通过超声提取、分散吸附剂纯化以及液相色谱-串联质谱法对保健补充剂中的减肥成分进行分析与定量

《Journal of Chromatography A》:Analysis of weight-loss compounds in health supplements by ultrasonic extraction, dispersive sorbent cleanup, and liquid chromatography tandem mass spectrometry quantification

【字体: 时间:2026年05月04日 来源:Journal of Chromatography A 4

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  阮康宏|黄安国|吴芷棠|吴芳芳|Le Viet Ngan|阮光宏|曹孔明|丁越南|阮蒂英|阮光辉|阮芷英|阮鸿浩越南国立大学科学学院化学系,河内,Le Thanh Tong街19号,邮编11018,越南摘要当前社会面临肥胖率的全球性上升,人们越来越意识到控制体重的重要性,并由于减

  
阮康宏|黄安国|吴芷棠|吴芳芳|Le Viet Ngan|阮光宏|曹孔明|丁越南|阮蒂英|阮光辉|阮芷英|阮鸿浩
越南国立大学科学学院化学系,河内,Le Thanh Tong街19号,邮编11018,越南

摘要

当前社会面临肥胖率的全球性上升,人们越来越意识到控制体重的重要性,并由于减肥补充剂的非处方性质而增加了对其的消费。然而,一些生产商故意在补充剂中掺入处方减肥药物,而不在标签上予以标明。因此,需要合适的分析方法来常规检测健康补充剂中的非法减肥成分。在这项研究中,我们开发了一种快速、有效且可靠的液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)方法,可以同时测定三种形式的补充剂(硬胶囊、软胶囊和茶粉)中的11种减肥成分。通过优化LC-MS/MS参数和样品制备条件,选定了合适的分析程序。样品用甲醇超声处理,然后使用C18分散固相萃取法和碳吸附剂进行净化。该方法在特异性、线性、检测限和定量限、精度和准确性方面都得到了验证,效果良好。该方法应用于分析从越南市场收集的82个健康补充剂样品,结果发现其中7个样品至少含有其中一种目标化合物。在西布曲明、酚酞和苯乙基西布曲明含量分别为0.44–16.4 mg/g、0.54–2.14 mg/g和0.14–1.43 mg/g的7个样品中检测到了这些成分。这些结果表明,该方法适用于发达国家和发展中国家的健康补充剂质量控制。

引言

肥胖已成为全球范围内日益严重且普遍的健康问题,导致人们广泛使用药物和膳食补充剂来治疗或辅助治疗这种慢性疾病[1]。减肥药物,包括处方药和非处方药(OTC),通常在医生处方和个人严格监督下用于超重或肥胖人群[2,3]。这些药物通常通过作用于代谢途径、抑制食欲、增加饱腹感和减少脂质吸收来发挥作用[2]。减肥成分可以根据作用机制(如信号激活和交感神经系统刺激)或来源(天然、合成或半合成)进行分类[4],[5],[6],[7]。令人担忧的是,许多用于减肥的OTC产品被非法掺入了减肥药物,以提高其效果,同时这些产品被广泛宣传为天然来源,从而误导了偏好草药产品的消费者。因此,由于消费者认为天然提取物安全或毒性低,这些减肥补充剂的过度使用现象越来越普遍[8,9],导致严重的副作用甚至致命伤害[10],[11],[12]。
已经有多种分析方法用于检测食品和健康补充剂中的减肥成分,如紫外-可见光谱(UV-Vis)[13]、吸附剥离差分脉冲伏安法(AdSDPV)[14]、毛细管电泳(CE)[15,16]、高效液相色谱-紫外检测(HPLC-UV)[17]以及液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)[18],[19],[20],[21],[22]。尽管电化学和CE分析方法操作简单、成本低廉、分辨率高,适合现场和局部筛查[23],[24],[25],[26],但由于UV-Vis和HPLC-UV方法适用于多种光吸收溶剂、重复性好且运行无污染[13,17],因此更受欢迎。相比之下,尽管LC-MS/MS方法维护成本较高且需要经验丰富的操作人员,但其能够短时间内同时定量多种成分,满足了在减肥添加剂种类增多和复杂化的情况下快速、准确分析的需求[19,21]。此外,该方法具有出色的选择性和灵敏度,适用于处理含有低ppb浓度污染物的草药补充剂[27]。
在减肥药物中,西布曲明、麻黄碱及其类似物因其快速的作用机制和多样的衍生物而常出现在食品和膳食补充剂中。当其常见异构体被检测到并被当局禁止时,这些物质可以作为理想的替代品[19,21]。Kim等人[28]使用LC-MS/MS方法检测了数十种食品和补充剂中的减肥添加剂,发现超过四分之一的样品呈阳性,其中检测到了西布曲明、麻黄碱及其衍生物。同样,Lee等人[21]使用LC-MS/MS分析了656个样品(包括食品、补充剂和非法药品),其中19.2%的阳性样品为减肥补充剂,也检测到了这些化合物。Chen等人[20]和Zeng等人[22]也使用LC-MS/MS在健康补充剂中检测到了芬氟拉明、氟西汀和酚酞等其他具有不同减肥机制的成分。这些发现表明健康补充剂市场的复杂性,其中禁用药物被故意隐藏在标签上,而一些国家食品安全监管不严格是一个关键问题[20]。因此,量化健康补充剂中的处方减肥药物对于识别掺假产品并提供相关安全警示至关重要。
在这项研究中,我们开发了一种使用LC-MS/MS技术的方法,可以同时分析健康补充剂中的11种减肥添加剂,包括食欲抑制剂(西布曲明及其类似物、芬氟拉明、洛卡西林和芬特明)、抗抑郁药(氟西汀)、利尿剂(布美他尼)和泻药酚酞。本研究致力于降低方法的检测限,使其能够在低至ng/g的水平上识别掺假现象。我们提出了一种高效的样品处理方案,结合超声辅助提取和分散吸附剂净化,以延长色谱柱寿命、提高方法精度和准确性。将该方法应用于从越南市场收集的真实样品,展示了其在新兴和发展中国家进行食品安全监测的潜力。我们的研究在东南亚地区的食品安全控制方面具有实际价值,并首次报道了使用LC-MS/MS方法在越南同时测定减肥成分的研究成果。

节选

标准和化学品

分析标准品,包括西布曲明(SIB)、去甲基西布曲明(DES)、双去甲基西布曲明(DDS)、氯西布曲明(CHS)、苯乙基西布曲明(BES)、芬氟拉明(FEN)、洛卡西林(LOR)、芬特明(PHT)、布美他尼(BUM)和酚酞(PHE),纯度均高于98%,购自Sigma-Aldrich(美国密苏里州)。内标西布曲明-d6(SIB-d6,99.6%)购自Toronto Research Chemicals(加拿大安大略省)。去离子水由实验室自行制备。

MS/MS参数的优化

MS/MS检测器设置在ESI+模式下,毛细管电压为3500 V。离子源和脱溶剂温度分别维持在150°C和400°C。脱溶剂气体流量为800 L/h,锥形气体流量为150 L/h,碰撞气体流量为0.1 mL/min,雾化器压力设置为7 bar。数据采集采用MRM模式。对于所有目标化合物,[M+H]+形式的离子丰度最高,被选为前体离子。

结论

我们成功开发了一种有效、准确且适应性强的LC-MS/MS方法,用于检测健康补充剂中的11种减肥成分。样品用甲醇超声提取后,使用C18分散吸附剂和碳吸附剂进行净化,并通过LC-MS/MS进行定量。该方法在特异性、线性(R2 > 0.995)、方法检测限(MDL 9.1–12.2 ng/g)、方法定量限(MQL 30.2–40.6 ng/g)、精密度(日内RSD < 15%和日间RSD < 20%)以及回收率(82–107%)方面均得到了验证。

作者贡献声明

阮康宏:撰写——初稿,数据管理。黄安国:撰写——初稿,数据管理。吴芷棠:撰写——审稿与编辑,方法学研究,数据管理,概念构思。吴芳芳:方法学研究,正式分析。Le Viet Ngan:方法学研究,正式分析。阮光宏:方法学研究,正式分析。曹孔明:方法学研究,正式分析。丁越南:方法学研究,正式分析。阮蒂英:方法学研究,正式分析。阮光辉:

利益冲突声明

作者声明他们没有已知的财务利益或个人关系可能影响本文所述的工作。

资助

本研究由越南国家科学技术发展基金会(NAFOSTED)资助,授予编号为104.04-2021.38的资助。
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