长期非编码RNA NNT-AS1在重症肺炎患儿中的表达及其对脂多糖诱导的人胚胎肺成纤维细胞损伤的影响

《Hereditas》：Expression of long non-coding RNA NNT-AS1 in children with severe pneumonia and its effect on lipopolysaccharide-induced human embryonic lung fibroblast injury

　　

摘要

背景

重症肺炎（SP）威胁着儿童的生活质量和健康。本研究旨在探讨重症肺炎儿童血清中NNT-AS1的表达情况及其对脂多糖（LPS）诱导的人类胚胎肺成纤维细胞损伤的影响。

方法

本研究纳入了69名重症肺炎患儿、62名轻症肺炎患儿和75名健康对照组。使用LPS诱导的MRC-5细胞建立了肺炎细胞模型。通过si-NNT-AS1和miR-23a-3p抑制剂进行了功能丧失实验。利用实时定量聚合酶链反应（RT-PCR）检测NNT-AS1和miR-23a-3p的表达水平。通过接收者操作特征曲线（ROC）和Kaplan-Meier方法评估了NNT-AS1的诊断效果和预后价值。细胞活力和凋亡情况通过3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物（MTT）检测法及流式细胞术来确定。炎症因子通过酶联免疫吸附测定法（ELISA）进行检测。通过荧光素酶报告基因和RNA免疫沉淀实验验证了NNT-AS1与miR-23a-3p之间的相互作用。使用皮尔逊相关系数（Pearson correlation coefficient）分析相关性。

结果

重症肺炎患儿的NNT-AS1表达水平显著升高，且具有良好的诊断效能（曲线下面积AUC=0.815）。高水平的NNT-AS1表达预示着较差的生存预后。沉默NNT-AS1可提高细胞活力，减少凋亡，并缓解炎症反应。miR-23a-3p是NNT-AS1的靶标。抑制miR-23a-3p部分逆转了NNT-AS1沉默对LPS诱导的MRC-5细胞损伤的保护作用。

结论

重症肺炎患者的血清NNT-AS1表达水平升高，其表达与临床预后相关。NNT-AS1通过调节miR-23a-3p参与LPS诱导的细胞损伤过程。这些发现为理解重症肺炎的发病机制提供了新的理论依据。