在多发性骨髓瘤的临床前模型中，IgG2a型4-1BB激动剂与S100A9抑制剂联合使用可增强T细胞活性并改善肿瘤控制效果

《Journal of Experimental & Clinical Cancer Research》：IgG2a-formatted 4-1BB agonism combined with S100A9 inhibition enhances T cell activation and tumor control in a preclinical model of multiple myeloma

　　

摘要

背景

免疫疗法已成为治疗多发性骨髓瘤（MM）的一种有前景的策略，但由于骨髓（BM）的免疫抑制微环境，复发仍然频繁发生。这种微环境的特点是T细胞功能障碍和免疫抑制性髓系细胞的积累。共刺激受体4-1BB（CD137, TNFRSF9）可以增强T细胞和NK细胞的效应功能，但其在MM中的治疗作用尚未得到充分证实。Tasquinimod（TQ）是一种处于临床阶段的S100A9抑制剂，通过限制抑制性髓系细胞的招募和活性，提供了一种补充性的治疗手段。

方法

利用单细胞RNA测序和流式细胞术评估了MM小鼠疾病进展过程中以及新诊断MM患者体内的4-1BB表达情况。在经两种4-1BB激动剂LOB12.3（IgG1κ）和3H3（IgG2a）治疗的5TGM1肿瘤小鼠中评估了其治疗潜力，并使用了同型对照。随后将主要激动剂与TQ联合使用，以研究对免疫抑制性肿瘤微环境的双重靶向作用。通过检测骨髓和脾脏中的浆细胞增多以及血清M蛋白水平来量化肿瘤负担。使用多参数流式细胞术分析免疫调节情况。统计显著性通过Mann–Whitney U检验或单因素ANOVA确定（p < 0.05）。

结果

在小鼠肿瘤发展过程中，4-1BB在T细胞和NK细胞上的表达逐渐增加。在原发性MM患者的骨髓样本中，体外用urelumab刺激4-1BB可增强效应反应，增加了IFN-γ⁺和Granzyme B⁺ CD3⁺ T细胞的数量，同时CD56⁺ NK细胞的趋势也有所增加，其活性也有所提升。

在体内实验中，4-1BB激动剂治疗促进了T细胞亚群的扩增，并表现出克隆特异性效应：IgG2a克隆3H3显著降低了M蛋白水平和骨髓中的浆细胞增多，而IgG1克隆LOB12.3则导致NK细胞减少，并显示出有限的抗肿瘤活性。将3H3与TQ联合使用后，抗骨髓瘤效果更佳，使骨髓中的浆细胞增多从对照组的62.5%降低到联合治疗组的14.1%。从机制上讲，这种联合治疗增强了Granzyme B的表达、效应T细胞的分化以及树突状细胞的成熟（CD86上调），从而共同克服了骨髓的免疫抑制作用。

结论

这些发现证实了4-1BB激动剂的同型特异性效应，并支持将4-1BB刺激与TQ联合使用作为一种增强MM持久免疫治疗反应的有前景策略。

图形摘要

此图像的替代文本可能是通过人工智能生成的。

背景

免疫疗法已成为治疗多发性骨髓瘤（MM）的一种有前景的策略，但由于骨髓（BM）的免疫抑制微环境，复发仍然频繁发生。这种微环境的特点是T细胞功能障碍和免疫抑制性髓系细胞的积累。共刺激受体4-1BB（CD137, TNFRSF9）可以增强T细胞和NK细胞的效应功能，但其在MM中的治疗作用尚未得到充分证实。Tasquinimod（TQ）是一种处于临床阶段的S100A9抑制剂，通过限制抑制性髓系细胞的招募和活性，提供了一种补充性的治疗手段。

方法

利用单细胞RNA测序和流式细胞术评估了MM小鼠疾病进展过程中以及新诊断MM患者体内的4-1BB表达情况。在经两种4-1BB激动剂LOB12.3（IgG1κ）和3H3（IgG2a）治疗的5TGM1肿瘤小鼠中评估了其治疗潜力，并使用了同型对照。随后将主要激动剂与TQ联合使用，以研究对免疫抑制性肿瘤微环境的双重靶向作用。通过检测骨髓和脾脏中的浆细胞增多以及血清M蛋白水平来量化肿瘤负担。使用多参数流式细胞术分析免疫调节情况。统计显著性通过Mann–Whitney U检验或单因素ANOVA确定（p < 0.05）。

结果

在小鼠肿瘤发展过程中，4-1BB在T细胞和NK细胞上的表达逐渐增加。在原发性MM患者的骨髓样本中，体外用urelumab刺激4-1BB可增强效应反应，增加了IFN-γ⁺和Granzyme B⁺ CD3⁺ T细胞的数量，同时CD56⁺ NK细胞的趋势也有所增加，其活性也有所提升。

在体内实验中，4-1BB激动剂治疗促进了T细胞亚群的扩增，并表现出克隆特异性效应：IgG2a克隆3H3显著降低了M蛋白水平和骨髓中的浆细胞增多，而IgG1克隆LOB12.3则导致NK细胞减少，并显示出有限的抗肿瘤活性。将3H3与TQ联合使用后，抗骨髓瘤效果更佳，使骨髓中的浆细胞增多从对照组的62.5%降低到联合治疗组的14.1%。从机制上讲，这种联合治疗增强了Granzyme B的表达、效应T细胞的分化以及树突状细胞的成熟（CD86上调），从而共同克服了骨髓的免疫抑制作用。

结论

这些发现证实了4-1BB激动剂的同型特异性效应，并支持将4-1BB刺激与TQ联合使用作为一种增强MM持久免疫治疗反应的有前景策略。

图形摘要

此图像的替代文本可能是通过人工智能生成的。