利用FAP x CD40 DARPin（MP0317）实现肿瘤局部CD40激动作用可重塑晚期实体瘤患者的肿瘤微环境：一项开放标签、非随机、剂量递增的I期研究

《Nature Cancer》：Tumor-localized CD40 agonism with MP0317, a FAP x CD40 DARPin, reprograms the tumor microenvironment in patients with advanced solid tumors: an open-label, nonrandomized, dose-escalation phase 1 study

　　

这项I期、开放标签、非随机、剂量递增研究评估了MP0317（FAP x CD40 DARPin）在患有晚期实体瘤的成人患者中的应用。九个队列共46名患者接受了静脉输注MP0317治疗，剂量范围为0.03至10 mg kg?1，每周（Q1W）或每3周（Q3W）一次。主要结局指标为安全性；次要和探索性结局指标包括抗肿瘤活性、药代动力学（PK）和药效学（PD）。大多数治疗相关不良事件（TRAEs）为1级和2级（95%）；未达到最大耐受剂量（MTD）。一名患者获得了未经证实的部分缓解（PR），14名患者病情稳定（SD）。MP0317血清药代动力学证实了长半衰期特性；末端半衰期估计值随剂量增加而增加，范围从21.8小时到120小时不等。配对的肿瘤活检证实了MP0317与成纤维细胞活化蛋白（FAP）和CD40的共定位。肿瘤微环境中CD40通路的激活表现为抗原呈递细胞、浆细胞和滤泡辅助T细胞（Tfh）浸润增加、树突状细胞（DC）成熟、干扰素-γ（IFNγ）信号传导以及循环免疫标志物的改变。总的来说，这些数据证实了MP0317良好的安全性特征，并支持其与互补免疫疗法联合使用的进一步临床评估。ClinicalTrials.gov注册号：NCT05098405。

研究背景与立项依据

CD40作为肿瘤坏死因子（TNF）受体超家族成员，在连接先天与适应性免疫系统方面发挥关键作用。然而，全身性给予CD40激动性抗体常因靶向介导的药物处置（TMDD）导致药物快速清除及半衰期缩短，且易引发细胞因子释放综合征、肝酶升高等剂量限制性毒性（DLT），限制了其临床应用。相比之下，临床前研究表明，将CD40激动作用局限于肿瘤部位（如通过瘤内注射）不仅耐受性良好，还能诱导全身性的抗肿瘤反应。为了克服系统给药的毒性并实现有效的肿瘤内药物暴露，研究人员设计了MP0317，这是一种双特异性设计的锚蛋白重复蛋白（DARPin），包含结合人成纤维细胞活化蛋白（FAP）、人CD40（两个相同结构域）和人血清白蛋白（用于延长半衰期）的结构域。本研究旨在评估该分子在晚期实体瘤患者中的首次人体试验结果。

关键技术方法

本研究采用I期、开放标签、非随机、剂量递增设计。研究对象为46名经组织学确诊、既往多线治疗失败的晚期实体瘤患者，涵盖结直肠癌、胰腺癌等多种类型。研究分为每3周（Q3W）和每周（Q1W）两个给药方案，剂量范围从0.03 mg kg^?1至10 mg kg^?1。主要技术方法包括：通过电化学发光免疫分析法测定血清MP0317浓度以进行非房室模型药代动力学分析；利用多重免疫荧光（mIF）染色和批量RNA测序（RNA-seq）对基线和治疗后（C2D8）的配对肿瘤活检样本进行药效学评估，分析免疫细胞浸润及基因集富集情况；通过流式细胞术监测外周血免疫细胞亚群变化及活化标志物；使用酶联免疫吸附试验和Meso Scale Discovery免疫分析法检测血清可溶性生物标志物及细胞因子水平。

研究结果

患者人群与治疗

共筛选61例患者，46例入组接受治疗。患者中位年龄为63岁，中位既往治疗线数为4线。最常见的肿瘤类型为结直肠癌（n=12）、胰腺癌（n=9）和间皮瘤（n=6）。

安全性

所有46名患者均纳入安全性分析集，共接受228次输注。大多数治疗相关不良事件（TRAEs）为1级和2级（占所有TRAEs的95%），主要包括疲劳（33%）、输液相关反应（IRR，17%）和恶心（15%）。仅有6例（5%）为3级TRAEs，无4级或5级事件。报告了5例严重不良事件（SAEs），其中两例为2级IRR，一例为无症状的1级心力衰竭，两例为3级转氨酶升高（发生于10 mg kg^?1Q3W剂量组，被判定为DLT）。总体而言，未达到最大耐受剂量（MTD）。

抗肿瘤活性

在可评估的46例患者中，客观缓解率（ORR）为2%（90%置信区间0.1至11.5），一名胃肠道间质瘤（GIST）患者获得未经证实的部分缓解。疾病控制率（DCR）为33%，14名患者达到疾病稳定（SD）。中位无进展生存期（PFS）在Q1W组为38.5天，在Q3W组为36.0天。

药代动力学与免疫原性

MP0317血清浓度呈单指数下降，在健康组织中主要限于循环系统。随着剂量增加，末端半衰期（t_1/2）显著延长，Q3W组从21.8小时增至120小时，Q1W组从60.2小时增至103小时，证实了延长的半衰期特性。85%的患者检测到抗药物抗体（ADA），但在较高剂量下仍能维持持续的MP0317暴露，克服了TMDD的影响。

药效学

外周血分析显示，游离可溶性FAP（sFAP）在给药后迅速呈剂量依赖性下降，而高剂量下可溶性CD40（sCD40）出现短暂升高。多重免疫荧光分析表明，在85%的可评估配对肿瘤活检中检测到MP0317，其中81%显示出与FAP和CD40的共定位。与低剂量组相比，接受≥0.3 mg kg^?1治疗的“MP0317-高剂量”组患者肿瘤内树突状细胞（CD11c⁺）丰度显著增加（P=0.0266），且成熟树突状细胞、浆细胞、滤泡辅助T细胞（T_fh）的基因特征评分呈上升趋势，同时伴随干扰素-γ（IFNγ）通路激活。此外，所有患者血清趋化因子CXCL10水平均升高，且与肿瘤内CXCL10基因表达相关。外周血免疫分型显示B细胞数量短暂减少，但活化标志物CD54和CD69持续上调。

推荐II期剂量

综合耐受性、临床疗效、药代动力学和药效学数据，推荐的进一步探索剂量为≥1.5 mg kg^?1Q1W或3 mg kg^?1Q3W。

讨论与结论总结

本研究证实，静脉注射的MP0317能够安全地实现肿瘤局部的CD40激动作用，避免了传统全身性CD40激动剂常见的系统性毒性（如严重的肝脏毒性）。尽管单药治疗的客观缓解率有限，但其能够显著重塑肿瘤微环境，促进抗原呈递细胞的活化和浸润，这为联合治疗奠定了基础。鉴于其良好的安全性和独特的机制，MP0317有望与T细胞靶向疗法（如免疫检查点抑制剂、CAR-T细胞疗法）联合使用，以协同增强抗肿瘤免疫反应。该研究成果发表于《Nature Cancer》期刊。