肠杆菌目胸苷依赖型小菌落变异体的最佳生长条件评估：一项用于开发抗菌药物敏感性检测方法的初步研究

《Journal of Microbiological Methods》：Evaluation of optimal growth conditions for Enterobacterales thymidine-dependent small-colony variants: A pilot study for the development of antimicrobial susceptibility testing

　　

根岸达也（Tatsuya Negishi）|松本武久（Takehisa Matsumoto）|上条智（Tomu Kamijo）|堀内和树（Kazuki Horiuchi）|荒井惠里子（Eriko Arai）|奈良田达也（Tatsuya Natori）|笠井彩香（Ayaka Kasai）|山根卓（Taku Yamane）|八代彩香（Ayaka Hachiro）|关彩香（Sayaka Seki）|石峰奈欧（Nau Ishimine）|上原武（Takeshi Uehara）

信州大学医院实验医学系，日本长野县松本市朝日3-1-1，邮编390-8621

摘要

胸苷依赖型小菌落变异株（TD-SCVs）是一类生长缓慢的细菌亚群，其生长需要胸苷。由于这些菌株无法在Mueller–Hinton培养基上生长，因此对其进行抗菌药物敏感性测试较为困难，这增加了忽视耐药菌株的风险。在本研究中，我们旨在评估适合这些胸苷依赖型小菌落变异株生长的最佳胸苷浓度，并测定其在不同培养基上的活细胞数量，为开发针对它们的抗菌药物敏感性测试方法奠定基础。我们对11种属于肠杆菌目（Enterobacterales）的TD-SCVs进行了研究，确定了其最佳生长所需的胸苷浓度以及在不同培养基上培养所得菌落制成的0.5 McFarland浊度标准液中的活细胞数量。随后，我们改进了抗菌药物敏感性测试方法：在肉汤稀释液中加入最佳胸苷浓度，并使用在产生最高活细胞数量的培养基上培养的菌落制备细菌悬液。测试结果显示，10 μg/mL的胸苷浓度对这些菌株的生长最为有利。在添加了10 μg/mL胸苷的Mueller–Hinton琼脂培养基上培养的菌落制成的0.5 McFarland浊度标准液中，活细菌数量最多。采用改良后的抗菌药物敏感性测试方法（其中胸苷浓度为10 μg/mL）通常能获得可靠的结果，包括产ESBL的菌株。因此，在开发TD-SCVs的抗菌药物敏感性测试方法时，考虑最佳胸苷浓度以及不同培养基上的活细胞数量差异至关重要。