Tectona grandis叶片补充对兔子生长、养分消化率、血清生化指标、肝脏抗氧化状态及盲肠微生物群的影响

《Veterinary and Animal Science》：Influence of Tectona grandis leaf supplementation on growth, nutrient digestibility, serum biochemistry, hepatic antioxidant status, and cecal microbial profile in rabbits

　　**Saheed A. Ahmed | Kazeem D. Adeyemi**
**动物生产系，伊洛林大学农学院，PMB 1515，尼日利亚伊洛林**

**摘要**
本研究探讨了饮食中加入大叶椴（Tectona grandis）叶粉（TGLM）对兔子生长、养分消化率、血清生化指标、肝脏抗氧化状态以及结肠微生物群的影响。72只42日龄的新西兰白兔（平均体重1130 ± 43克）被随机分配到18个重复组（每组3只兔子），并分别给予四种不同的饮食处理：0% TGLM（TGLM-0）、10% TGLM（TGLM-10）、20% TGLM（TGLM-20）或30% TGLM（TGLM-30），实验持续56天。结果表明，与TGLM-20组和TGLM-30组的兔子相比，TGLM-0组和TGLM-10组的兔子具有更高的饲料利用率和体重增长率（P < 0.05）。TGLM-10组的干物质消化率高于TGLM-30组，而 ether extract 的消化率也最高（P < 0.05）。TGLM-0组和TGLM-10组的粗蛋白消化率也高于TGLM-30组。TGLM 的添加降低了血清中的丙氨酸氨基转移酶水平，而TGLM-30组的碱性磷酸酶水平则高于TGLM-0组。随着TGLM添加量的增加，肝脏中的谷胱甘肽过氧化物酶、过氧化氢酶和超氧化物歧化酶活性也随之增强。TGLM 以剂量依赖的方式减少了结肠中的乳酸菌数量，同时降低了大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的数量。综上所述，可以在兔子饮食中添加10%的TGLM，而不会对生长指标或养分消化率产生不良影响。

**1. 引言**
在发展中国家，对动物源性食品的需求持续超过供给，主要是因为传统饲料资源价格昂贵且供应有限（Adesogan等人，2020；Henchion等人，2021）。饲料是畜牧业生产中最昂贵的投入，对谷物和豆类成分的依赖增加了生产成本，从而使动物蛋白变得更加难以负担（Pexas等人，2023）。这种情况加剧了对替代性和可持续饲料资源的寻求，这些资源可以在减少对传统饲料依赖的同时支持高效的动物生产（Alagawany等人，2022；Salem等人，2020；Simbaya等人，2020）。树叶作为一种实用的饲料来源，为牲畜提供了宝贵的营养和生物活性化合物（Adeyemi等人，2022；Omokore和Alagbe，2019；Simbaya等人，2020）。从树木中提取的叶粉含有酚酸、黄酮类、单宁和皂苷等成分，具有抗氧化、抗菌和免疫调节作用，可以提高动物的健康和生产力（Alagawany等人，2022；Hou等人，2018；Osman等人，2024；Salem等人，2020）。兔子（Oryctolagus cuniculus）能够高效地将树叶转化为肉，其饮食中可含有高达30%的粗纤维，而家禽的这一上限仅为10%（Safwat等人，2015；Wang等人，2021）。这减少了与人类对谷物的竞争，增强了小规模养畜的可持续性。已有研究表明，在兔子饮食中添加叶粉可以改善生长表现、胴体产量和健康指标（Adeyemi等人，2022；El-Adawy等人，2020；Omokore和Alagbe，2019；Osman等人，2024）。然而，绿色饲料的供应通常仅限于雨季，导致干旱期间出现饲料短缺（Salem等人，2020；Simbaya等人，2020）。因此，需要寻找全年都能提供营养丰富的树叶的树种。

大叶椴（Tectona grandis Linn.，属于马鞭草科）是一种广泛栽培的多用途树木，因其耐用的木材和生态适应性而受到重视（Moya等人，2014；Palanisamy等人，2009）。除了经济价值外，其叶片和其他植物部分含有具有杀菌、抗真菌、抗炎和抗氧化特性的植物化学物质（Daramola等人，2022；Ghareeb等人，2014；Krishna和Jayakumaran等人，2010；Kusnadi和Budyanto等人，2015）。在尼日利亚，柚木种植面积约为7万公顷，占非洲柚木种植总面积的一半以上（Dantani等人，2019；Shamaki等人，2011）。仅伊洛林大学的柚木种植园就占地616公顷（Amusa和Adedapo，2021），生产的树叶大量未被充分利用。由于柚木叶片丰富且含有丰富的植物化学物质，将其纳入牲畜饮食中有潜力降低饲料成本并提高生产力。先前的研究已经探讨了柚木叶片对体外发酵（Abd-El Rahman等人，2024）和牛生长表现（Kasihandari等人，2021）的影响，以及柚木叶提取物对鸡蛋品质的影响（Edi等人，2018）。此外，也有研究报道了柚木叶片对兔子肉的胴体特征和感官属性的影响（Ojali等人，2020）。然而，关于柚木叶片对兔子生长、养分消化率、血液化学指标、肝脏抗氧化状态和结肠微生物群的影响的数据仍然有限。基于柚木叶片的营养和植物化学特性，本研究假设将其加入饮食会影响兔子的生长表现、养分利用、抗氧化能力和结肠微生物群。因此，本研究旨在评估不同添加量（0%、10%、20%和30%）的TGLM对生长表现、养分消化率、血清生化指标、肝脏抗氧化状态和结肠微生物群的影响。

**2. 材料与方法**
2.1. **动物伦理**
实验方案得到了伊洛林大学动物护理和使用委员会的批准（批准编号：UERC/ASN/2023/2634）。
2.2. **叶片采集与加工**
从伊洛林大学柚木种植园的10年生大叶椴树上采集成熟叶片，在34 ± 3°C下风干5天，然后使用自制研磨机研磨至通过2.0毫米筛网。将处理后的TGLM包装在密封容器中，待使用。
2.3. **兔子喂养与管理**
72只42日龄的新西兰白兔（平均体重1130 ± 43克）被随机分配到24个铁丝网笼子中（每个笼子3只兔子）。采用完全随机设计，将笼子随机分配到以下四组饮食中：TGLM-0（无TGLM的饮食）、TGLM-10（含10% TGLM的饮食）、TGLM-20（含20% TGLM的饮食）或TGLM-30（含30% TGLM的饮食），具体见表1。每组设有6个重复实验。实验持续56天。饮食根据美国国家研究委员会（NRC，1977）的要求准备，并以颗粒形式提供。饲料和水无限供应。实验开始时及之后每周对兔子进行称重。记录每日提供的饲料量和拒绝的饲料量，并计算饲料转化率（FCR）。

**表1. 饮食处理的成分、化学组成和植物化学成分**
| 成分 | TGLM-0 | TGLM-10 | TGLM-20 | TGLM-30 |
|----------------|------------|------------|------------|------------|
| 大叶椴叶片 | 240 | 240 | 240 | 240 |
| 椰子仁饼 | 260 | 260 | 260 | 260 |
| 玉米麸皮 | 100 | 100 | 100 | 100 |
| 小麦内脏 | 300 | 200 | 100 | 0.00 |
| TGLM | 10.00 | 100 | 200 | 300 |
| 花生饼 | 50.0 | 50.0 | 50.0 | 50.0 |
| 骨粉 | 40.0 | 40.0 | 40.0 | 40.0 |
| 盐 | 2.50 | 2.50 | 2.50 | 2.50 |
| 维生素/矿物质预混剂 | 2.50 | 2.50 | 2.50 | 2.50 |
| L-甲硫氨酸 | 2.50 | 2.50 | 2.50 | 2.50 |
| L-赖氨酸 | 2.50 | 2.50 | 2.50 | 2.50 |
| 化学组成（%） | 98.26 | 98.12 | 98.52 | 98.32 |
| 粗蛋白 | 15.15 | 15.00 | 14.86 | 14.71 |
| Ether extract | 5.02 | 4.80 | 4.58 | 4.36 |
| 灰分 | 3.93 | 3.88 | 3.82 | 3.76 |
| 粗纤维 | 7.95 | 7.70 | 7.45 | 7.21 |
| 钙 | 1.71 | 1.71 | 1.71 | 1.71 |
| 磷 | 1.12 | 1.12 | 1.12 | 1.12 |
| 可消化能量（Kcal/kg） | 2365 | 2390 | 2415 | 2440 |
| 植物化学成分（mg/100 g） | | | | |
| 总酚类 | 6.22 | 70.87 | 133.51 | 196.16 |
| 总黄酮类 | 3.54 | 53.07 | 101.61 | 150.14 |
| 类固醇 | 0.89 | 20.27 | 38.66 | 57.04 |
| 甘苷 | 0.21 | 1.73 | 3.26 | 4.78 |
| 生物碱 | 0.67 | 5.03 | 9.38 | 13.74 |
| 单宁 | 0.12 | 9.49 | 17.78 | 26.07 |
| 三萜 | 0.45 | 27.25 | 52.72 | 78.19 |

2.4. **化学与植物化学成分分析**
饮食处理和TGLM的化学成分根据AOAC（2000）标准方法测定，包括干物质（方法934.01）、粗蛋白（方法984.13）、ether extract（方法920.39）、粗纤维（方法973.18）和灰分（方法942.05）。植物化学成分（总酚类、黄酮类、单宁、类固醇、甘苷和生物碱）的测定遵循Makkar（1993）和Yadav与Agarwala（2011）的方法。

2.5. **表观养分消化率**
表观养分消化率通过总粪便收集法（Perez等人，1995）进行评估。在第43天，从每组随机选取6只兔子，分别单独关在代谢笼中9天（前5天适应，后4天收集粪便）。每天提供固定量的饲料，并记录拒绝的饲料量。每天上午8:30收集粪便样本。将收集到的粪便称重，汇总后在60°C下烘烤至恒重。烘烤后的样本进行研磨，使用AOAC（2000）方法测定干物质、粗蛋白、ether extract和粗纤维含量。表观养分消化率公式为：
**消化率（%）= [(养分摄入量 - 粪便中的养分) / 养分摄入量] × 100**

2.6. **血清生化分析**
第53天，从每个重复组的两只兔子中通过耳静脉抽取5毫升血液，离心分离血清（3500 × g，18分钟），冷藏保存待检测。血清总蛋白（TP）使用Tietz（1995）方法测定。白蛋白、总胆固醇、碱性磷酸酶（ALP）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）和甘油三酯使用Randox Laboratories（美国WV）的试剂盒按制造商说明进行测定。

2.7. **肝脏抗氧化酶**
第56天，兔子全天自由饮水并禁食一夜。随后，每组随机屠宰两只兔子，通过切断颈动脉和颈静脉进行处死。取出肝脏样本，用冰冻生理盐水冲洗以去除血液残留物，然后置于磷酸盐缓冲液（pH 7.4）中匀浆。匀浆液离心后，使用Cayman Chemical（美国密歇根州安阿伯市）的试剂盒测定超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）和过氧化氢酶（CAT）的活性，以及总一氧化氮的含量。

2.8. **结肠微生物群**
从每组处死的兔子中收集结肠内容物，置于无菌试管中。每克样本与9毫升无菌蒸馏水混合，涡旋混匀后梯度稀释至10^-10。从适当稀释液中取1毫升接种于无菌培养皿中，加入灭菌熔化的琼脂。培养皿在37°C下孵育，用菌落计数器计数细菌数量。乳酸菌在De Man Rogosa Sharpe琼脂上厌氧培养48小时，大肠杆菌和金黄色葡萄球菌分别在伊红美蓝琼脂和Baird–Parker琼脂上好氧培养24小时。所有培养基均按制造商指南制备。

2.9. **统计分析**
实验采用完全随机设计。数据使用SAS（版本9.4；SAS Institute Inc., Cary, NC, USA）的通用线性模型进行分析。统计模型为：
**Yij = μ + Ti + eij**
其中Yij表示观察到的响应值，μ表示总体均值，Ti表示饮食处理的固定效应，eij表示随机误差。

根据测量的参数，实验单位有所不同：
- 对于生长表现，以每个笼子中的三只兔子为一个实验单位，分析前对数据进行平均处理。
- 对于表观养分消化率、肝脏抗氧化酶和结肠微生物群，以每个重复组的两只兔子的平均值作为实验单位。
- 当检测到显著的处理效应（P < 0.05）时，进一步使用正交多项式对比分析TGLM添加量对线性及二次响应的影响。

**3. 结果**
3.1. **饮食处理的化学与植物化学成分**
不同饮食处理的化学成分相当（表1）。然而，随着TGLM添加量的增加，其植物化学成分也相应增加。

3.2. **生长表现**
饮食中添加TGLM显著影响了兔子的生长指标（表2）。随着TGLM添加量的增加，最终体重（BW）、体重增长（BWG）、日均增重（ADG）和饲料转化率（FCR）均呈显著下降（P < 0.001）。此外，最终体重（BW）、体重增长（BWG）、饲料摄入量和FCR还表现出二次效应（P < 0.05）。TGLM-0组和TGLM-10组的兔子最终体重较高，FCR较低（线性效应，P < 0.001）。TGLM-0组和TGLM-10组的兔子体重增长和饲料摄入量也与较高添加量的组相比更高。在所有处理组中，TGLM-30组的兔子饲料摄入量、体重和日均增重最低。

**表2.**添加了Tectona grandis叶粉的兔子生长指标。

| 饲料处理 | 初始体重（克） | 最终体重（克） | 体重增加（克） | 饲料摄入量（克） | 饲料转化率 | 日体重增加（克） | 日饲料摄入量（克） |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| TGLM-0 | 1126.00 | 2075.33 | 949.33 | 3856.67 | 16.95 | 68.87 |
| TGLM-10 | 1101.33 | 1772.00 | 928.67 | 3766.33 | 16.58 | 67.26 |
| TGLM-20 | 1099.67 | 1679.33 | 559.67 | 2895.00 | 11.97 | 58.44 |
| TGLM-30 | 1106.67 | 1443.65 | 309.67 | 2272.33 | 11.97 | 51.70 |
| SEM | 3.65 | 44.32 | 50.75 | 50.29 | 0.94 | 0.83 |
| 总体 | | | | | | |

**线性分析** | **二次方分析** |

**营养成分消化率**
TGLM添加对营养成分的消化率产生了不同程度的影响（表3）。干物质消化率（DMD）、粗蛋白消化率（CPD）和醚提取物消化率（EED）表现出显著的线性效应（P < 0.05），而仅EED表现出二次方效应（P = 0.003）。TGLM-10组的兔子干物质消化率显著高于TGLM-30组。TGLM-0组的粗蛋白消化率高于TGLM-20和TGLM-30组，而TGLM-10组与TGLM-0和TGLM-20组之间没有显著差异。EED在TGLM-10组最高，在TGLM-30组最低。TGLM-20组的EED值低于TGLM-0和TGLM-10组，但高于TGLM-30组。粗纤维消化率未受到饲料处理的影响。

**血清生化指标**
TGLM添加对血清生化参数产生了不同程度的影响（表4）。TGLM-10组的血清白蛋白水平显著高于其他组。丙氨酸氨基转移酶（ALT）水平在TGLM-0组较高。TGLM-10和TGLM-20组的碱性磷酸酶（ALP）水平与其他组相当，但TGLM-0组的ALP水平低于TGLM-30组。甘油三酯、高密度脂蛋白（HDL）和低密度脂蛋白（LDL）胆固醇水平未受到饲料处理的显著影响。TGLM-0组的VLDL胆固醇水平高于TGLM-30组。

**肝脏抗氧化酶活性**
TGLM添加影响了兔子的肝脏抗氧化酶活性（表5）。随着TGLM添加量的增加，肝脏谷胱甘肽过氧化物酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）和超氧化物歧化酶（GPx）的活性也随之增加。TGLM-10和TGLM-20组的SOD活性没有显著差异，但低于TGLM-30组。TGLM-30组的GPx活性最高，而TGLM-0和TGLM-10组的GPx活性最低。过氧化氢酶活性随着TGLM添加量的增加而增加（线性关系，P < 0.001）。

**盲肠微生物群**
TGLM添加影响了兔子的盲肠微生物群（表6）。随着TGLM添加量的增加，乳酸菌数量减少。TGLM添加组的埃希氏杆菌和大肠杆菌数量低于对照组。

**讨论**
本研究提供了关于在兔子饮食中添加Tectona grandis叶粉的全面剂量-反应数据，首次系统评估了其对兔子生长性能、营养成分消化率、血清生化指标、肝脏抗氧化状态和盲肠微生物群等多个方面的影响。这些发现为这种本地丰富但未充分利用的植物资源在兔子营养中的潜在应用提供了有力证据。

10% TGLM的添加并未改变兔子的饲料摄入量、体重增加和饲料效率。较低的TGLM添加量可能保证了充足的营养供应和适口性，从而维持了正常的生长性能。这一观察结果与先前的研究一致，即添加10% Kigelia pinnata叶（Adeyemi等人，2022年）、桑叶（Hou等人，2018年）、Alchornea cordifolia叶（Ayodele等人，2016年）和Leucaena leucocephala叶（Adedeji等人，2013年）并未显著影响兔子的饲料摄入量或生长指标。

相比之下，20%和30% TGLM的添加减少了兔子的饲料摄入量和体重增加，其中TGLM-30组的表现最差。这种性能下降可能与实验饲料中较高的植物化学物质浓度有关（表1），包括单宁、生物碱、苷类、三萜类和甾醇类，这些物质的含量随着TGLM添加量的增加而增加。单宁已知会与膳食蛋白质和消化酶结合，从而降低营养成分的消化和利用率。此外，生物碱和某些三萜类化合物可能会使饲料具有苦味或收敛性，可能降低适口性和自愿饲料摄入量。饲料摄入量减少和营养成分利用率下降的结合效应可能导致喂食高浓度TGLM饲料的兔子生长性能较低。类似的变化也在喂食高浓度Leucaena leucocephala和Moringa oleifera叶粉的兔子中观察到（Safwat等人，2014年；Hou等人，2018年；Al-Sagheer等人，2019年）。

干物质消化率在对照组和TGLM添加组之间没有差异。然而，TGLM-30组的干物质消化率低于TGLM-10组，这可能是由于较高浓度的植物化学物质降低了消化率。这一观察结果与Osman等人（2024年）的研究一致，他们发现喂食30% Bridelia ferruginea叶粉的兔子干物质消化率低于喂食10%或20%叶粉的兔子。

TGLM-10组的粗蛋白消化率与TGLM-0组相当，表明10%的添加量不会显著影响蛋白质消化率。然而，TGLM-20和TGLM-30组的粗蛋白消化率降低，这突显了高浓度TGLM对蛋白质利用的潜在抗营养作用。这可能是由于这些水平下的TGLM中含有较多的单宁。单宁可以与膳食蛋白质和消化酶结合，降低蛋白质消化率和吸收（Chisowa，2021年）。同样，喂食超过10% Leucaena leucocephala叶粉的兔子粗蛋白消化率也降低（Adedeji等人，2013年）。Safwat等人（2015年）发现喂食30%和40% Moringa oleifera或Leucaena leucocephala叶粉的兔子的粗蛋白消化率低于对照组。

TGLM-10组表现出最高的醚提取物消化率，这表明适量的TGLM添加可能提高了 lipid消化率，可能是由于消化酶活性改善或营养成分利用率提高。这一发现与Ewuola等人（2012年）的研究结果一致，他们发现喂食10% Moringa叶粉的兔子醚提取物消化率高于喂食0%、5%和15% Moringa叶粉的兔子。然而，20%和30% TGLM添加量导致的醚提取物消化率显著下降表明，高浓度的TGLM可能对 lipid消化产生了抑制作用。这种下降可能是由于抗营养因子（如生物碱或单宁）的存在，它们可以与脂质结合或干扰脂解酶，降低脂质消化率。类似的趋势也在其他研究中观察到，即在富含单宁的叶粉中添加过量时，兔子?醚提取物消化率会降低（Abejeshi等人，2018年；Idowu等人，2013年）。

各饮食组之间的血清总蛋白水平相当，反映了饮食处理的等氮性质。同样，印楝叶（Ali等人，2025年）和Paulownia叶（Al-Sagheer等人，2019年）并未影响兔子的血清总蛋白。TGLM-10组较高的白蛋白水平与其较高的粗蛋白消化率相对应，表明在这一添加量下蛋白质代谢良好。喂食0% TGLM的兔子ALT水平较高可能是由于缺乏TGLM中存在的肝脏保护性植物化学物质。这些化合物在中等到高添加量下有助于减少氧化应激和炎症，从而降低ALT水平（Atta等人，2018年）。这一观察结果与Oloruntola和Ayodele（2017年）的研究一致，他们发现喂食15%木薯叶粉的兔子ALT水平低于喂食对照组的兔子。

喂食30%柚木叶的兔子血清碱性磷酸酶水平较高，这可能是由于过量的抗营养因子（如单宁和生物碱）的影响，这些因子可以诱导轻微的肝胆压力或干扰矿物质代谢（Fernandez和Kidney，2007年）。TGLM-10和TGLM-20组之间的ALT水平没有显著差异，而TGLM-30组的ALT水平低于TGLM-0组，表明适量的添加量在有益的植物化学物质（抗氧化和抗炎特性）和最小的抗营养影响之间达到了平衡，防止了明显的生理紊乱。血清生化指标在New Zealand白兔的正常生理范围内（?zkan等人，2012年）。

血清HDL、LDL和总胆固醇及甘油三酯水平在各饮食组之间相当，表明对脂质代谢和循环的影响有限。这一观察结果与Hou等人（2018年）的研究一致，他们发现喂食桑叶的饮食对兔子的总胆固醇、HDL和LDL胆固醇或甘油三酯没有影响。尽管如此，TGLM-30组的VLDL胆固醇低于TGLM-0组。VLDL将内源性甘油三酯从肝脏运输到外周组织（Van Zwol等人，2024年）；因此，VLDL水平的降低可能表明肝脏甘油三酯的合成或分泌减少。这种影响可能是由于TGLM中的多种植物化学物质，这些物质可以抑制脂质吸收或调节肝脏中的脂生成酶活性（Liu等人，2022年）。TGLM-10和TGLM-20组之间的VLDL胆固醇水平没有显著差异，表明TGLM添加量的影响具有剂量依赖性和非线性。胆固醇和甘油三酯水平在兔子的正常生理范围内（Jenkins，1993年）。

TGLM添加组中较高的SOD、GPX和CAT活性表明TGLM增强了肝脏的抗氧化防御系统。这种效果可能部分归因于TGLM中存在的植物化学物质，这些物质可以调节抗氧化途径并刺激内源性抗氧化酶的活性（Cheng等人，2017年）。随着TGLM添加量的增加，GPX和CAT活性的逐渐增加表明肝脏酶系统的剂量依赖性调节。这些酶协同作用，中和活性氧物种，保护肝细胞免受氧化损伤（Lee等人，2016年）。抗氧化酶活性的增强可能反映了TGLM中生物活性化合物的直接刺激作用。然而，也可能是因为高浓度TGLM中的植物化学物质导致了轻微的氧化应激，从而引起了酶活性的适应性反应。抗氧化酶的这种适应性上调有助于维持肝脏中的氧化还原平衡。据报道，在喂食桑叶（Hou等人，2018年）和Kigelia pinnata叶（Adeyemi等人，2022年）的兔子中，抗氧化酶活性也有类似的改善。饮食中添加TGLM后，盲肠中的乳杆菌、链球菌和大肠杆菌数量减少，这表明TGLM中的植物化学物质（如单宁和黄酮类）具有抗菌作用，可以抑制这些细菌的生长。例如，单宁可以破坏细菌细胞膜并抑制酶活性，从而减少肠道内的微生物数量（Sweet等人，2024年）。柚木叶及其提取物的抗菌特性已有文献记载（Daramola等人，2022年；Kusnadi和Budyanto，2015年；Younis等人，2023年）。所有微生物群落的减少表明TGLM可能具有广谱抗菌效果，而不仅仅是选择性地调节盲肠微生物群。此外，TGLM相对较高的纤维和单宁含量可能会通过减少可发酵底物的可用性和抑制微生物酶活性来改变盲肠的发酵模式，从而抑制 overall 微生物增殖。这种效应也可能部分解释了在高剂量TGLM添加时观察到的营养消化率下降现象，因为后肠中微生物活性的降低会限制发酵和营养物质的利用。在喂食含保罗ownia叶粉的兔子中也观察到了类似的微生物群体减少（Al-Sagheer等人，2019年）。相比之下，喂食桑叶粉可选择性降低大肠杆菌数量，同时增加乳杆菌数量（Hou等人，2018年），这表明微生物反应可能取决于叶粉中的植物化学成分。

5. 限制
本研究量化了Tectona grandis叶粉中的几类植物化学物质，包括总酚类、总黄酮类、甾体、苷类、生物碱、单宁和萜类。然而，这些植物化学物质的具体类型和单个化合物并未被鉴定，因此无法直接确定它们对观察到的生理和微生物反应的确切贡献。此外，微生物分析仅关注了选定的细菌群（乳杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌），采用的是基于培养的方法，并未评估整个盲肠微生物群落的结构，而使用16S rRNA测序等分子方法可以更全面地进行评估。此外，实验持续时间为8周，因此饮食中TGLM补充的长期影响，特别是在较高添加量下，对兔子健康、生产力和肠道微生物生态的影响仍有待阐明。

6. 结论
不同水平的TGLM添加到饮食中显著影响了兔子的生长性能、营养消化率、血清指标、肝脏抗氧化酶活性和盲肠微生物群体。TGLM-10添加量被认为是最佳水平，其饲料效率和最终体重与对照组相当，同时提高了醚提取物和粗蛋白的消化率，并增加了血清白蛋白水平。相比之下，TGLM-20和TGLM-30对饲料摄入量和生长性能产生了负面影响，其中TGLM-30在生长和营养消化率方面的表现最差。TGLM补充改善了肝脏抗氧化酶活性，添加量越高，酶活性越高，表明其具有剂量依赖性的抗氧化作用。饮食中的TGLM还减少了兔子盲肠中的乳杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌数量。虽然推荐添加10%的TGLM而不影响生长性能和营养消化率，但观察到的乳杆菌数量减少表明TGLM对有益肠道微生物群的影响值得进一步研究。未来的研究应探讨TGLM补充对兔子肠道微生物平衡、发酵特性、胴体特征和肉质的影响。

未引用的参考文献：
Abass等人，2024年；Kasihandari等人，2025年

伦理批准
所有涉及动物的实验程序均得到了伊洛林大学伦理审查委员会的批准（批准编号：UERC/ASN/2023/2634），并按照该大学的动物实验规定进行。

作者贡献声明
Saheed A. Ahmed：撰写——初稿、资源、项目管理、方法学、研究、正式分析、概念化。
Kazeem D. Adeyemi：撰写——审查与编辑、撰写——初稿、监督、资源、项目管理、方法学、研究、正式分析、概念化。