木霉菌（Trichoderma spp.）孢子悬浮液对侵染棉花的红蜘蛛（螨类：Tetranychidae）的防治效果

《Experimental and Applied Acarology》：Efficacy of Trichoderma spp. spore suspensions against cotton-infesting spider mites (Acari: Tetranychidae)

　　摘要
红蜘蛛螨，特别是Tetranychus urticae Koch和T. turkestani Ugarov and Nikolskii（蜱螨目：叶螨科），是主要的农业害虫，它们对化学杀螨剂的抗性不断增加，这凸显了需要替代控制策略的必要性。本研究探讨了Trichoderma属真菌对这些螨虫的生物控制潜力。具体来说，我们评估了（1）四种Trichoderma物种（Trichoderma afroharzianum、T. guizhouense、T. harzianum和T. virens）的五个分离株的孢子悬浮液及其组合对T. urticae不同生长阶段的有效性；（2）T. afroharzianum孢子悬浮液对T. urticae不同种群（绿色和红色形态）和T. turkestani在培养皿和盆栽实验中的有效性。结果表明，Trichoderma孢子悬浮液对T. urticae的卵无效，应用7天后的死亡率≤2.8%，与对照组无显著差异。然而，与对照组相比，这些真菌在螨虫的移动阶段（幼虫、若虫和成年雌虫）引起了50-65%的显著死亡率。基于初步筛选结果，选择了一种Trichoderma分离株（T. afroharzianum）对多个红蜘蛛螨种群进行详细评估。培养皿实验在7天后显示，T. afroharzianum对T. turkestani（高达60%）和T. urticae的绿色形态（53%）的有效性高于对T. urticae的红色形态（35%）。盆栽实验证实了这些结果，显示T. afroharzianum使T. turkestani和T. urticae（绿色形态和实验室培养种群）的卵和移动阶段种群减少了36-39%，而对T. urticae的红色形态的减少则没有统计学意义。这些发现表明T. afroharzianum具有作为生物控制剂的潜力；然而，其有效性在不同红蜘蛛螨种群中存在差异，这突显了需要将其与其他生物或化学策略结合使用的必要性。

引言
棉花（Gossypium hirsutum L.）是全球重要的纤维作物，是纺织和服装工业的基本原材料，也是棉籽油的来源。这种油不仅广泛应用于食品工业，还作为生物柴油生产的可再生原料，从而减少了对化石燃料的依赖及其相关的环境影响。因此，棉花不仅在纺织领域发挥着关键作用，也在能源农业中占据重要地位（Basal等人，2019年）。
全球范围内，棉花种植广泛分布，亚洲占据世界棉花产量的大约63%，其次是美洲（20%）和非洲（14%）。少数几个国家主导了市场，印度、中国、美国、巴西、巴基斯坦、土耳其和乌兹别克斯坦合计生产了全球84%的棉花。土耳其在总产量和进口量方面均排名第十一位（?züdo?ru，2021年）。在该国，爱琴海地区，特别是Aydin、?zmir和Denizli省，占全国棉花产量的近30%（Günaydin等人，2019年）。
尽管棉花具有经济重要性，但其生产受到各种生物因素的严重威胁，如疾病、杂草，特别是在Aydin省，还有红蜘蛛螨。这些害虫主要是Tetranychus urticae（红色和绿色形态）和Tetranychus turkestani（蜱螨目：叶螨科），它们会在棉花叶子的背面定居，导致叶斑形成，进而引起叶片变红、干燥并最终脱落。在结铃前受到侵害会延迟作物生长，而在结铃后的攻击会导致花蕾、花朵和棉铃的脱落，显著降低产量（Sulek和Cakmak，2022年；Sulek等人，2023年；Yüksel等人，2024年）。红蜘蛛螨还会产生密集的网状物，有助于其在空气中的传播和快速扩散。目前的控制方法主要依赖于化学杀螨剂；然而，频繁使用这些杀螨剂导致了环境问题，并引发了广泛的抗性。例如，Duran等人（2024年）报告称，Aydin地区的T. urticae红色形态种群对常见的杀螨剂表现出高度抗性，包括spiromesifen（982-1246倍）、etoxazole（410-517倍）、abamectin（187-224倍）和hexythiazox（156-168倍）。相比之下，T. turkestani种群大多仍敏感，尽管对hexythiazox有一定抗性（164-182倍）。这种高抗性与螨虫的快速繁殖一起，凸显了迫切需要替代控制策略的必要性。
生物控制为害虫控制提供了最有希望的替代方案。捕食性螨虫Phytoseiulus persimilis、Neoseiulus californicus和Amblyseius swirskii（蜱螨目：Phytoseiidae）在温室中广泛用于防治红蜘蛛螨（Cakmak等人，2005年，2009年；Yal??n等人，2023年），其在露天作物中的使用也在增加。此外，昆虫病原真菌（Beauveria、Metarhizium、Lecanicillium）以及细菌次级代谢产物（Xenorhabdus和Photorhabdus）也被证明对抑制红蜘蛛螨有效（Dogan等人，2017年；Eroglu等人，2019年；Cevizci等人，2020年；Incedayi等人，2021年）。
最近的研究扩展了Trichoderma属真菌（Hypocreaceae：子囊菌门）的作用，传统上这类真菌被认为是菌寄生菌和促进植物生长的真菌，现在发现它们还具有杀螨活性。多项研究表明，将T. urticae的不同发育阶段暴露于Trichoderma孢子悬浮液或代谢产物中会导致显著死亡率（Afifi等人，2007年；Sholla和Kottb，2017年；Elhakim等人，2020年；Meteab等人，2022年；Awad和Hendawy，2023年；?obano?lu等人，2024年；Evren等人，2025年）。据报道的效果各不相同，根据具体的Trichoderma物种、配方、温度和螨虫生命阶段，死亡率可达到25%到超过80%。这些发现表明Trichoderma属真菌可以作为棉花农业生态系统中防治红蜘蛛螨的有希望的生物控制剂。
本研究调查了从Aydin省土壤中获得的四种本地Trichoderma物种（T. afroharzianum、T. guizhouense、T. harzianum和T. virens）的五个分离株的孢子悬浮液对棉花红蜘蛛螨的有效性。主要目标是：（i）评估不同Trichoderma物种的孢子悬浮液单独或组合使用对T. urticae不同发育阶段的影响；（ii）在培养皿和盆栽实验中评估T. afroharzianum孢子悬浮液对T. urticae不同种群（绿色和红色形态）和T. turkestani的有效性。

材料与方法
**植物培养**
为了维持单独饲养的Tetranychus urticae（绿色和红色形态）和T. turkestani种群以及用于实验研究，种植了Phaseolus vulgaris var. barbunia豆类植物。种子播种在直径15厘米的塑料盆中，盆内填充了3:1比例的泥炭和珍珠岩混合物。定期用自来水灌溉植物。植物在控制环境的气候室中生长，温度保持在25±1°C，相对湿度为60±10%，光照周期为16:8小时。在植物培养期间未施用肥料。

**Tetranychus urticae和Tetranychus turkestani的收集、鉴定和饲养**
2023年7月至8月期间，在Aydin省的Germencik、Kocarli、Nazilli和Soke等棉花种植区收集了Tetranychus urticae（绿色和红色形态）和T. turkestani种群。从田间直接采集表现出典型红蜘蛛螨症状（叶斑、叶片青铜化或网状物）的棉花叶片。样本被放入密封的纸袋中，然后放入塑料拉链袋中以减少水分损失，并立即转移到Aydin Adnan Menderes大学的蜱螨学实验室。样本在+4°C下储存直至检查。

**实验室检查和鉴定**
在立体显微镜（Leica EZ4，Leica Microsystems GmbH，Wetzlar，德国）下检查叶片，并使用形态学和分子技术鉴定螨虫。

**形态学鉴定**
为了进行分类确认，从每个田间种群中制备了至少10张永久切片，包括雄性和雌性。标本固定在Hoyer培养基中（雌性背部朝上，雄性腹面朝上），并在Memmert UN110干燥箱（Memmert GmbH & Co. KG，Schwabach，德国）中以50°C的温度下干燥5天。使用标准分类钥匙在光学显微镜（Zeiss Axio Imager A2，Carl Zeiss，德国）下进行鉴定，主要依据雄性的阳具形状以及雌性的背部、腹部和腿毛模式，这些是区分Tetranychus物种的关键特征（Pritchard和Baker，1955年；Seeman和Beard，2011年；Yüksel等人，2024年）。

**分子鉴定**
为了基于DNA进行确认，将每个种群的一个成年雌性单独放入无菌1.5毫升离心管中，并在立体显微镜下操作。按照Yüksel等人（2024年）的协议进行DNA提取和物种鉴定，使用内部转录间隔区（ITS）和细胞色素氧化酶I线粒体基因（COI）区域进行物种级区分。

**建立实验室菌株**
共获得了九个种群，包括三个T. urticae绿色种群、三个T. urticae红色种群和三个T. turkestani种群（表1）。这些种群同时在两种格式中饲养：培养皿和容器。在培养皿中，大培养皿（直径15厘米）内铺有湿润的棉絮以保持叶片的紧实度。将一片分离的豆叶（背面朝上）放在棉絮上，并用细刷子转移每个种群的一个交配雌性。每个种群至少准备两个培养皿，并放置在装有水的托盘（6.5升）中，托盘边缘涂有凡士林以防止螨虫逃逸和交叉污染。当叶片老化时更换叶片，每周湿润培养皿三次。对于容器培养，每个种群都保持在尺寸为22.5×33.5×30.5厘米的容器中，容器有通风孔。在容器内放置一株盆栽豆类植物，并用细刷子将螨虫从培养皿培养物中转移过来。所有种群都保存在温度控制在25±1°C、相对湿度为60±10%、光照周期为16:8小时的气候控制室内。

**表1** 从土耳其Aydin省棉花田中收集的Tetranychus urticae（绿色和红色形态）和T. turkestani种群的来源

**真菌分离株和Trichoderma孢子悬浮液的制备**
本研究使用了之前研究（Korkom，2022年）从Aydin不同田间土壤中获得的五种Trichoderma分离株，并通过分子方法进行了鉴定：T. afroharzianum Tr132（GenBank: OP847792.1）、T. guizhouense Tr49（GenBank: OP703665.1）、T. guizhouense Tr118（GenBank: OP703666.1）、T. harzianum Tr124（GenBank: OP825136.1）和T. virens Tvr2（GenBank: MZ853844.1）。这些真菌分离株在GenBank中的登录号为相应的 accession numbers。这些真菌分离株在25°C下，在12小时光照/12小时黑暗的培养条件下，在土豆葡萄糖琼脂（PDA）上培养7天（Memmert IF55，德国）。为了制备孢子悬浮液，在培养物表面加入0.05%（v/v）的Tween 20无菌蒸馏水。使用无菌玻璃棒敲落孢子，涡旋均匀后通过四层无菌纱布过滤以去除菌丝碎片（Al-Hazmi和TariqJaveed，2016年；Korkom，2022年）。使用血细胞计数器在光学显微镜（Olympus CX21，日本）下测定孢子浓度，并调整至每个分离株1×10^8个孢子/毫升。

**Trichoderma孢子悬浮液对Tetranychus urticae不同发育阶段的影响**
使用了实验室维持的T. urticae（绿色形态）培养种群（最初于2017年从Germencik棉花田收集），并按照上述方法进行饲养。为了确保发育阶段的同步性，所有发育阶段的样本均来自同步化的群体：这些群体是通过让成年雌性螨虫在豆叶上产卵24小时后建立的，之后将成年螨虫移除。在此期间产下的卵在受控条件下发育，每个发育阶段（卵、幼虫、前若虫、后若虫和成年雌性）都使用相同龄期的个体。随后评估了不同发育阶段对Trichoderma菌株的敏感性。使用直径为9厘米的培养皿，内衬用蒸馏水湿润的棉絮，并将一片直径为5.5厘米的豆叶背面朝上放置在棉絮上。在立体显微镜下，用细尖刷子将每个阶段的20个个体转移到每片叶子上。处理方法包括五种菌株（Trichoderma afroharzianum Tr132、T. guizhouense Tr49、T. guizhouense Tr118、T. harzianum Tr124和T. virens Tvr2）及其组合，通过将相应菌株的孢子悬浮液以1:1（体积比）混合制备（Trichoderma guizhouense Tr49 + Tr118；T. guizhouense Tr118 + T. harzianum；T. afroharzianum + T. harzianum；T. virens + T. harzianum；T. afroharzianum + T. virens），共计10种处理方式。孢子悬浮液通过定制的喷雾塔（Burkard Manufacturing，英国）在1个大气压下喷洒，每片培养皿喷洒2毫升。对照组则喷洒含有0.05%（体积比）Tween 20的无菌蒸馏水。在处理后第5天和第7天（dpa）在立体显微镜下记录死亡率；选择这些时间点是基于先前的研究（Dogan等人2017年；Evren等人2025年），以捕捉早期和中期的死亡率反应。卵的存活情况根据卵壳状况进行评估：非存活的卵表现出皱缩的卵壳且没有幼虫出现，而存活的卵则显示有幼虫出现或卵壳上有可见的出口孔。对于活动性阶段，如果个体对细尖刷子的轻轻触碰没有反应，则视为死亡。每种处理的死亡螨虫被单独收集。死亡螨虫的尸体被放置在含有Trichoderma选择性培养基的培养皿中，并加入氯霉素以确认螨虫体内存在Trichoderma（Rodríguez-González等人2022年）。每个生物阶段进行五次重复实验，整个实验重复四次。研究在温度为25±1°C、相对湿度为60±10%、光照时间为16小时的气候室中进行。

**Trichoderma afroharzianum孢子悬浮液对不同蜘蛛螨物种和种群的影响**

**培养皿实验**
从之前的实验（Trichoderma孢子悬浮液对T. urticae不同生物阶段的影响）中选出的Trichoderma afroharzianum Tr132作为代表菌株，进一步测试了来自Germencik、Kocarli、Nazilli和Soke地区的棉花田中的T. urticae（绿色和红色形态）和T. turkestani的九个种群（每个物种或形态三个种群）。实验设置与第一次实验相同，只是测试对象为成年雌性螨虫。实验中使用的成年雌性螨虫来自年龄均匀的同步化实验室培养物。每种处理包括将20只成年雌性螨虫转移到豆叶上，并用喷雾塔（1个大气压）喷洒2毫升Trichoderma afroharzianum孢子悬浮液。对照组用含有0.05%（体积比）Tween 20的无菌蒸馏水处理。在处理后第5天和第7天记录死亡率。对于用细尖刷子轻轻触碰后没有反应的个体，被归类为死亡。每种处理每个种群进行五次重复实验，在温度为25±1°C、相对湿度为60±10%、光照时间为16小时的气候室中进行。

**盆栽实验**
还在盆栽实验中测试了Trichoderma afroharzianum孢子悬浮液对T. urticae（绿色和红色形态）和T. turkestani四个种群的影响。豆苗在7×5厘米的盆中生长至两片子叶阶段。为了标准化植株大小，移除一片子叶，每盆留下一片叶子（Incedayi等人2021年；Evren等人2025年）。对于每个蜘蛛螨种群，在立体显微镜下使用细刷子将总共60个个体（每个阶段10个：卵、幼虫、前若虫、后若虫、成年雌性和雄性）转移到植株上。盆栽实验中使用的所有发育阶段都来自同步化的实验室饲养的群体，以确保年龄结构均匀。然后使用手动喷雾器在叶片两面喷洒5毫升Trichoderma afroharzianum悬浮液。对照组植株喷洒相同体积的含有0.05%（体积比）Tween 20的无菌蒸馏水。处理后七天，移除叶片，并在立体显微镜下分别统计上下叶片表面的所有存活螨虫的数量。每种处理进行五次重复实验，在温度为25±1°C、相对湿度为60±10%、光照时间为16小时的气候室中进行。

**统计分析**
第一次实验的数据使用广义线性模型（GLM）进行分析，均值比较采用Tukey’s HSD检验。在第二次实验中，使用Abbott公式（Abbott 1925）校正培养皿中的死亡率数据，然后再进行GLM和Tukey分析。盆栽实验的数据使用Student’s t检验来比较每种处理和对照组。在分析之前，所有实验的死亡率数据都经过反正弦变换以标准化方差。统计分析使用SPSS 29版本（SPSS 2023）进行。

**结果**
Trichoderma孢子悬浮液对Tetranychus urticae不同生物阶段的影响**
从放置在选择性培养基上的螨虫尸体中成功重新分离出Trichoderma spp.，证实了处理过的个体受到真菌感染。Trichoderma孢子悬浮液单独使用或组合使用对Tetranychus urticae卵均无效。到处理后第7天，死亡率仅为1.5–2.8%。在处理后第7天，Trichoderma处理组与对照组之间没有显著统计学差异（F = 0.824，df = 10，P > 0.05）。数据未在图中显示。

在所有活动性阶段（幼虫、前若虫、后若虫和成年雌性）均观察到显著死亡率，死亡率随时间增加并在第7天达到峰值。在处理后第5天和第7天，幼虫的死亡率为35.3%至44.5%和53.8–65.3%，前若虫的死亡率为35.0–39.8%和51.3–57.5%，后若虫的死亡率为35.8–39.5%和50.5–56.0%，成年雌性的死亡率为35.8–41.8%和57.3–61.5%。在处理后第5天（F = 29.281；前若虫：F = 9.085；后若虫：F = 9.554；成年雌性：F = 13.671；df = 10，P < 0.001）和第7天（F = 35.639；前若虫：F = 17.070；后若虫：F = 20.548；成年雌性：F = 19.896；df = 10，P < 0.001）时，Trichoderma处理组与对照组之间存在显著差异。然而，在Trichoderma物种之间没有显著差异（P > 0.05；图1A、B、C和D）。

**图1**
该图像的替代文本可能是使用AI生成的。

**培养皿实验中不同生物阶段的Tetranychus urticae（培养种群）在处理后第5天和第7天的死亡率（%）及其Trichoderma物种组合。**(A) 幼虫，(B) 前若虫，(C) 后若虫，(D) 成年雌性。T1 = T. guizhouense Tr49，T2 = T. guizhouense Tr118，T3 = T. harzianum，T4 = T. afroharzianum，T5 = T. virens。条形图上不同的字母表示处理组之间存在显著差异。数据以均值±标准误差表示。**

**Trichoderma afroharzianum孢子悬浮液对不同蜘蛛螨物种和种群的影响**
Trichoderma afroharzianum孢子在处理后第5天和第7天的处理导致Tetranychus turkestani成年雌性的死亡率最高（40.5–42.5%和58.3–60.3%）以及T. urticae绿色形态的死亡率最高（34.8–36.8%和51.5–53.0%），而T. urticae红色形态的死亡率显著较低（23.3–24.3%和33.5–35.3%）（处理后第5天：F = 5.119；第7天：F = 7.846；df = 8，P < 0.001；图2A、B）。在不同蜘蛛螨物种或形态的种群之间，死亡率没有统计学差异（P > 0.05）。

**盆栽实验**
处理后第7天，Trichoderma afroharzianum孢液对Tetranychus turkestani成年雌性的死亡率为40.5–42.5%和58.3–60.3%，T. urticae绿色形态的死亡率为34.8–36.8%和51.5–53.0%，而T. urticae红色形态的死亡率较低（23.3–24.3%和33.5–35.3%）（处理后第5天：F = 5.119；第7天：F = 7.846；df = 8，P < 0.001；图2A、B）。对照组在处理后第7天的死亡率在各个物种和种群之间没有显著差异（P > 0.05）。

**表2**
处理后第7天，T. afroharzianum处理的T. turkestani和T. urticae（绿色和红色形态）成年雌性的死亡率（%）。**(A) 处理后第5天（dpa），(B) 处理后第7天。条形图上不同的字母表示处理组之间存在显著差异。数据以均值±标准误差表示。G1–G3：T. urticae绿色形态；R1–R3：T. urticae红色形态；1–3：T. turkestani种群（种群详情见表1）**

**讨论**
本研究评估了四种Trichoderma物种的孢子悬浮液对与棉花相关的T. urticae（绿色和红色形态）和T. turkestani种群的杀螨效果。结果表明，Trichoderma孢子对螨虫卵无效——这一结果与先前的研究一致，这些研究报告称螨虫卵的抵抗力高于活动性阶段（Chandler等人2005年；Bugeme等人2009年）。然而，在所有Trichoderma处理中，幼虫、若虫和成年雌性阶段都记录到了显著的死亡率。效果在不同螨虫物种和种群之间差异很大；特别是T. urticae的红色形态在培养皿和盆栽实验中表现出较低的敏感性。

孢子悬浮液对卵无效的原因有几个。主要原因是卵壳作为坚固的物理屏障，限制了真菌的附着、萌发和渗透（Dogan等人2017年）。此外，卵缺乏呼吸开口和血腔——真菌细胞在活动性阶段繁殖的地方——以及缺乏进食活动，这意味着卵没有适合真菌感染的途径或环境（Afifi等人2007年；Zhang等人2014年）。相比之下，报告具有显著杀卵活性的研究通常使用了真菌滤液或代谢物（Meteab等人2022年；Evren等人2025年）。这表明粗代谢物制剂含有可以渗透到卵中或干扰胚胎发育的化合物，强调了探索结合孢子与次级代谢物或助剂的配方以增强杀卵潜力的必要性。

与卵不同，活动性阶段表现出高敏感性，处理后第7天的死亡率达到了50–65%。这些结果与先前的研究一致，这些研究记录了Trichoderma孢子悬浮液对成年和未成熟螨虫的类似或更高死亡率（例如，T. harzianum为62–64%，T. album为86%，T. longibrachiatum甚至高达约88%）（Afifi等人2007年；Elhakim等人2020年；Awad和Hendawy 2023年；?obano?lu等人2024年）。使用Trichoderma afroharzianum和T. virens的代谢物（如6-戊基-α-吡酮）和粗滤液也获得了类似的结果（Sholla和Kottb 2017年；Meteab等人2022年；Evren等人2025年）。这些发现证实Trichoderma spp.对活动性阶段的效果最好，可能是通过表皮穿透、酶降解和有毒代谢物的共同作用（Hermosa等人2014年；Zeilinger等人2016年）。

测试的Trichoderma菌株对蜘蛛螨的影响存在差异，且在物种或它们的组合之间没有检测到显著差异，表明缺乏协同作用。之前也有报道Trichoderma物种和菌株之间的杀螨活性存在类似变异性（Afifi等人2007年；Sholla和Kottb 2017年；Meteab等人2022年；Awad和Hendawy 2023年；Evren等人2025年）。组合菌株之间缺乏协同作用可能归因于潜在的拮抗或竞争作用，这可能限制了生物活性代谢物的产生或活性。这种变异性突显了菌株特异性特征（包括代谢物谱、酶活性和孢子疏水性）对总体致病性的关键重要性（Vinale等人2009年）。此外，观察到的中等疗效，尤其是对于T. afroharzianum而言，表明其作用机制可能是多因素的，涉及酶促降解（例如几丁质酶和蛋白酶）、次生代谢产物以及与螨虫表皮的相互作用，而不是通过快速产生急性毒性来发挥作用。不同蜘蛛螨物种和种群之间的敏感性差异尤为显著。在培养皿实验中，T. afroharzianum对T. turkestani的致死率较高（高达60%），对T. urticae的绿色型也有53%的致死效果，但对红色型的致死率显著较低（35%）。这种种群间的差异可能与生理或生化特性有关，如表皮厚度、解毒酶以及抗性相关，这些特性可能通过干扰真菌的侵入或代谢活性来降低对真菌感染的敏感性（Zhang等人，2022年；Barnes等人，2024年）。因此，在制定生物防治策略时必须考虑特定种群的响应。本研究的盆栽实验不仅验证了实验室结果，还突显了在更现实条件下实现高控制水平的挑战。虽然T. afroharzianum使T. turkestani和T. urticae的绿色型的卵数及活动阶段数量减少了35-39%，但其对红色型种群的影响可以忽略不计。这些数值仍低于通常单独用于田间控制所需的疗效。其他昆虫病原体也表现出类似的趋势：Bugeme等人（2009年）观察到在温度波动的情况下，Metarhizium anisopliae对T. urticae的毒力降低，而Dogan等人（2017年）强调需要将真菌病原体与捕食性螨虫结合使用以实现可持续的抑制效果。因此，尽管T. afroharzianum显示出潜力，但其中等疗效表明最好将其纳入综合害虫管理（IPM）框架中。总体而言，本研究的结果与越来越多的文献一致，这些文献支持Trichoderma属真菌作为双重用途生物的作用：既能促进植物生长，又能抑制害虫（Zin和Badaluddin，2020年；Poveda，2021年；Yao等人，2023年）。然而，正如Pozo等人（2024年）所指出的，它们作为生物防治剂的效果可能因物种、环境和目标害虫而异。我们的发现表明，单独使用T. afroharzianum的孢子悬浮液不太可能可靠地抑制棉花中的蜘蛛螨，尤其是对具有抗性的T. urticae红色型种群。因此，将Trichoderma与其他生物防治剂（例如捕食性螨虫如Phytoseiulus persimilis或Neoseiulus californicus）和选择性杀螨剂结合使用可能是一种更有效的策略（Cakmak等人，2005年，2009年；Tanaka等人，2023年）。总之，本研究表明，在受控条件下，Trichoderma孢子悬浮液，特别是T. afroharzianum的孢子悬浮液，对蜘蛛螨的活动阶段具有中等但显著的杀螨效果。缺乏卵杀活性以及对抗性红色型种群疗效降低的特点凸显了单独使用Trichoderma的局限性。尽管如此，将其纳入IPM计划可能有助于减少对杀螨剂的依赖并管理抗性，尽管其效果仍需在田间条件下以及在不同环境条件（如温度和湿度）下进行验证。