评估针对AU-565细胞系生成的杂交瘤抗体混合物的免疫反应性，以用于乳腺癌的诊断和免疫治疗

《BMC Cancer》：Evaluating immunoreactivity of hybridoma-derived antibody mixtures generated against AU-565 cell line for diagnosis and immunotherapy of breast cancer

　　

摘要

背景

本研究旨在利用杂交瘤技术生成针对AU-565乳腺癌细胞系全细胞裂解物的抗体，并评估其免疫原性和初步的免疫测定反应性。比较了两种佐剂——完全弗氏佐剂（CFA）和聚氧化钆（PO）在增强免疫反应方面的能力。同时进行了细胞因子分析，以评估抗原-佐剂组合的免疫调节效果。

方法

AU-565细胞裂解物通过超声处理制备，并与CFA或PO结合。在体外通过J774巨噬细胞产生的一氧化氮（NO）来评估免疫刺激活性，在体内则通过Balb/c小鼠的抗体滴度进行评估。杂交瘤细胞是从免疫小鼠的脾细胞中生成的。由于未进行单细胞克隆，因此收集的是来自混合杂交瘤培养物的抗体，这些抗体能够识别多种表位。通过ELISA定量细胞因子水平（IL-6、IL-12、GM-CSF和TNF-α），以表征抗原-佐剂组合诱导的炎症反应模式。

结果

AU-565抗原+CFA组合相比未经处理的对照组巨噬细胞显著增加了NO的产生，并且产生的抗体滴度也高于PBS对照组。细胞因子分析显示，AU-565抗原+CFA组合显著增加了IL-12、GM-CSF和TNF-α的分泌，表明在巨噬细胞模型中存在明显的促炎反应模式；而相对于未经处理的对照组巨噬细胞，IL-6的适度增加则提示部分支持体液相关信号通路。与商业抗体相比，杂交瘤衍生的抗体混合物在ELISA检测中对AU-565和MCF-7裂解物的反应性更强，表明在所使用的检测条件下具有更广泛的裂解物识别能力。

结论

杂交瘤衍生的抗体混合物表现出强烈的免疫原性、与细胞因子相关的免疫刺激作用以及在乳腺癌相关免疫测定开发方面的初步潜力；然而，在确定其诊断应用价值之前，还需要进一步验证其特异性和分析性能。AU-565抗原-CFA组合不仅增强了抗体的产生，还促进了有利的细胞因子谱型，这突显了CFA作为乳腺癌相关免疫原设计中佐剂的优越性。

图形摘要

此图像的替代文本可能是由AI生成的。

背景

本研究旨在利用杂交瘤技术生成针对AU-565乳腺癌细胞系全细胞裂解物的抗体，并评估其免疫原性和初步的免疫测定反应性。比较了两种佐剂——完全弗氏佐剂（CFA）和聚氧化钆（PO）在增强免疫反应方面的能力。同时进行了细胞因子分析，以评估抗原-佐剂组合的免疫调节效果。

方法

AU-565细胞裂解物通过超声处理制备，并与CFA或PO结合。在体外通过J774巨噬细胞产生的一氧化氮（NO）来评估免疫刺激活性，在体内则通过Balb/c小鼠的抗体滴度进行评估。杂交瘤细胞是从免疫小鼠的脾细胞中生成的。由于未进行单细胞克隆，因此收集的是来自混合杂交瘤培养物的抗体，这些抗体能够识别多种表位。通过ELISA定量细胞因子水平（IL-6、IL-12、GM-CSF和TNF-α），以表征抗原-佐剂组合诱导的炎症反应模式。

结果

AU-565抗原+CFA组合相比未经处理的对照组巨噬细胞显著增加了NO的产生，并且产生的抗体滴度也高于PBS对照组。细胞因子分析显示，AU-565抗原+CFA组合显著增加了IL-12、GM-CSF和TNF-α的分泌，表明在巨噬细胞模型中存在明显的促炎反应模式；而相对于未经处理的对照组巨噬细胞，IL-6的适度增加则提示部分支持体液相关信号通路。杂交瘤衍生的抗体混合物在ELISA检测中对AU-565和MCF-7裂解物的反应性更强，表明在所使用的检测条件下具有更广泛的裂解物识别能力。

结论

杂交瘤衍生的抗体混合物表现出强烈的免疫原性、与细胞因子相关的免疫刺激作用以及在乳腺癌相关免疫测定开发方面的初步潜力；然而，在确定其诊断应用价值之前，还需要进一步验证其特异性和分析性能。AU-565抗原-CFA组合不仅增强了抗体的产生，还促进了有利的细胞因子谱型，这突显了CFA作为乳腺癌相关免疫原设计中佐剂的优越性。

图形摘要

此图像的替代文本可能是由AI生成的。