加多苷在抗焦虑方面的药理潜力：行为学与分子层面的证据

《Journal of Ethnopharmacology》：Pharmacological potential of gardoside in anxiety: Behavioral and molecular evidence

　　马山镇波|杨欣星|张静|李龙|王进|曹金毅|苗珊|张瑞|史晓鹏|王新尚
第四军医大学西安西京医院药学系，陕西省西安市，710032，中华人民共和国

**摘要**
**民族药理学意义**
栀子（Gardenia jasminoides J. Ellis）是一种具有食药功能的传统草药，具有“清热泻火、和解毒”的功效，广泛应用于治疗焦虑症。Gardoside（GS）是从这种植物中提取的一种环烯醚萜糖苷化合物，是其主要的生物活性成分之一。然而，GS在治疗焦虑症中的疗效及相关机制尚未有相关研究报道。

**研究目的**
本研究旨在探讨GS对抗焦虑症的治疗潜力，并阐明其作用机制。

**方法**
通过强迫游泳（FS）应激建立小鼠焦虑模型，并通过行为实验评估GS的抗焦虑效果。利用全细胞膜片钳技术记录海马CA1区锥形神经元的兴奋性突触传递。通过网络药理学预测潜在靶点和通路，并通过分子对接和分子动力学模拟进行验证。Western blotting技术用于检测海马组织中PI3K/AKT通路及相关蛋白质的表达水平。通过腹腔注射PI3K/AKT通路激动剂Recilisib（HY-101625）验证其作用机制。

**结果**
行为实验表明，GS以剂量依赖性方式改善了小鼠的FS诱导焦虑行为。全细胞膜片钳记录显示，GS可逆转FS诱导的自發性兴奋性突触后电流（sEPSC）频率和幅度的增加，以及海马神经元的动作电位发放频率。此外，GS还降低了AMPA受体GluA1亚基在S831和S845位点的磷酸化水平以及GluA1的总蛋白表达水平。网络药理学分析表明，PI3K/AKT信号通路是关键通路。分子对接和分子动力学模拟证实，GS能够稳定结合PI3K/AKT信号通路的关键靶点，如EGFR、PIK3R1和AKT1。Western blotting结果显示，GS显著抑制了FS诱导的海马组织中p-PI3K和p-AKT水平的升高。更重要的是，PI3K/AKT激动剂HY-101625不仅拮抗了GS的抗焦虑行为效应，还逆转了GS对p-PI3K、p-AKT、p-GluA1-S831、p-GluA1-S845和p-NR2B-S1303蛋白表达的抑制作用。

**结论**
GS能够显著缓解小鼠的FS诱导焦虑行为，其作用机制可能与抑制海马区PI3K/AKT信号通路的过度激活有关，从而调节谷氨酸受体功能并降低神经元兴奋性。本研究为GS作为潜在抗焦虑药物的开发提供了重要的药理学依据。

**引言**
焦虑是一种普遍且严重的心理健康问题，其特征是过度担忧、情绪紧张以及对潜在威胁的持续恐惧（Kandola等人，2022年）。据世界卫生组织统计，全球约有3亿人受到焦虑的影响，且患病率逐年上升，成为重要的公共卫生问题（Ahmed等人，2023年；Shahbazi等人，2022年）。除了对心理福祉的显著影响外，焦虑还会损害社交功能并降低生活质量，同时引发多种身体状况，包括心血管疾病、消化系统紊乱和免疫失调，对整体健康造成重大负担（Civieri等人，2024年；Olatunji等人，2007年）。虽然有多种治疗药物被批准用于临床治疗（如苯二氮卓类、SSRI类和SNRI类），但其使用仍受限于诸多缺点（Hao等人，2025年）。苯二氮卓类可能导致依赖性和耐受性，长期使用还可能引起认知障碍（Mangolini等人，2019年）；SSRI类和SNRI类常导致恶心、失眠和体重增加，且起效缓慢，患者反应差异较大（Jakubovski等人，2019年）。此外，部分患者改善效果有限或无法耐受不良反应。因此，开发创新药物疗法并阐明其作用机制已成为紧迫的研究课题。

焦虑的发生与大脑关键区域（如前额叶皮层、杏仁核和海马）的神经元活动失调密切相关。证据表明，这些区域中PI3K/AKT信号通路的异常激活会干扰情绪调节并导致焦虑相关症状（Bishop，2007年）。作为核心调控网络，PI3K/AKT通路控制着氧化应激、细胞凋亡和自噬等过程（Matsuda等人，2019年），同时对神经元功能起到关键调控作用（Skopalova等人，2021年）。通过调节海马神经元的突触可塑性，该通路影响功能连接性和信息流动；其活动紊乱会破坏神经可塑性，进而导致情绪失调和焦虑相关行为（Boozari和Hosseinzadeh，2022年；Yan等人，2017年）。研究进一步表明，PI3K/AKT通路的持续过度激活会改变神经元结构（表现为轴突和树突肥大及突触密度异常），从而扰乱神经网络稳定性并引发焦虑行为（Thomas等人，2023年）。压力是焦虑症状的主要诱因，会显著提高海马中的AKT磷酸化水平，这种过度激活与压力驱动的焦虑行为密切相关（Lisieski等人，2018年）。靶向抑制杏仁核或前额叶皮层中的PI3K/AKT通路可通过调节突触可塑性和神经递质信号传导显著缓解焦虑症状（Jiang等人，2021年），凸显其作为焦虑治疗干预手段的潜力。

中医通过多通路、多靶点和多组分相互作用发挥治疗作用，其综合药理学特性受到越来越多的研究关注，特别是在焦虑管理领域（Liu等人，2025年）。栀子（Gardenia jasminoides J. Ellis）是一种长期使用的药用和食用草药，在《黄帝内经》中有记载，并被列入2020版《中国药典》，具有“清热泻火、和解毒”的功效（Hou等人，2024年；Wang等人，2025年）。现代药理学研究表明，栀子具有护肝、利胆、抗炎、降糖、降压、抗血栓、神经保护和抗肿瘤作用（Hou等人，2024年；Worapongpaiboon等人，2024年；Zhang等人，2024年）。其化学成分多样，包括环烯醚萜类、二萜类、三萜类、有机酸酯和黄酮类，其中环烯醚萜类是其主要生物活性成分（Wang等人，2024年）。在抗焦虑药物开发背景下，人们对中医单体化合物的关注日益增加。作为中医中的重要生物活性成分，这些单体不仅是新药发现的重要资源，还具有独特的治疗优势（Zhao等人，2025年）。现有研究表明，如小檗碱（Habiba等人，2025年）、刺柏素（Guo等人，2024年）、人参皂苷Rb1（Yu等人，2024年）和枳橙苷A（Zhang等人，2025年）等单体能够缓解焦虑行为，显示出显著的治疗潜力。从栀子中提取的Gardoside（GS，见补充图1）具有抗炎、抗氧化和抗菌作用（Liu等人，2025年），但其对抗焦虑的疗效及相关机制尚不明确，需要进一步系统研究以明确其在精神疾病中的治疗前景。

本研究采用小鼠焦虑模型全面评估GS的行为效应，并结合网络药理学和分子生物学方法研究其对PI3K/AKT信号通路的影响。结果表明，GS通过抑制PI3K/AKT通路激活显著缓解了小鼠的焦虑行为，为将其开发为抗焦虑药物提供了机制依据。

**药物和试剂**
Gardoside（纯度≥98%，批号：AF22052002，CAS号：54835-76-6）购自Alpha Biotechnology（中国成都）；地西泮片（批号：250303）由山东Sine制药有限公司（中国德州）提供；激动剂Recilisib（HY-101625）购自MedChemExpress（美国普林斯顿）；抗体（β-actin、PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt、GluA1、p-GluA1-S831、p-GluA1-S845、NR2B和p-NR2B-S1303）购自CST Biotechnology（美国马萨诸塞州）。

**实验动物**

**GS对FS诱导焦虑行为的改善作用**
为了评估GS对FS诱导焦虑行为的治疗效果，进行了经典的行为试验——开放场地测试（OF test）和逃避平台测试（EPM）（见图1A）。OF测试结果显示，与对照组相比，FS组在中区停留时间和行进距离均显著减少（P < 0.001），表明成功诱导了焦虑行为（见图1B–D）。与FS组相比，低剂量GS组在中区的停留时间没有显著变化……

**讨论**
焦虑是一种常见的精神疾病，具有病程长、复发频繁和难以完全缓解的特点，对社交功能和整体健康构成长期威胁（Newman等人，2013年）。目前的临床治疗主要依赖西药；然而，这些疗法存在起效缓慢、长期使用后疗效下降以及停药后高复发率等局限性（Conclusion）。

**作者贡献声明**
马山镇波：撰写初稿、验证、方法学设计、研究实施、资金获取、数据管理。
杨欣星：验证、方法学设计、研究实施、数据分析。
张静：验证、软件应用、方法学设计、数据分析。
李龙：研究实施、概念构思。
王进：数据分析。
曹金毅：数据分析。
苗珊：数据可视化、项目统筹。
张瑞：撰写、审阅与编辑、验证。
史晓鹏：撰写。

**利益冲突声明**
作者声明没有已知的可能影响本文研究的财务利益或个人关系。

**致谢**
本研究得到陕西省科学技术厅（项目编号2023-JC-YB-783）和空军医科大学快速响应项目（项目编号2023KXKT064）的财政支持。