直接靶向MMP9以抑制血管生成并增加CD8+ T细胞浸润的青蒿琥酯能够抑制肝细胞癌的发展

《Cancer Cell International》：Artesunate directly targeting MMP9 to reduce angiogenesis and increase CD8?+?T cell infiltration inhibits hepatocellular carcinoma

　　

摘要

背景

青蒿琥酯（ART）是青蒿素的半合成衍生物之一。目前它主要在临床上用于治疗脑型疟疾和各种重症疟疾。最近的研究表明，它具有广泛的抗肿瘤作用。然而，其对肝细胞癌（HCC）的治疗效果及其具体机制仍不清楚。

目的

本研究旨在探讨ART对HCC的治疗效果并阐明其分子机制。

方法

本研究通过体内和体外实验探讨了ART对HCC的抑制作用。细胞实验使用CCK-8、Annexin/PI染色、伤口愈合和免疫荧光技术评估了ART对HCC细胞系（HepG2、H22、Hepa1-6）的影响。在体内实验中，ART在HepG2异种移植瘤和H-ras12V转基因小鼠中进行了测试，肿瘤生长情况通过多普勒超声进行监测。多组学技术（转录组学、网络药理学、单细胞测序）确定MMP9为关键靶点。通过分子对接/动力学、热位移测定和Western blot分析探讨了相关机制。流式细胞术和免疫荧光证实了CD8? T细胞的浸润。

结果

ART抑制了HCC细胞系的增殖并促进了其凋亡。体内实验表明，它对免疫缺陷小鼠移植的肿瘤有一定抑制作用。通过多普勒超声持续监测肿瘤生长发现，在免疫功能正常的自发H-ras12V肝癌模型中，其效果更为明显，尤其是在小肿瘤的发展方面。从机制上讲，ART通过抑制经典的PI3K-AKT信号通路来抑制肿瘤生长，这一结果与其他肿瘤研究一致。同时，ART可以直接靶向MMP9并促进其降解，从而抑制肿瘤的血管生成。为了解释其在免疫功能正常小鼠中效果更显著的原因，我们发现ART可以显著增加CD8? T细胞对肿瘤的浸润，其效果也是通过降解MMP9实现的。

结论

我们的研究结果表明，ART通过靶向MMP9抑制血管生成并增强CD8? T细胞浸润，从而抑制HCC的肿瘤发生和进展。本研究为ART在HCC治疗中的潜在临床应用提供了机制基础，并确定MMP9为一个有前景的治疗靶点。