香芹（Foeniculum Vulgare Mill）粗叶水甲醇提取物对顺铂（cisplatin）诱导的瑞士白化小鼠肝毒性的保护作用

《Pharmacological Research - Natural Products》：Hepatoprotective Effects of Foeniculum Vulgare Mill Hydromethanol Crude Leaf Extract Against Cisplatin-Induced Hepatotoxicity in Swiss Albino Mice

　　**Kibur Hunie Tesfa | Chernet Desalegn Gebeyehu | Adamu Ambachew Shibabaw | Alex Ayenew Chereka | Gemeda Wakgari Kitil | Asrat Tadele Ewunetie**
**生物化学系，医学院与健康科学学院，贡德尔大学，埃塞俄比亚贡德尔**

**摘要**
**民族药理学意义**
肝病是一个严重的公共卫生问题，尤其是在发展中国家。茴香（Foeniculum vulare Mill）作为一种传统药物，含有多种生物活性化合物，我们在先前的研究中证明了其抗氧化、抗炎和保肾作用。

**研究目的**
本研究旨在探讨茴香叶的水甲醇提取物对顺铂诱导的肝损伤在瑞士白化小鼠中的保护作用。

**材料与方法**
共30只瑞士白化小鼠（体重在25.0至38.6克之间）被分为五组：**第I组**给予20毫升/千克蒸馏水，**第II组**仅给予顺铂；**第III组、IV组和V组**分别给予100、200和400毫克/千克体重的提取物。实验第11天，**第II至V组**各接受7.5毫克/千克体重的顺铂单次给药。小鼠在禁食一夜后于第15天被麻醉并处死，随后进行肝功能检测和组织病理学检查。使用DPPH试验测定提取物的抗氧化活性。数据录入EpiData 4.7版本，导出至SPSS 25.0软件，并采用单因素方差分析（ANOVA）及Tukey事后检验进行分析。

**结果**
与**第I组**相比，**第II组**的小鼠血清ALT、AST、ALP和总胆红素水平显著升高，总蛋白水平显著下降。而**第IV组和V组**的这些指标明显低于**第II组**（p < 0.001）。此外，**第IV组和V组**的肝指数也低于**第II组**（p < 0.05）。与阴性对照组相比，提取物表现出对肝损伤的剂量依赖性保护作用。

**结论**
研究表明，茴香叶提取物可以有效预防顺铂引起的氧化性肝损伤和功能障碍。其保护作用可能归因于其减少金属离子和清除自由基的能力。

**引言**
肝脏在代谢和解毒体内的外来物质中起着关键作用。其结构损伤可能由多种因素引起，包括饮酒、药物使用、化学暴露、自身免疫疾病、微生物感染以及环境或工业毒素[1]。特别是某些药物常常是导致肝损伤的重要原因。肝生物标志物（如天冬氨酸转氨酶（AST）、丙氨酸转氨酶（ALT）、碱性磷酸酶（ALP）和总血清胆红素（TSB）水平的升高是肝细胞损伤的生化指标[2]。这类损伤占所有肝衰竭病例的20%-40%。药物性肝损伤（DILI）是导致药物研发中止、发布上市后警告和限制使用的常见原因[3][4]。
目前，癌症仍然是全球主要的健康问题之一。顺铂是一种常用的化疗药物，对多种人类癌症（如晚期肺癌、宫颈癌、食道癌、转移性睾丸癌和卵巢癌）具有疗效。据认为，顺铂通过增强内在caspase活性和产生活性氧物质来诱导肝细胞凋亡[5]。氧化应激会损害蛋白质、脂质、DNA、RNA、谷胱甘肽和ATP等细胞内大分子[6]。
目前尚无精确有效的肝病治疗方法，现有药物价格昂贵且副作用众多。因此，开发廉价、安全且有效的新型药物至关重要。人们对利用草药减少化学药物毒性的兴趣日益增加。许多来自芳香植物和药用植物的化合物（如黄酮类）具有抗氧化作用，这些化合物在预防和治疗医学中越来越受到重视[7]。
茴香（Foeniculum vulgare）是一种属于伞形科（Apiaceae）的芳香二年生药用植物[8]，在埃塞俄比亚的草原地区广泛分布，当地称为“Ensilal”（阿姆哈拉语）。该植物具有多种药用功效，如促进消化、利尿、疏通呼吸道、缓解便秘、减轻疼痛、刺激胃肠道蠕动、抗痉挛和抗炎[9][10]，同时具有抗氧化作用，并能维持肝脏正常功能[11]。茴香叶的主要植物成分包括酚酸、生物碱、萜类、香豆素、黄酮类、单宁和甾体，这些成分存在于水/甲醇（20:80, v/v）提取物中[12]。其种子和干燥部位常用于增加传统饮料（如“areke”和“tej”）的风味。在埃塞俄比亚，烤制的茴香粉还加入传统菜肴（如doro wot）中[13][14]。新鲜叶片也被用于治疗淋病、淋巴结结核（Naqarsa）、肾病和鼻出血[15]。据我们所知，目前尚无关于茴香叶提取物作为肝保护剂的功效研究。因此，本研究旨在探讨其对抗顺铂诱导的肝毒性的效果。

**部分研究内容**
**总体目标**
评估茴香叶水甲醇粗提物对瑞士白化小鼠顺铂诱导的肝毒性的保护作用。

**具体目标**
- 评价提取物对肝功能标志物（ALT、AST、ALP）的影响。
- 测定提取物在肝脏组织中的抗氧化活性。
- 检查治疗后的肝脏组织病理变化。
- 确定提取物的剂量依赖性保护潜力。
- 研究氧化应激在其中的作用。

**设备与试剂**
本研究使用了多种化学试剂，包括99.5%甲醇、蒸馏水、0.9%生理盐水、10%福尔马林、石蜡、二甲醚（BDH Chemical公司）、氯化钠（NaCl，BDH Chemical公司）以及顺铂（来自贡德尔大学专科医院的肿瘤药房）。此外，还使用了滤纸、尼龙纱布、塑料样品架、法国制造的烤箱和Yemato设备。

**缩写说明**
ALP：碱性磷酸酶
AST：天冬氨酸转氨酶
ALT：丙氨酸转氨酶
DPPH：2,2-二苯基-1-吡啶肼
FVMLE：茴香叶提取物
TSB：总血清胆红素
TSP：总血清蛋白
提取物产率百分比：

**提取过程**
从340克干燥研磨的茴香叶中提取出35克深棕色胶状残留物，计算得到FVMLE的产率为：
**提取物产率百分比 = （粗提物重量 / 原料重量）× 100% = 35克 / 340克 × 100% = 10.3%**

**植物化学检测**
植物化学检测显示，茴香叶的水甲醇提取物含有黄酮类、生物碱、萜类、单宁、甾体、香豆素和酚酸（表1）。

**自由基清除活性（DPPH试验）**

**讨论**
顺铂是一种常用的化疗药物，对多种癌症有效，但会对多个器官造成损害，尤其是肝脏。多项研究探讨了药物对化疗副作用的预防和治疗作用[28][29]。因此，在使用顺铂时，需采用特定的保护措施，如使用抗氧化剂、自由基清除剂和天然草药提取物。

**结论**
本研究证明，茴香叶水甲醇粗提物对瑞士白化小鼠的顺铂诱导肝毒性具有显著保护作用。该提取物能有效降低肝损伤的生化指标，减轻氧化应激，并以剂量依赖性方式改善组织病理变化。这些结果表明，茴香的保护作用可能与其抗氧化机制有关。

**资金说明**
本研究未获得任何政府或非政府机构的资助。

**利益冲突声明**
所有作者均声明无不利益冲突。

**致谢**
我们感谢贡德尔大学提供实验室设施并支持本研究。同时感谢植物学家Getinet Masresha在鉴定和验证植物材料方面的宝贵贡献，也感谢实验室工作人员在整个研究过程中的热情支持。