乳杆菌（Saccharomyces boulardii）治疗对自然感染犬细小病毒的狗的抗炎作用

《Veterinary Immunology and Immunopathology》：Anti-inflammatory effects of Saccharomyces boulardii treatment in dogs naturally infected with canine parvovirus

　　

塞琳·西内姆·孙布尔·拉钦|巴萨克·哈内丹

阿塔图尔克大学

摘要

这项随机对照临床试验旨在评估在标准治疗基础上额外使用Saccharomyces boulardii（S. boulardii）是否能够加速患有自然感染犬细小病毒（CPV）肠炎的犬只的临床恢复，并改善全身炎症的血液学指标。此外，该研究还评估了与炎症途径相关的核因子-κB（NF-κB）和白细胞介素8（IL-8）的水平。研究分为三组，每组10只3-5个月大的犬只。对照组为外观健康的犬只。第1组仅接受标准治疗，第2组在标准治疗基础上额外使用S. boulardii。研究期间在第0天和第5天对两组犬只进行临床评分，并采集血液样本。检测了全血细胞计数、血清生化指标以及血清NF-κB和IL-8水平。与单独使用标准治疗相比，S. boulardii的联合使用显著改善了CPV犬只的临床评分，提高了白细胞计数、中性粒细胞和淋巴细胞的数量，降低了IL-8和NF-κB的浓度，增加了白蛋白浓度，并减少了丙氨酸氨基转移酶的活性。综上所述，对细小病毒感染的犬只，在标准治疗基础上使用S. boulardii有助于快速改善临床评分并减轻炎症。

引言

犬细小病毒（CPV）感染是一种常见、具有传染性且可能危及生命的病毒性疾病（Decaro和Buonavoglia, 2012）。6个月以下的犬只更容易发病，但免疫系统受损的成年犬也可能受到影响（Kalli等, 2010; Markovich等, 2012）。

该病毒最初在肠系膜淋巴结和胸腺中繁殖（Goddard和Leisewitz, 2010）。犬细小病毒2型（CPV-2）主要攻击肠道隐窝上皮、骨髓、舌上皮以及心肌细胞的快速增殖区域，同时也会影响肺、脾、肝和肾（Ford等, 2017）。疾病进展过程中会出现严重的白细胞减少（尤其是中性粒细胞和/或淋巴细胞减少）、肠道黏膜屏障破坏、绒毛萎缩和吸收不良，随后引发腹泻、呕吐、脱水/低血容量、代谢性酸中毒（或碱中毒）、菌群败血症、内毒素血症、全身炎症反应综合征（SIRS）、高凝状态、多器官功能障碍，最终可能导致死亡（Goddard和Leisewitz, 2010; Kalli等, 2010; Pedroza-Roldán等, 2026; Sykes, 2014; Turk等, 1990）。

贫血是严重CPV肠炎的常见血液学表现（Potgieter等, 1981）。血清生化异常并不具有特异性，包括由于厌食或肠炎导致的低钾血症和低白蛋白血症，以及由于脱水和组织灌注不足引起的肾前性氮质血症，以及碱性磷酸酶和丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性升高，这些都表明肝脏细胞受损（Goddard和Leisewitz, 2010; Prittie, 2004）。

核因子-κB（NF-κB）在炎症反应中起的作用（Liu等, 2017）。NF-κB是一种转录因子，被认为是包括肠道上皮细胞在内的多种类型细胞中炎症的主要调节因子，它协调多种促炎基因的表达（Atreya等, 2008）。NF-κB是炎症性肠病中天然免疫反应和对抗病原菌作用的主要调节者（Naumann, 2000; Pallone和Monteleone, 2001）。

白细胞介素8（IL-8）属于趋化因子家族，它在中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞和淋巴细胞等炎症细胞的迁移过程中发挥作用（Casola等, 2002; Chen等, 2014; Giordano等, 2013）。

细小病毒感染的幼犬常出现严重脱水和低血容量性休克，因此静脉输液治疗对于治疗该疾病至关重要（Lamm和Rezabek, 2008; Tello和Perez-Freytes, 2017）。在CPV肠炎的犬只中，肠道隐窝细胞的损伤、肠道运动异常和内毒素诱导的细胞因子激活可能是呕吐的主要原因（Mantione和Otto, 2005）。因此，止吐药是缓解呕吐的重要治疗手段（Mazzaferro, 2020; Yalcin和Keser, 2017）。CPV肠炎会使犬只容易发生细菌移位，这可能是由于肠道绒毛塌陷和免疫功能障碍（Marks等, 2018; Silva等, 2017; Sykes, 2014; Tupler等, 2012）。对于CPV肠炎的犬只，推荐使用广谱抗生素作为治疗的一部分（Mazzaferro, 2020）。

Saccharomyces boulardii（S. boulardii）属于Saccharomycetaceae科，是一种革兰氏阳性酵母菌。它对抗生素和胃酸具有抗性（Czerucka和Rampal, 2002）。研究表明S. boulardii对治疗肠道疾病有效（Aktas等, 2007; Kelesidis和Pothoulakis, 2012; Sen和Mansell, 2020）。益生菌在维持肠道微生物群、防止病原体定植、支持上皮屏障和调节免疫功能方面起着重要作用（Bastos等, 2023; Czerucka等, 2007; Kelesidis和Pothoulakis, 2012; Kumar Bajaj等, 2015）。S. boulardii通过产生甘露聚糖、甘露蛋白和几丁质等细胞壁成分，有助于健康的胃肠道微生物群（Pais等, 2020）。它还能产生棕榈酸（Murzyn等, 2010），棕榈酸及其他饱和脂肪酸具有抗菌、抗真菌和抗病毒作用（Desbois和Smith, 2010; Huang等, 2014; Murzyn等, 2010; Yang等, 2018）。研究表明S. boulardii可以减少多重抗生素使用导致的抗生素耐药基因的富集（Cifuentes等, 2022）。在患有慢性肠病的犬只中，S. boulardii的治疗可改善临床活动指数、粪便稠度和频率以及体况评分（D’Angelo等, 2018）。这种益生菌酵母通过产生低分子量的可溶性因子来抑制NF-κB的激活及其介导的IL-8基因表达，从而发挥抗炎作用（Sougioultzis等, 2006）。

目前科学文献中尚未评估S. boulardii对CPV感染犬只的治疗效果。本前瞻性随机对照临床试验旨在评估在标准治疗基础上额外使用S. boulardii是否能够加速临床恢复并改善全身炎症的血液学指标。此外，该研究还评估了S. boulardii对与NF-κB和IL-8相关的炎症途径的影响。

章节摘录

动物样本

在埃尔祖鲁姆的阿塔图尔克大学兽医学院动物医院和Myvet兽医诊所接受疫苗接种的犬只构成了健康的对照组。对照组中的犬只由主人在家中照顾。对照组在驱虫治疗后一周进行了体检和血液检查。我们的实践中通常在接种疫苗前会进行驱虫治疗，并要求主人携带相关资料。

临床评分

临床评分数据以表2中的中位数（最小值-最大值）形式呈现。第1组和第2组在第0天的临床评分显著高于对照组，而第3天和第4天对照组与第2组之间的差异不明显。第1组在第4天和第5天的评分显著改善，第2组在第2天至第5天的评分也有所改善。

血细胞计数结果

各组?血细胞计数参数以表3中的平均值±标准误差形式呈现

讨论

在CPV感染的犬只中，疾病早期体温会上升，随着感染进展会出现呕吐和腹泻（Tuteja等, 2022）。病毒对肠道黏膜的损伤和隐窝坏死促使机会性病原体进入血液，导致败血症（Geetha, 2015）。Alves等（2020）指出，诊断SIRS至少需要满足四个标准中的两个。在本研究中，CPV感染的犬只表现出呕吐和腹泻等症状。

研究的局限性

由于项目资金有限和可获得的CPV感染犬只数量有限，每组仅包含10只3-5个月大的犬只。

为了减少选择偏差，自然感染细小病毒的犬只被随机分配到不同的治疗组。尽管进行了随机化处理，但在第0天仍观察到了淋巴细胞数量的差异。与受控实验感染不同，无法标准化感染的确切时间和感染剂量。

CRediT作者贡献声明

塞琳·西内姆·孙布尔·拉钦：撰写 – 审稿与编辑，撰写 – 初稿，资源准备，方法学设计，数据整理，概念构思。巴萨克·哈内丹：撰写 – 审稿与编辑，撰写 – 初稿，监督，软件使用，资源管理，项目协调，方法学设计，数据整理，概念构思。

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