HMGB1的释放受环境因素影响：细胞死亡类型、细胞类型以及LPS（脂多糖）刺激会驱动HMGB1单体和异源复合物的形成

《Molecular Medicine》：Context-dependent release of HMGB1: cell death mode, cell type and LPS stress drive monomer and heterocomplex formation

　　

摘要

背景

当HMGB1从受压或濒死的细胞中释放时，它会充当一种警报分子。体外实验表明，HMGB1能够容易地与其他分子形成复合物，并通过分子间的二硫键结合形成同源二聚体。最近，在受到LPS（脂多糖）刺激的小鼠血清中检测到了二聚化的HMGB1。在癌症研究中，HMGB1被认为具有促进肿瘤生长和抑制肿瘤生长的双重作用，这可能取决于其释放到肿瘤微环境中的形式。然而，决定HMGB1释放形式的因素目前仍大部分未被探索。因此，我们使用多种肿瘤细胞系研究了不同细胞死亡方式以及LPS刺激下HMGB1的释放形式。

方法

从十个未经LPS处理的肿瘤细胞系以及坏死、凋亡和焦亡的THP-1单核细胞中收集上清液，以评估HMGB1的主动和被动分泌情况。通过TCA沉淀法浓缩释放的蛋白质，并在还原和非还原条件下进行Western blotting分析，以检测单体、二聚体或HMGB1-蛋白质复合物。此外，还使用共免疫沉淀和LC-MS/MS技术来鉴定细胞外HMGB1的结合伙伴。

结果

研究发现，肿瘤细胞会释放单体HMGB1以及分子量为50–60 kDa的HMGB1异源复合物，这一点从其在还原条件下的持续高分子量可以得到证实。此外，我们还发现，在LPS处理后的小胶质细胞SIM-A9中，HMGB1能与核糖体蛋白、组蛋白H2B和SRP9发生相互作用。

结论

在体外实验中，HMGB1在多种细胞系中容易形成异源复合物，而不会形成同源二聚体，且LPS处理与未处理的条件之间存在差异。HMGB1的释放形式受到细胞类型、细胞死亡方式以及LPS刺激的影响。

背景

当HMGB1从受压或濒死的细胞中释放时，它会充当一种警报分子。体外实验表明，HMGB1能够容易地与其他分子形成复合物，并通过分子间的二硫键结合形成同源二聚体。最近，在受到LPS刺激的小鼠血清中检测到了二聚化的HMGB1。在癌症研究中，HMGB1被认为具有促进肿瘤生长和抑制肿瘤生长的双重作用，这可能取决于其释放到肿瘤微环境中的形式。然而，决定HMGB1释放形式的因素目前仍大部分未被探索。因此，我们使用多种肿瘤细胞系研究了不同细胞死亡方式以及LPS刺激下HMGB1的释放形式。

方法

从十个未经LPS处理的肿瘤细胞系以及坏死、凋亡和焦亡的THP-1单核细胞中收集上清液，以评估HMGB1的主动和被动分泌情况。通过TCA沉淀法浓缩释放的蛋白质，并在还原和非还原条件下进行Western blotting分析，以检测单体、二聚体或HMGB1-蛋白质复合物。此外，还使用共免疫沉淀和LC-MS/MS技术来鉴定细胞外HMGB1的结合伙伴。

结果

研究发现，肿瘤细胞会释放单体HMGB1以及分子量为50–60 kDa的HMGB1异源复合物，这一点从其在还原条件下的持续高分子量可以得到证实。此外，我们还发现，在LPS处理后的小胶质细胞SIM-A9中，HMGB1能与核糖体蛋白、组蛋白H2B和SRP9发生相互作用。

结论

在体外实验中，HMGB1在多种细胞系中容易形成异源复合物，而不会形成同源二聚体，且LPS处理与未处理的条件之间存在差异。HMGB1的释放形式受到细胞类型、细胞死亡方式以及LPS刺激的影响。