《Phytomedicine》：Efficacy of Xiao-Feng Powder-loaded thermosensitive composite hydrogel alleviates allergic contact dermatitis by targeting Complement factor B
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背景： 过敏性接触性皮炎（Allergic Contact Dermatitis, ACD）是由抗原暴露引发的免疫紊乱疾病，其激活免疫系统并导致T细胞介导的炎症。目的： 本研究旨在探讨负载中药的温度敏感复合水凝胶在缓解ACD中的作用，并阐明其在TNFα/IFN
背景： 过敏性接触性皮炎（Allergic Contact Dermatitis, ACD）是由抗原暴露引发的免疫紊乱疾病，其激活免疫系统并导致T细胞介导的炎症。目的： 本研究旨在探讨负载中药的温度敏感复合水凝胶在缓解ACD中的作用，并阐明其在TNFα/IFNγ诱导的HaCaT细胞中的潜在机制。方法： 建立了SADBE诱导的ACD小鼠模型和TNFα/IFNγ诱导的HaCaT细胞损伤模型。通过shRNA质粒转染敲低HaCaT细胞中CFB的表达。采用UPLC-MS分析中药复方XFP的化学成分。通过海藻酸钠（SA）、明胶（GEL）和聚乙烯吡咯烷酮（PVP）包封XFP制备微球，随后将其整合到Pluronic F127（F127）和PEG200的水凝胶基质中，制备得到复合制剂F127-PEG200/XFP@SA-GEL-PVP。利用搔抓行为、皮肤皱褶厚度、脾胸腺指数、组织学分析和光声成像系统评估F127-PEG200/XFP@SA-GEL-PVP的效果。最后，通过免疫组化和Western blot分析CFB、RANKL、IL4、IL13、TSLP和IL25的表达水平。结果： 在TNFα/IFNγ诱导的HaCaT细胞中，CFB通过C3调节Th2型细胞因子的表达。F127-PEG200/XFP@SA-GEL-PVP表现出稳定的理化性质和良好的生物相容性。治疗显著减少了ACD小鼠的搔抓行为和皮肤皱褶增厚，抑制了肥大细胞脱颗粒，恢复了皮肤和脾脏组织的血管形态及局部血流，并下调了Th2型细胞因子（IL4、IL13、TSLP）和促炎介质（CFB、RANKL、IL25）的表达水平。结论： 这些发现表明，F127-PEG200/XFP@SA-GEL-PVP对ACD发挥保护作用。沉默CFB可恢复TNFα/IFNγ处理后HaCaT细胞的活力，且C3通路的调节减少了Th2型细胞因子的表达。
本研究聚焦于过敏性接触性皮炎（ACD）这一临床常见炎症性皮肤病。ACD是一种由T细胞介导的针对皮肤过敏原的超敏反应，在中国人群中的发病率高达22.2%。该病不仅表现为边界清晰的红斑、水肿等皮损，更伴有组胺非依赖性瘙痒，导致患者陷入顽固的“瘙痒-搔抓”恶性循环，严重降低生活质量。尽管现有临床治疗手段多样，但往往疗效有限且伴随显著的副作用。从病理机制上看，表皮角质形成细胞不仅是皮肤屏障的主要构成者，在ACD早期阶段亦扮演关键角色，其受TNFα/IFNγ刺激后会分泌多种炎症介质。既往研究已揭示补体因子B（CFB）及核因子κB受体活化因子配体（RANKL）与ACD存在潜在因果关系，但具体的调控机制及基于此的新型给药系统开发仍显不足。为此，研究人员开展了此项研究，旨在通过体外细胞实验与体内动物模型相结合，阐明CFB在角质形成细胞中的调控作用，并开发一种负载经典中药复方消风散（XFP）的温度敏感复合水凝胶，评估其治疗ACD的疗效与机制。该研究最终证实该新型给药系统能有效缓解ACD症状，相关成果发表于《Phytomedicine》。
为实现上述目标，研究人员采用了多项关键技术方法。首先，构建了SADBE诱导的ACD小鼠模型以及TNFα/IFNγ诱导的HaCaT细胞损伤模型，并利用shRNA质粒转染技术敲低细胞内的CFB表达。其次，运用超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-MS）技术对XFP的化学成分进行了系统性分析。在此基础上，通过物理或化学交联技术制备了以Pluronic F127（F127）和PEG200为基质，包裹海藻酸钠（SA）、明胶（GEL）、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）及XFP的微球复合水凝胶（F127-PEG200/XFP@SA-GEL-PVP）。最后，综合运用了搔抓行为学观察、皮肤皱褶厚度测量、脾胸腺指数计算、组织病理学分析、光声成像系统评估以及Western blot和免疫组化等分子生物学手段，多维度评价了该制剂的理化性质及药效机制。
研究结果部分详细展示了各项实验数据与分析结论。
在“Preparation of Sample Solutions”部分，研究人员详细列出了XFP的组成药材，包括当归、生地黄、蝉蜕、苦参、知母、胡麻、白鲜皮、防风、荆芥、苍术、牛蒡子、石膏、甘草、木通，并在此基础上改良加入了乌梅、五味子、银柴胡。
“Upregulation of RANKL and CFB in Skin and Keratinocytes”的研究显示，在SADBE诱导的ACD小鼠病变组织中，Western blot分析证实CFB、RANKL及IL-25的蛋白表达水平显著升高。同时，在体外建立的炎症角质形成细胞模型中，研究人员进一步验证了这些因子的上调，确立了其在ACD发病中的核心地位。
“Discussion”部分深入探讨了皮肤作为免疫器官的功能以及角质形成细胞通过模式识别受体识别病原体并分泌细胞因子参与ACD发病的过程。研究指出，F127-PEG200/XFP@SA-GEL-PVP的治疗作用涉及对CFB、RANKL及Th2细胞因子的调节。该复合水凝胶不仅解决了传统中药外用制剂透皮吸收差、易污染衣物的问题，其温度敏感特性（sol-gel转变）还使其在使用时更加便捷舒适，避免了更换敷料时的二次损伤。
“Conclusion”部分总结道，本研究通过在角质形成细胞中敲低Complement Factor B（CFB），证实了可通过调节C3减轻HaCaT细胞中Th2细胞因子的表达，提示CFB和C3是ACD潜在的 therapeutic targets（治疗靶点）。同时，F127-PEG200/XFP@SA-GEL-PVP对ACD的治疗效果与其调节CFB、RANKL及Th2细胞因子密切相关。这一发现不仅为ACD的发病机制提供了新的视角，也为临床应用中药复方治疗过敏性皮肤病提供了现代化的药物递送策略依据。
