的糖脂代谢与肾功能参数（如TC、TG、LDL-c、HDL-c、UACR、BUN等），利用口服糖耐量试验（OGTT）和胰岛素耐量试验（ITT）评估糖代谢；采用H&E染色和Oil Red O染色进行肾脏病理与脂质沉积观察；最后通过Western blot定量分析肾脏组织中AMPK/ACC和SCAP/SREBP信号通路相关蛋白的表达变化。
Tff3-/-加重DKD小鼠的脂质代谢失调
实验流程显示，Tff3基因敲除通过PCR和Western blot得到了确认。在正常饮食条件下，Tff3-/-小鼠的生长参数（如摄食、饮水、体重）及基础生理指标与野生型无显著差异。然而，在DKD病理条件下（Mod-Tff3-/-组），虽然空腹血糖（FBG）、OGTT曲线下面积（AUC）和ITT AUC这些糖代谢指标未受Tff3缺失的显著影响，但血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）和低密度脂蛋白胆固醇（LDL-c）水平却较Mod-WT组显著升高，而高密度脂蛋白胆固醇（HDL-c）无变化。这表明TFF3缺失主要在疾病状态下扰乱脂质代谢，而对基础糖代谢影响甚微。
Tff3-/-促进DKD小鼠的肾脏病理损伤
通过H&E染色评估肾脏病理改变发现，Mod-Tff3-/-组小鼠表现出更严重的肾小球肥大和肾损伤，其系膜基质指数（mesangial index）显著升高。在肾功能指标方面，Mod-Tff3-/-组的尿白蛋白肌酐比值（UACR）和血尿素氮（BUN）较Mod-WT组显著上升，即便是非糖尿病的WT-Tff3-/-组，BUN水平也显著高于WT组。这提示TFF3对于维持肾脏生理及病理状态下的结构与功能具有保护作用。
Tff3-/-增加DKD小鼠的肾脏脂质沉积
利用Oil Red O染色评估肾脏脂质蓄积情况，结果显示，尽管正常对照组脂质沉积很少，但DKD模型组均出现显著沉积，且Mod-Tff3-/-组的脂质阳性面积显著大于Mod-WT组。生化定量进一步证实，Mod-Tff3-/-小鼠肾脏TC水平显著升高，而肾脏TG水平虽有所上升但无统计学差异。这说明TFF3敲除会特异性加重DKD时的肾脏胆固醇类脂质沉积。
Tff3-/-刺激DKD小鼠体内的AMPK/ACC和SCAP/SREBP信号通路
为进一步阐明分子机制，研究检测了脂质代谢核心通路蛋白。结果发现，与对照组相比，DKD模型组肾脏中磷酸化AMPK/AMPK（p-AMPK/AMPK）和磷酸化ACC/ACC（p-ACC/ACC）的比值均显著降低，而SCAP和SREBP-1蛋白表达显著升高。重要的是，Tff3缺失（Mod-Tff3-/-）进一步降低了p-AMPK/AMPK和p-ACC/ACC的比值，并进一步上调了SCAP和SREBP-1的表达。这意味着TFF3缺失通过抑制AMPK活性（减少其下游ACC的磷酸化）以及激活SCAP/SREBP通路，共同驱动了DKD肾脏的脂质合成与沉积。
综上所述，该研究明确了TFF3在糖尿病肾病中的肾脏保护效应，特别是在抵抗肾脂毒性方面的关键地位。研究发现，TFF3的缺失并不会影响基础状态下的糖代谢，但在DKD进程中，它会特异性地导致肾脏脂质代谢失调，加速胆固醇等脂质在肾组织的沉积，从而加重肾小球肥大、尿蛋白排泄及肾功能减退。其潜在机制主要依赖于TFF3对AMPK/ACC磷酸化级联反应的维持，以及对SCAP/SREBP脂质合成通路的抑制。当TFF3缺失时，AMPK活性下降（p-AMPK减少），其对ACC的抑制减弱，同时SCAP/SREBP通路异常激活，最终促进了肾脏的脂质合成与蓄积。
这一成果不仅填补了TFF3在DKD肾脂毒性和“肠-肾轴”交互中的机制空白，也强调了在未来实验中需考虑性别差异（本研究仅用雄性小鼠）及开展肾脏特异性Tff3敲除、体外细胞实验（如肾小管上皮细胞）的必要性。总体而言，TFF3有望成为干预糖尿病肾病进展、缓解肾脏脂毒性损伤的潜在新型治疗靶点，为后续的药物开发和临床转化提供了全新的分子视角与理论基础。
