将狂犬病病毒糖蛋白与靶向树突状细胞的肽融合后，其免疫原性得到了增强

《Scientific Reports》：Enhanced immunogenicity of the rabies virus glycoprotein fused to a dendritic cell-targeting peptide

　　

摘要

先前研究表明，靶向树突状细胞的肽（DCP）三聚体序列能够增强特异性IgG的产生。本研究旨在通过将DCP克隆到pCDNA3.1+载体中，并将其与狂犬病病毒糖蛋白（RVG）融合，来探讨RVG在真核细胞中的表达情况。为了提升免疫反应，将DCP三聚体序列连接到RVG的C端。该构建体包含一个His标签用于蛋白质纯化，以及一个肠激酶（EK）切割位点，以便将标签与重组蛋白分离。通过RT-PCR从狂犬病病毒基因组中扩增RVG基因，并使用BamHI和EcoRI限制性内切酶进行克隆。重组质粒（RVG-pCDNA3.1+）通过脂质转染法导入BHK-21细胞中，随后通过SDS-PAGE和Western blotting以及抗His抗体验证了重组蛋白的表达情况。带有His标签的重组蛋白使用Ni-NTA树脂进行纯化。通过小鼠接种并利用RFFIT和ELISA方法分析血清样本，研究了该重组蛋白的免疫原性。结果表明，RVG-DCP融合蛋白已在真核细胞中成功克隆和表达，具有潜在的狂犬病疫苗开发应用价值。这项研究提出了一种利用靶向树突状细胞的肽来增强病毒糖蛋白免疫原性的新方法。