ZDHHC11介导的病毒包膜蛋白棕榈酰化限制了登革病毒的复制：这对开发通用抗黄病毒治疗策略具有重要意义

《Virology Journal》：ZDHHC11-mediated palmitoylation of viral envelope protein restricts dengue virus replication: implication for the development of universal anti-flavivirus therapeutic strategies

　　

摘要

棕榈酰化是一种关键的翻译后修饰，能够调节病毒的复制过程，然而其在登革热病毒（DENV）感染中的调控机制至今仍不明确。本研究旨在阐明棕榈酰化以及锌指结构域Asp-His-His-Cys（ZDHHC）蛋白在DENV复制中的调控作用，并鉴定出被棕榈酰化的DENV蛋白。我们利用棕榈酰化抑制剂2-溴棕榈酸（2BP）和促进剂棕榈酸（PA），结合qRT-PCR、Western blot、共聚焦免疫荧光显微镜、共免疫沉淀以及酰基-生物素交换（ABE）实验，探讨了棕榈酰化在DENV复制中的作用。结果表明，2BP能够促进DENV的复制，而PA则抑制其复制。进一步分析发现，2BP和PA对DENV的吸附、内化过程，以及E蛋白与对病毒组装至关重要的结构蛋白prM/C之间的相互作用均无显著影响。ABE实验证实DENV的E蛋白具有棕榈酰化修饰，而prM和C蛋白则没有这种修饰。质谱分析和定点突变实验进一步确定，DENV的E蛋白在Cys74、Cys302和Cys333这三个半胱氨酸残基处发生棕榈酰化。ZDHHC11是一种已知的寨卡病毒E蛋白棕榈酰化调控因子，它可以直接与DENV的E蛋白相互作用并催化其棕榈酰化过程。功能实验显示，敲低ZDHHC11能够增强DENV的复制，而其过表达则会抑制复制。这些发现加深了我们对黄病毒与宿主相互作用机制的理解，并为开发广谱抗黄病毒疗法提供了理论基础。