一种用于测量纤溶酶活性的新型生物传感器

《Research and Practice in Thrombosis and Haemostasis》：A novel biosensor for measuring plasmin activity

　　

作者：Ying Dai、Paul Y. Kim、Stefan Heitmeier、Jeffrey I. Weitz、Peter L. Gross

加拿大汉密尔顿麦克马斯特大学血栓与动脉粥样硬化研究所、医学与医学科学系

摘要

背景

纤溶酶通过催化纤维蛋白凝块的降解来促进纤维蛋白溶解。在临床前和临床环境中，需要可靠的方法来通过测量纤溶酶的生成来评估纤维蛋白溶解过程。

目的

设计、合成并评估一种基于荧光共振能量淬灭（FREQ）技术的纤溶酶传感器蛋白（FPS），以监测纤溶酶的生成情况。

方法

通过检测FREQ的减少来监测FPS的水解过程，从而评估其效率和特异性。使用基于血浆的纤溶酶生成检测方法来评估纤溶辅助因子和抑制剂的作用。

结果

与肽类纤溶酶传感器相比，FPS对纤溶酶的检测效率更高，并且不会被α₂-巨球蛋白抑制。FPS与纤溶酶的Kringle结构域5相互作用。FPS能够在凝血血浆中检测纤溶酶的生成情况，这种生成会受到抗α₂-抗纤溶酶（AP）抗体的影响而增加，同时会受到抑肽酶、氨甲环酸以及缺乏纤维蛋白的影响而减少。纤溶酶的最大生成发生在血栓形成之后。此外，当抗纤溶酶抗体（AP）被抑制时，还可以检测到纤溶酶原激活剂抑制剂-1（PAI-1）的存在。与肽类传感器不同，FPS不会抑制血栓的溶解过程。最后，使用FPS检测的纤溶酶生成情况在健康志愿者的血浆中相对稳定，其峰值纤溶酶水平、峰值时间和内源性纤溶酶潜力（EPP）仅存在两倍的差异。

结论

FPS可能有助于改善临床前和临床环境中对纤维蛋白溶解过程的评估，从而加深我们对纤溶障碍的理解。