泰国高发病率地区猪链球菌的公众认知与分子特征研究 作者：Perm Premphoolsawat, Khomson Satchasataporn, Thitichai Jarudecha, Kamonwan Lunha, Suganya Yongkiettrakul, Anusak Kerdsin, Daisuke Takamatsu, Nattakan Meekhanon

《Veterinary Sciences》：Public Awareness and Molecular Characterization of Streptococcus suis in a High-Incidence Region of Thailand Perm Premphoolsawat, Khomson Satchasataporn, Thitichai Jarudecha, Kamonwan Lunha, Suganya Yongkiettrakul, Anusak Kerdsin, Daisuke Takamatsu and Nattakan Meekhanon

　　**简单总结：**
**猪链球菌（Streptococcus suis）**是一种可以从猪传播给人类的细菌，可能导致严重疾病。在泰国东北部，人类感染病例持续增加，尤其是在那空拉差西玛省（Nakhon Ratchasima Province）。本研究评估了当地居民对感染风险的认识、态度和行为，并对该省猪群中存在的**猪链球菌**菌株进行了分析。研究人员调查了500名居民，并从屠宰场的猪只中采集了鼻咽拭子进行微生物分析。大多数居民对感染风险有较高的认识，并愿意采取降低风险的措施，但他们对传播途径仍存在一些误解。近一半的样本中检测出了**猪链球菌**，且该菌株表现出较高的遗传多样性，其中包含一些已知与人类感染相关的类型。这些发现强调了实施有针对性的公众教育和持续监测的必要性，以降低人类感染**猪链球菌**的风险。

**摘要：**
**猪链球菌**是一种主要的动物源性病原体，在泰国东北部那空拉差西玛省的人类感染病例不断增加。本研究旨在评估当地居民对感染风险的认识、态度和行为（KAP：Knowledge, Attitudes, Practices），并分析猪群中的**猪链球菌**分离株的特征。研究人员向500名居民发放了结构化问卷，同时在那空拉差西玛省的三个屠宰场采集了猪只的鼻咽拭子样本。通过PCR确认疑似**猪链球菌**分离株，并通过分子分型、毒力相关基因分析及多位点序列分型（MLST）技术对其进行了进一步鉴定。结果表明，尽管大部分居民对感染风险有较好的认识并愿意采取预防措施，但他们对传播途径仍存在误解。在285份猪样本中，有122份（42.8%）检测出**猪链球菌**，涉及16种血清型；其中血清型9最为普遍，部分血清型曾出现在人类感染病例中。主要毒力相关基因组合为mrp?/sly?/epf?（77.4%）。尽管居民的整体认识水平较高，但仍存在误解，这凸显了开展针对性公共卫生教育的必要性。此外，猪群中**猪链球菌**的高流行率和遗传多样性提示需要持续监测潜在致病菌株。

**1. 引言：**
**猪链球菌**是一种重要的动物源性病原体，尤其在那些与猪密切接触或食用生或未煮熟猪肉较为普遍的地区，对公共卫生构成严重威胁。由**猪链球菌**引起的人类感染可能导致脑膜炎、败血症、心内膜炎、关节炎和永久性听力丧失等严重疾病[1,2,3]。人类感染通常通过直接接触受感染的猪或被污染的猪肉产品发生，尤其在泰国和越南等 Southeast Asian 国家，食用生猪肉是主要风险因素[4,5,6,7,8]。泰国目前报告的**猪链球菌**感染发病率最高，为每10万人0.487例，其次是越南（0.249例/10万人)[9]。泰国首例**猪链球菌**感染病例记录于1987年，为两个脑膜炎病例。此后该国多地发生多起疫情，北部省份的疫情尤为严重[10,11,12]。例如2000年兰普恩（Lampun）地区有10人死亡；2007年派尧（Phayao）地区发生疫情，确诊29例并导致3人死亡；2010年佩差汶（Phetchabun）地区再次发生疫情，确诊25例并造成1人死亡。近年来，那空拉差西玛省成为高发区，2019年至2024年间年确诊病例数在61例（2.33/10万人）至143例（5.43/10万人）之间波动[13]。2021年该省还发生了局部疫情，确诊21例[11]。这些趋势表明**猪链球菌**感染对该地区的公共卫生负担日益加重。尽管采取了公共卫生干预措施，但当地仍存在食用生猪肉的文化习俗，公众对食源性动物传染病的认识不足。因此，那空拉差西玛省成为研究社区风险意识及当地**猪链球菌**菌株分子特征的理想场所。

**2. 材料与方法：**
**2.1. 研究设计与地点：**
本研究在泰国东北部那空拉差西玛省开展，重点关注查伦普拉基亚特（Chaloem Phra Kiat）、卡姆塔莱索（Kham Thale So）、丹昆托特（Dan Khun Thot）和穆昂（Mueang）三个地区——这些地区的感染率相对较高[29]。2021年3月该省曾发生过**猪链球菌**疫情，这些地区也被纳入调查范围。研究地点见图1。研究对象为数据收集时的居住在这些地区的居民。
**2.2. 数据收集工具与方法：**
研究采用了结构化问卷，评估居民对**猪链球菌**感染的认识、态度和行为（KAP）。问卷采用泰文编写，内容包括四部分：社会人口统计特征、知识水平、态度及行为习惯。在最终确定问卷内容前，研究人员对20名受访者进行了预测试，以评估问卷条目的清晰度、回答模式、完成时间以及问卷内容的适用性和覆盖范围。根据预测试反馈对问卷进行了修订。最终问卷用于正式调查。社会人口统计部分收集了性别、年龄、教育程度和月收入等信息，这些因素可能影响**猪链球菌**感染风险。知识部分通过十个封闭式问题（选项为“是”、“否”或“不确定”）评估居民对**猪链球菌**的基本了解。为避免随机猜测，只有正确回答才计为1分，错误或不确定回答计为0分。这种做法有助于确保分数准确反映真实认知。知识总分范围为0-10分，分为高（8-10分）、中（6-7分）和低（0-5分）。态度部分通过五个正向陈述（1表示“强烈反对”，5表示“强烈同意”）评估居民对**猪链球菌**感染的担忧、风险感知及行为倾向。行为部分调查了可能与**猪链球菌**感染相关的日常行为，包括食物准备、消费习惯和个人卫生习惯，问题采用五级频率评分（1=从不，5=总是）。

**2.3. 数据分析：**
数据使用Stata 17.0软件（Stata Corp LLC，美国德克萨斯州大学城）进行分析。描述性统计指标（频率、百分比、中位数和四分位数范围IQR）用于总结参与者的人口统计特征和KAP数据。通过Shapiro–Wilk检验和直方图观察判断数据是否符合正态分布。KAP得分被分为不同等级（高、中、低）。使用Pearson卡方（χ2）检验分析KAP得分与社会人口统计变量之间的关联，当卡方假设不成立时采用Fisher精确检验。Spearman等级相关系数（rs）用于评估知识、态度和行为得分之间的相关性。统计显著性标准为p < 0.05。
**2.4. 样本收集与**猪链球菌**鉴定：**
2023年1月至2025年1月期间，研究人员从泰国那空拉差西玛省的三个屠宰场采集了285份猪鼻咽拭子样本。这些屠宰场负责接收来自多个农场的猪只，适合监测当地流行的**猪链球菌**菌株。样本运输过程中保持在4–8°C条件下，运输时间不超过24小时。样本在添加了Streptococcus Selective Supplement（Oxoid，英国巴斯丁斯特克）的Todd–Hewitt琼脂（THA，印度塔内）上培养，温度为37°C，培养时间为18–24小时。每个样本中选取最多六个类似链球菌的菌落（小圆形、半透明至灰色、边缘光滑）并在相同条件下再次培养18–24小时，以增加不同猪只中**猪链球菌**的多样性。为了限制克隆菌落的过度代表，来自同一头猪的相同血清型菌落被视为单一菌株，并在多样性分析中仅计数一次。所有分离株首先使用过氧化氢酶测试进行筛选，然后通过针对recN基因的物种特异性PCR确认为S. suis [36]。PCR扩增使用Taq DNA聚合酶（New England Biolabs，Ipswich，MA，USA）进行。2.5. S. suis的分子特征S. suis分离株的血清型是使用Okura等人描述的方法[37]基于双重PCR确定的，该方法针对荚膜多糖合成（cps）基因。多重PCR反应使用QIAGEN多重PCR Master Mix（QIAGEN，Hilden，德国）进行。PCR扩增在标准条件下进行，包括初始变性和随后30个循环的变性、退火和延伸，以及最后的延伸步骤。扩增产物通过琼脂糖凝胶电泳进行分析，并根据预期的扩增子大小进行解释。之前已确认的已知血清型的S. suis分离株被用作阳性对照。无法通过基于cps的多重PCR测定可靠区分的血清型对（血清型1与14以及血清型2与1/2）使用错配扩增突变测定（MAMA）-PCR [38]进行解析。本研究中未进行MassARRAY分析；然而，如先前所述[39]，在有数据的情况下采用了之前生成的基于MassARRAY的血清型结果。毒力相关基因的鉴定使用Silva等人描述的方法[40]，针对epf、sly和mrp基因进行多重PCR。多重PCR反应使用QIAGEN多重PCR Master Mix（QIAGEN，德国）进行。对mrp基因检测呈阳性的样本进一步使用Taq DNA聚合酶（New England Biolabs，USA）进行PCR以确定mrp变体。之前已确认携带epf、sly或mrp的分离株被用作PCR的阳性对照。S. suis分离株的表型特征是通过基于七个保守管家基因的MLST方法确定的，遵循标准的DNA提取、PCR扩增和测序程序。基因组DNA使用Omega Bio-tek DNA提取试剂盒（Omega Bio-tek，Norcross，GA，USA）提取。七个管家基因的PCR扩增使用Taq DNA聚合酶（New England Biolabs，Ipswich，MA，USA）进行，使用的引物和循环条件由King等人描述[14]。然而，在某些分离株中mutS基因的扩增失败；因此，对这些样本使用了Rehm等人描述的引物[41]。PCR产物使用NucleoSpin? DNA纯化试剂盒（Macherey-Nagel，Düren，德国）进行纯化，并在测序前合并用于文库制备。扩增子使用Illumina平台进行测序（双端读长，300 bp）。测序读长经过质量过滤，并使用SPAdes进行从头组装。从组装的contigs中提取每个位点的等位基因序列，并通过将获得的等位基因谱与S. suis MLST数据库（PubMLST；https://pubmlst.org/ssuis/（2025年8月20日访问）进行比对来确定STs）。本研究中使用的所有引物列在补充表S1中。3. 结果 3.1. 调查参与者的社会人口学特征参与者的社会人口学特征总结在表1中。共有500名居住在Nakhon Ratchasima省指定研究地区的参与者被纳入分析。研究人群主要为女性（83.4%），超过一半年龄≥56岁（51.6%），其次是46-55岁（30.2%）。大多数参与者报告月收入<15,000泰铢（86.0%）。近一半的参与者完成了初等教育（47.0%），而36.4%获得了中等教育。关于食品相关实践和认知，75.4%的参与者报告为自己或家人准备食物，72.4%表示收到过有关S. suis预防的信息。大多数参与者（88.2%）表示之前了解S. suis的暴发。表1. 参与者的社会人口学特征（N = 500）。3.2. 对S. suis感染和食品安全的认识总体而言，64.6%的参与者报告之前了解S. suis，平均知识得分为7.4 ± 1.9（满分10分），属于中等知识水平。大多数参与者正确识别猪是人畜共患病传播的来源（87.0%），并认识到食用生猪肉是感染途径（93.2%）。然而，只有54.6%正确识别直接接触生猪肉是潜在的传播途径，45.4%的参与者没有认识到直接接触生猪肉是S. suis的传播途径，表明在传播方面的知识存在差距。关于预防和临床特征的认知，大多数参与者正确识别了适当的厨房卫生措施，包括将用于原材料的刀具和砧板与用于其他食物的分开（78.2%）以及处理生猪肉时戴手套（75.8%）。对早期临床症状的认识相对较高，78.4%正确识别了发热、寒战和头痛等症状。大多数参与者认识到感染的潜在严重性，86.2%承认S. suis感染对人类可能是致命的。尽管如此，26.8%的参与者错误地认为S. suis感染可以在不寻求医疗护理的情况下自行解决。这些回答总结在表2中。表2. 关于S. suis的知识问题和正确答案（N = 500）。3.3. 对风险行为和预防的态度如表3所示，参与者对食用猪肉或猪肉产品时感染S. suis的风险表示出中等的关注程度（中位数=3，IQR=4）。相比之下，对于优先预防S. suis感染及其对消费者健康的影响的态度非常积极（每个陈述的中位数=5，IQR=0）。关于处理生猪肉前伤口覆盖的态度总体上是中立的（中位数=4，IQR=3）。参与者也表示出很高的意愿改变行为以降低S. suis感染的风险（中位数=5，IQR=0）。表3. 关于S. suis的态度问题和中位分数（N = 500）。3.4. 居民的食品安全实践如表4所示，参与者报告食用肉类或非猪肉类产品的频率为中等（中位数=3，IQR=2）。对于食用完全煮熟的猪肉、处理生猪肉后洗手以及在食用生猪肉后出现症状时及时就医等预防措施的认知水平较高（每个陈述的中位数=5，IQR=0）。参与者还表示，先前关于S. suis感染的信息可以提高意识并导致预防行为的改变（中位数=5，IQR=0）。相比之下，处理生猪肉时使用厨房手套的比例较低（中位数=1，IQR=2）。关于生肉用筷子的分开以及在自助餐厅用餐的做法报告的频率为中等（中位数=3，IQR=4），而使用单独的砧板处理生肉或在使用前彻底清洁砧板则较为普遍（中位数=5，IQR=2）。从认证或标准批准的来源购买猪肉的情况也经常被报告（中位数=5，IQR=1）。3.5. KAP分数与社会人口学变量之间的比较社会人口学特征与S. suis风险水平之间的关联在表5中呈现。知识水平与性别和教育水平显著相关（所有p < 0.05）。在女性参与者、年龄≥26岁的参与者、收入较高类别的参与者以及具有中等或更高教育水平的参与者中，观察到良好的知识比例较高。表5. 社会人口学特征与S. suis的知识、态度和实践风险水平之间的关联（N = 500）。总体而言，大多数参与者对S. suis持有积极的态度。态度与任何社会人口学特征均无显著关联（所有p > 0.05）。描述性地来看，26-35岁年龄段的参与者中积极态度的比例最高。在年龄≥36岁的参与者中，大约75-80%表现出积极态度，而在18-25岁的参与者中比例较低。大多数参与者被分类为具有低风险行为。实践风险水平与性别显著相关（p < 0.01），女性报告低风险行为的比例高于男性。实践风险水平与年龄、月收入或教育水平之间未见显著关联（所有p > 0.05）。3.6. 知识、态度和实践之间的相关性根据Evans的分类[42]，相关系数被分为非常弱（0.00–0.19）、弱（0.20–0.39）、中等（0.40–0.59）、强（0.60–0.79）和非常强（0.80–1.00）。Spearman等级相关性表明知识、态度和实践风险水平之间存在弱但统计上显著的关联（补充表S2）。知识与态度呈正相关（rs = 0.22，p < 0.001），而实践风险水平与知识和态度均呈负相关（rs = ?0.18，p < 0.001；rs = ?0.12，p = 0.010）。3.7. S. suis分离株的分子特征在285个鼻咽拭子样本中，122个（42.8%）被确认为S. suis阳性。从这些阳性样本中获得了155个S. suis分离株，且在28个样本中恢复了多个分离株。155个分离株的血清型鉴定显示，87个（56.1%）被分为16种血清型，其中血清型9最常见（10.3%，n = 16），其次是血清型3（7.7%，n = 12）和血清型2及31（各4.5%，n = 7）。剩余的68个分离株（43.9%）无法分型。整体血清型分布见图2。图2. 155个S. suis分离株的血清型分布，n（%）。基于毒力相关基因的检测，155个分离株中有35个（22.6%）携带至少一个毒力相关基因（表6）。最常见的毒力相关基因谱型是mrp?/sly?/epf?（120/155，77.4%），其次是mrp+/sly+/epf?（17/155，11.0%）、mrp+/sly?/epf?（10/155，6.5%）和mrp?/sly+/epf?（8/155，5.2%）。值得注意的是，本研究中没有检测到任何S. suis分离株中的epf基因。在27个mrp基因阳性的分离株中，发现了四种mrp变体：mrps（4/27，14.8%）、mrp+（7/27，25.9%）、mrp?（1/27，3.7%）和mrp???（1/27，3.7%）。然而，有14个分离株（14/27，52%）表现出约500 bp的非典型扩增子或未检测到任何已知变异模式。这些分离株被标记为mrpUT，表明mrp位点存在无法通过当前PCR方案分类的变异。表6. 毒力相关基因谱型在毒力基因阳性S. suis分离株中的分布（N = 35）。在87个具有指定血清型的S. suis分离株中，选择了13个代表血清型1/2、2、5、9、16和24的分离株进行MLST分析。选中的分离株被分配到八个不同的ST，包括ST28、ST2938、ST2942、ST3147、ST3148、ST3149、ST3150和ST3151。五个ST（ST3147-ST3151）是新的，并已在S. suis PubMLST数据库中注册。ST2942和ST3147都是与暴发相关的ST1688的单一位点变体，表明它们具有密切的等位基因关系。13个分离株中ST的分布总结在补充表S3和S4中。单个分离株的分子特征，包括血清型、毒力相关基因谱型和ST，总结在补充表S5中。4. 讨论除了对养猪业造成重大经济损失外，S. suis还是一种重要的能够引起人类严重感染的人畜共患病原体[43]。泰国被认为是全球报告的人类S. suis感染发生率最高的国家之一[9]，大多数暴发发生在北部和东北部地区[11,44]。近年来，Nakhon Ratchasima省报告的人类S. suis感染发生率相对于其他省份来说较高，并且呈现出上升趋势[13]。有趣的是，尽管中部地区的养猪密度较高[45]，但报告的人类S. suis感染较少[46]。在本研究中，居民表现出对S. salah感染风险的不同认知水平，同时观察到Nakhon Ratchasima省的猪中S. salah的流行率相对较高。对居民KAP的评估表明，他们对S. salah感染的整体认知和预防态度及行为总体上是积极的。然而，尽管知识水平相对较高，仍有相当一部分参与者对传播途径存在误解，尤其是认为感染风险仅限于食用猪肉。这一发现表明他们对非饮食暴露途径（如在处理或准备猪肉时与生猪肉的直接接触）的理解不够充分。需要指出的是，这些调查结果可能无法完全代表那空拉差西玛省所有居民的情况，因为采用的是目的性和便利性抽样方法，这可能会引入对更容易接触和愿意参与调查的个体的选择偏差。

受访者的态度和行为大体上是积极的，反映出他们强烈支持预防措施，并愿意减少高风险行为。态度已被认为是健康意识和预防行为的重要决定因素[47]，这与知识和态度之间的积极关系一致。然而，知识和态度与实际行为之间的相关性较弱且呈负相关，表明意识与行为改变之间存在差距。类似的危险行为在泰国北部也有报告，仅靠知识不足以改变这些行为，因为受到习惯和文化的影响[32]，这表明这些行为可能是根植于文化中的，难以改变。

进一步分析相关因素表明，社会人口统计特征在塑造对S. suis感染的认识和预防行为方面起着重要作用。知识水平的差异受到性别和教育程度的影响。此外，预防行为与性别的关联更为显著，女性总体上报告的行为更为安全。这些发现与纳安省和清迈省之前的研究结果一致，那些研究也报告了女性参与者中更好的预防行为[32,48]。

总体而言，本研究的结果表明，预防行为受到个体意识之外的因素影响，包括常规的食品准备习惯和既定的饮食习惯。先前的研究表明，东南亚地区的人类S. suis感染受到多种相互作用因素的影响，如知识、信念、性别、年龄和社会经济状况[44]。来自帕尧省的证据进一步表明，公共卫生教育活动可以减少疫情爆发后的感染率；然而，如果预防信息没有得到持续强化，这些效果可能会随时间减弱。在传统节日期间（此时食用生猪肉较为普遍），感染的再次发生凸显了持续且适合文化的预防策略的重要性[44]。

与泰国之前的研究相比，本研究中观察到的感染率与其他地区和设计不同的研究结果一致，表明猪群中S. suis的检出率存在差异。Wongnak等人[49]报告曼谷四个猪肉供应链中，与猪相关的样本中S. suis的检出率为10.9%（54/496），环境样本中为5.21%（25/480）。相比之下，Meekhanon等人[45]在泰国中部的那空巴通省和拉差武里省采集的样本中报告的检出率为37%。最近，Lunha等人[36]在中部地区的屠宰场采集的鼻咽样本中报告了60.25%的检出率，而Mala等人[50]在北部五个省份采集的鼻咽样本中报告的检出率仅为7.7%。这些差异可能归因于多种因素，包括地理区域、样本量、研究设计、采样时间、样本类型、实验室方法以及研究区域内的猪群密度和生产系统的差异。

本研究的血清型分析显示，之前在人类感染中报道的血清型（血清型2、4、5、9、14、16、21、24和31）占所有分离株的约30%。其中，血清型2被认为最具毒性，并且与严重的人类感染密切相关[51]。与泰国中部地区之前的研究相比，Lunha等人[36]和Meekhanon等人[45]报告的属于人类感染相关血清型的分离株比例较低（分别为21%和22%）。虽然单凭血清型无法推断实际的动物源性风险或致病性，但之前在人类感染中报道的较高比例的血清型表明可能存在具有动物源相关性的菌株。然而，风险评估还应结合毒力相关基因特征和MLST背景，因为本研究中发现的大多数ST与泰国人类病例中常见的ST不同，而ST28是之前已知与人类分离株相关的最主要血清型[20]。此外，本研究中观察到的不可分型分离株的比例与泰国之前报道的比例相当[36,45,50]。

毒力相关基因的分析显示，最常见的基因特征是epf?/sly?/mrp?（77.4%），这与之前的报道一致[45]。这些发现表明，在本研究中从鼻咽拭子中获得的分离株中，缺乏所有三个主要毒力相关基因的S. suis菌株占多数。然而，具有较高毒力潜力的菌株可能在上呼吸道中含量较低，可能在横断面采样中被遗漏或检测不足。与之前的研究[45]相比，本研究中sly阳性的分离株比例较低（16% vs 27%），而mrp阳性的分离株比例在两组研究中相似（17% vs 18%）。这些差异可能反映了不同地理区域间菌株分布的差异。值得注意的是，两项研究中都没有检测到epf基因，这表明这种毒力决定因子在泰国屠宰 pigs 中的S. suis 菌株中可能不起重要作用。此外，最近的证据表明，缺乏这三个毒力相关基因的菌株仍然可以在实验动物中引起疾病[52]，这表明致病性可能由其他遗传因素介导。因此，有必要进一步研究其他与毒力相关的基因，以更好地理解S. suis的致病机制。

MLST分析显示，那空拉差西玛省的S. suis分离株具有显著的ST多样性，包括ST28、ST2938、ST2942以及五种新的ST（ST3147–ST3151）。ST28的检测值得注意，因为这种ST经常与患病猪相关，并且也在人类感染中有报道[15,53]。ST2942是本研究中检测到的最普遍的ST。为了可视化识别出的ST之间的等位基因关系，使用PHYLOViZ Online根据MLST等位基因特征生成了一个goeBURST快照（补充图S1）。网络显示，本研究中检测到的ST形成了一个相连的簇，表明几个菌株之间存在密切的等位基因关系。新的ST位于该网络内，并且与先前描述的猪类菌株密切相关。ST3147是暴发相关ST1688的单基因位点变异体，而其余的新ST（ST3148–ST3151）位于与已知猪类ST相同的goeBURST网络内。鉴于MLST分型的分离株数量有限，这些关系应谨慎解读，并需要在更大数据集和补充的系统发育分析中得到验证。

重要的是，从健康猪中分离出的菌株仍可能具有致病潜力，例如克隆复合体94中的ST1689，在体外显示的毒力与人类相关的ST94菌株相当[54]。因此，持续的分子监测对于监测S. suis的持续遗传多样化和潜在的致病性菌株的出现仍然很重要。

5. 结论

本研究显示，尽管那空拉差西玛省的居民对S. suis的知识、态度和预防行为总体上表现良好，但关于传播途径的误解和某些高风险行为仍然存在。同时，该省屠宰猪中S. suis较为普遍，血清型、ST和毒力相关基因特征存在相当大的多样性，包括已知具有动物源相关性的菌株。这些发现表明，S. suis可能仍然是那空拉差西玛省以及类似高发病率地区的公共卫生问题，这支持了将猪的微生物监测与有针对性的行为风险沟通相结合的综合方法的必要性。然而，在解释这些结论时应考虑研究的局限性，包括横断面设计、KAP调查的便利性抽样、仅限于特定时期屠宰猪的抽样，以及缺乏纵向随访。

补充材料

以下支持信息可以在以下链接下载：https://www.mdpi.com/article/10.3390/vetsci13050458/s1：
- 表S1：本研究中使用的引物。
- 表S2：关于S. suis的知识、态度和行为之间的Spearman相关性。
- 表S3：选定S. suis分离株的序列类型分布（N = 13）。
- 表S4：S. suis分离株的多位点序列分型（MLST）等位基因特征（N = 13）。
- 表S5：基于cps类型、毒力相关基因特征和序列类型的S. suis分离株的分子特征（N = 13）。
- 图S1：本研究中识别的S. suis序列类型（STs）的goeBURST快照，以ST1688作为参考。