头孢兰辛的双重评估：体外和体内对多宿主血液原虫（尤其是埃文西锥虫）的抑制作用

《Veterinary Parasitology》：Dual Assessment of Cepharanthine: In Vitro and In Vivo Inhibitory Effects on Multi-Host Haemoprotozoa, Trypanosoma evansi

　　

Diksha Sharma|Snehil Gupta|Sukhdeep Vohra|Khushboo Sethi|Ruma Rani|Surbhi Gupta|Sanjay Kumar|Rajender Kumar

印度哈里亚纳邦希萨尔市Lala Lajpat Rai兽医与动物科学大学兽医寄生虫学系，邮编125004

摘要

Cepharanthine是一种从植物Stephania cephalantha中提取的生物活性生物碱，因其潜在的治疗效果而受到广泛关注。鉴于目前针对Trypanosoma evansi的治疗方法所存在的抗药性和毒性问题，本研究在体外和体内条件下评估了不同浓度Cepharanthine对T. evansi的抗蜱活性。实验结果显示，Cepharanthine具有显著的抗蜱活性，24小时时的IC₅₀值为1131 nM。此外，其在Vero细胞系上的选择性指数（SSI）为78.84，在马PBMCs上的选择性指数为107.78，表明其安全性较高。在小鼠模型中，当以12.5 mg/kg的剂量给药时，Cepharanthine能在10天内清除寄生虫，并将感染小鼠的存活期延长超过30天；随后每隔48小时和72小时再给予额外剂量。转录分析显示，trypanothione还原酶（表达量增加2.15倍，p<0.05）和aurora激酶（表达量增加1.27倍，p<0.05），表明Cepharanthine可能影响了细胞的氧化还原平衡和细胞周期调控。另一方面，转唾液酸酶、寡肽酶、精氨酸激酶、拓扑异构酶II、钙ATP酶1和鸟氨酸脱羧酶在24小时暴露后未受到明显影响。总体而言，这些研究结果表明Cepharanthine具有强大的抗T. evansi活性，可能成为现有传统抗蜱药物的更安全替代品。

节摘

引言

Surra是一种由鞭毛外寄生虫Trypanosoma evansi引起的疾病（Kumar等人，2018年；Sharma等人，2022a）。该疾病严重影响多种宿主，包括家养动物、伴侣动物和野生动物。主要通过Tabanus和Stomoxys等叮咬昆虫传播，在世界许多地区都十分常见（Desquesnes等人，2013年；Sharma等人，2022b）。这种疾病对家畜尤为有害。

T. evansi培养的维持

体外培养使用了一种来自阿约提亚马（Ayodhya pony）的冻存菌株（T. ev-India-NRCE-Horse4/Ayodhya/U.P./2020）进行。实验中，将实验室小鼠感染该菌株后，在获得Lala Lajpat Rai兽医与动物科学大学机构动物伦理委员会（IAEC）[批准编号-IAEC/LUVAS/27/13]的许可后，在寄生虫密度达到峰值时对其实施麻醉并实施安乐死。

血液采集过程严格遵循无菌操作规范。

利用非线性回归分析计算得出Cepharanthine在24小时时对T. evansi的半最大抑制浓度（IC₅₀）。通过GraphPad Prism软件（版本8.0）将Cephalanthine的对数浓度与归一化的平均寄生虫密度绘制成S型剂量-反应曲线，得出IC₅₀值为1131 nM，拟合优度（R2）为0.9161（图1）。

为了进一步评估其抗寄生虫效果...

Cepharanthine是一种双苄基异喹啉生物碱，主要从Stephania cephalantha中分离得到（Bailly，2019年；Leng等人，2024年）。它具有广泛的治疗特性，尤其是对不同株系的Plasmodium和T. cruzi具有抗寄生虫作用（Chea等人，2007年；Bagdikian等人，2013年；Bory等人，2013年），并且已被批准用于治疗多种急性和慢性疾病（Liu等人，2023年）。

实验表明，Cepharanthine在体外和体内均对T. evansi具有显著的抑制作用，证明了其作为治疗Surra的有效候选药物的潜力。在体内实验中，它在10天内清除了寄生虫，并将感染小鼠的存活期延长了30天以上。然而，样本量较小是本研究的局限性。在Vero细胞系和马PBMCs的实验中，Cepharanthine表现出较高的选择性。

(Brennd?rfer和Boshart，2010年；Gupta等人，2022b)

Ruma Rani：负责研究、数据分析。Surbhi Gupta：负责初稿撰写和软件操作。Sanjay Kumar：负责验证、监督、数据分析及项目构思。Rajender Kumar：负责数据可视化、监督、资源调配、项目管理和资金申请。Diksha Sharma：负责初稿撰写、方法设计、数据分析和研究。Snehil Gupta：负责审稿和编辑工作以及项目监督。Sukhdeep Vohra：